Un,Fermenteur biologique en acier inoxydableNettoyage et désinfection: construction d'une base opérationnelle stérile

Nettoyage préliminaire et rinçage

Utilisez une brosse douce ou un appareil de nettoyage mécanique pour éliminer le milieu de culture résiduel, les impuretés et les biofilms dans les réservoirs et les tuyaux.

Rincer à l'eau claire jusqu'à ce qu'il n'y ait aucun résidu visible, en veillant à ce que le désinfectant ultérieur touche suffisamment la surface.

Nettoyage chimique et désinfection

Lavage alcalin: 1% - 2% hydroxyde de sodium solution de lavage cyclique, dissoudre la matière organique (par exemple, protéines, polysaccharides), température 60 - 80 ℃, temps 30 - 60 minutes.

Décapage: 0,5% - 1% d'acide chlorhydrique dilué neutralise les résidus alcalins et élimine les sels inorganiques, temps 20 - 30 minutes.

Rinçage au pistolet à eau haute pression: utilisez une tête de pulvérisation rotative (pression > 50 bar) pour frapper l'angle mort et augmenter l'efficacité de 50% par rapport au brossage traditionnel.

Désinfection chimique: les désinfectants composés de peroxyde d'hydrogène (par exemple, Novo, 3 à 5%) sont trempés ou pulvérisés pendant 30 minutes pour tuer 99999% des bactéries, des germes et des phages.

Traitement final et vérification

L'eau stérile est rincée jusqu'à ce qu'il n'y ait pas de résidus de désinfectant et l'air stérile sèche le réservoir.

La charge microbienne est régulièrement testée (par exemple, prélèvement d'écouvillons de coton) pour s'assurer que le taux de contamination bactérienne est réduit de plus de 90%.

II. Stérilisation: assurer un environnement stérile

Opération d'extinction réelle (exemple: 121°c, 30 minutes)

Phase de préchauffage:

Fermez toutes les vannes et ouvrez la sortie de vapeur et la soupape d'échappement pour évacuer l'air froid.

Ouvrez lentement la vanne à vapeur à double enveloppe et détectez l'arrivée de la vapeur lorsque la température à atteindre 50 ° c.

Ajustez la vanne d'eau de condensation de la rangée à « réglage fin» et activez l'agitation pour rendre le milieu de culture thermiquement homogène.

Phase de réchauffement rapide:

Réduire l'ouverture de la vanne d'admission à double enveloppe lorsque la température atteint 90 ℃, ouvrir la vanne de condensation à côté de la vanne d'admission d'air du réservoir.

À une température allant jusqu'à 121 ° C et une pression de 0,1 MPa, un couvercle d'inoculation à 4 petits trous de vapeur d'eau est maintenu pendant 30 minutes.

Isolation et refroidissement:

Fermez la soupape de fond du réservoir et ajustez la pression de maintien de la soupape d'air d'admission et de la soupape d'échappement.

Refroidissement à la température de fermentation par air (pression du filtre 0,12 - 0,15 MPa) et circulation d'eau (ouverture de la vanne d'admission d'air du réservoir lorsque la température descend à 105 ° c).

Points de contrôle clés

Assurez - vous que la vapeur touche pleinement toutes les parties et évitez de désinfecter les angles morts.

Maintenir la pression positive à l'intérieur du réservoir pendant le refroidissement et empêcher la pression négative d'aspirer de l'air non propre.

Iii. Inoculation: opération strictement stérile

Préparation avant vaccination

Abaissez la pression du réservoir à ≤ 0,02 MPa, Desserrez le bouchon d'inoculation et placez un anneau de flamme (plus une aide à la combustion du coton).

Le liquide de semence est pré - agité jusqu'à la phase de croissance logarithmique, la quantité inoculée est de 5% à 10% (ajustée en fonction de la souche).

Processus d'inoculation stérile

Allumez le cercle de flamme, ouvrez le bouchon d'inoculation et serrez le bouchon après avoir versé rapidement le liquide de semence.

Augmentez immédiatement la pression du réservoir à 0,05 - 0,1 MPa pour éviter le contre - courant des hétérobactéries.

Contrôle environnemental

Fermez les portes et les fenêtres de l'atelier et les ventilateurs d'échappement pour réduire le flux d'air.

Les opérateurs portent des vêtements stériles, des gants et des masques pour éviter tout contact direct avec la bouche inoculée.

Iv. Contrôle de fermentation: paramètres de régulation précis

Paramétrage et surveillance

Température: maintenir la valeur de consigne (par exemple 37 ℃ ± 0,5 ℃) par le système de refroidissement / chauffage à double enveloppe.

PH: ajustement automatique goutte à goutte de l'acide (acide chlorhydrique dilué) ou de la base (hydroxyde de sodium) à la valeur cible (p. ex., pH 7,0).

Oxygène dissous (do): la vitesse d'agitation régulée (100 - 600 tr / min) et la ventilation (0,5 - 2 vvm) maintiennent une saturation do ≥ 30%.

Pression: maintenir la pression du réservoir de 0,05 à 0,1 MPa, augmenter la solubilité de l'oxygène et prévenir les infections bactériennes.

échantillonnage et enregistrement des processus

Toutes les 1 heure, les paramètres tels que ph, do, température, pression du réservoir sont enregistrés.

Échantillonnage selon les exigences du processus pour l'envoi de l'examen, la synchronisation de la microscopie pour observer la morphologie bactérienne.

Gestion des exceptions

Mousse excessive: ajout automatique d'un agent anti - mousse (par exemple, de type polyéther).

Défaillance de l'équipement: démarrez immédiatement le système de secours, enregistrez le temps de défaillance et les changements de paramètres.

V. décharge et nettoyage: garantir la polyvalence de l'équipement

Fin de fermentation

Fermez le système d'agitation et d'aération et ouvrez la vanne de fond du réservoir pour une décharge en douceur.

Le ferment est acheminé vers des équipements de traitement en aval (p. ex., centrifugeuses, filtres).

Nettoyage et entretien des réservoirs

Le ferment résiduel est rincé à l'eau claire, le lavage alcalin (1% NaOH) élimine les matières organiques et le lavage acide (0,5% HCl) neutralise les résidus alcalins.

Vérifiez l'usure des composants tels que la palette d'agitation, la valve, le capteur, etc. et Remplacez les pièces endommagées à temps.

Le réservoir est stocké dans un environnement ventilé après séchage pour éviter la rouille.

Six,Fermenteur biologique en acier inoxydableValeurs fondamentales des opérations standardisées

Réduction du risque de contamination bactérienne: la construction d'une triple barrière par nettoyage chimique, rinçage à haute pression et désinfection au peroxyde d'hydrogène réduit le taux de contamination bactérienne de plus de 90%.

Amélioration de l'efficacité de la fermentation: régulation précise de la température, du pH, de la do et d'autres paramètres, raccourcissement du cycle de fermentation de 5 à 15%.

Prolonger la durée de vie de l'équipement: l'entretien régulier et les opérations réglementées réduisent la corrosion, l'usure et réduisent les coûts de réparation de plus de 30%.