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Applications des systèmes d'imagerie par gel chimiluminescent dans le domaine de la biologie moléculaire
Date :2025-05-27Lire :0
Dans des applications pratiques, les systèmes d'imagerie par gel chimiluminescent sont utilisés dans le domaine de la biologie moléculaire, où ils sont couramment utilisés pour l'analyse quantitative et qualitative de macromolécules biologiques telles que l'ADN, l'ARN et les protéines. Par exemple, dans les études d'expression génique, la détection de fragments d'acides nucléiques marqués avec un substrat Luminescent spécifique permet de déterminer avec précision le niveau d'expression d'un gène et de comprendre son activité transcriptionnelle dans différents états physiologiques. Dans la recherche sur les protéines, le système peut aider les chercheurs à déterminer le poids moléculaire, la pureté et la teneur relative des protéines dans différents échantillons, fournissant une base importante pour la recherche fonctionnelle des protéines et le diagnostic des maladies.
En outre, dans le processus de recherche et développement de médicaments, un rôle essentiel est également joué. Il peut être utilisé pour surveiller les interactions des médicaments avec des biomolécules et évaluer l'efficacité et la sécurité des médicaments. En observant les changements de Luminescence de protéines spécifiques dans les cellules après le traitement du médicament, les chercheurs ont pu acquérir une compréhension approfondie du mécanisme d'action du médicament, examiner les candidats au médicament avec des effets thérapeutiques potentiels et accélérer le processus de recherche et de développement du médicament.
化学发光凝胶成像系统
Méthode d'étalonnage d'un système d'imagerie par gel chimiluminescent:
1. Calibration de l'intensité lumineuse:
- utilisation d'une source lumineuse Standard: placer une source lumineuse standard d'intensité lumineuse connue dans le champ de vision du système d'imagerie, ajuster les paramètres du système d'imagerie (tels que le temps d'exposition, le gain, etc.) de manière à ce que la luminosité de la source lumineuse standard dans l'image atteigne une valeur prédéterminée. L'échantillon de chimiluminescence est ensuite imagé à l'aide de ce paramètre calibré pour assurer la précision de la mesure de l'intensité lumineuse.
- utilisation de substances étalons chimiluminescentes: sélection de substances étalons chimiluminescentes appropriées dont l'intensité lumineuse a été déterminée avec précision. La substance standard est ajoutée au gel ou à la solution en quantité telle qu'elle produit une chimiluminescence. L'étalonnage de l'intensité lumineuse est réalisé en ajustant les paramètres du système d'imagerie pour que l'intensité lumineuse de la substance étalon dans l'image corresponde à une valeur connue.
2. Calibration de résolution:
- avec carte de test de résolution: utilisez une carte de test de résolution spécialisée, placez - la dans le champ de vision du système d'imagerie, la carte de test a généralement des bandes ou des motifs avec des espacements différents. La résolution du système est évaluée en acquérant une image de la carte de test à l'aide d'un système d'imagerie, en observant l'espacement des bandes ou les détails du motif dans l'image qui peuvent être clairement distingués. Si la résolution n'est pas conforme, elle peut être améliorée en ajustant les paramètres tels que la distance focale, l'ouverture, etc. de l'objectif.
- utilisation d'échantillons microscopiques: pour certains échantillons chimiluminescents permettant d'observer des microstructures, tels que des gels contenant des nanoparticules, etc., ils peuvent être utilisés comme référence pour l'étalonnage de la résolution. En imageant ces échantillons microscopiques et en observant les dimensions des structures qui peuvent être distinguées dans l'image, on vérifie si la résolution du système répond aux exigences expérimentales.
3. Calibration de l'uniformité:
- test de champ lumineux uniforme: créez un champ chimiluminescent uniforme, par exemple en répartissant uniformément la bonne quantité de réactif chimiluminescent dans un gel ou une solution afin qu'il émette une lumière relativement uniforme sur tout le champ de vision. Ce champ lumineux uniforme est ensuite imagé à l'aide d'un système d'imagerie dont l'homogénéité est évaluée en analysant les différences de luminance des différentes zones de l'image. Si la luminosité n'est pas uniforme, l'uniformité peut être améliorée en ajustant le système d'éclairage (par exemple, la répartition de la luminosité des lampes à LED), les performances optiques de la lentille ou les algorithmes de traitement d'image, etc.
- réglage du contraste: améliore la perception uniforme du système en ajustant les paramètres de contraste du système d'imagerie pour rendre plus visibles les différences entre les différentes zones de luminosité de l'image. Dans le même temps, il est également possible d'utiliser la fonction de correction d'uniformité dans le logiciel de traitement d'image pour post - traiter l'image et améliorer encore l'uniformité.