La microscopie électronique à balayage (MEB) utilise un faisceau d'électrons pour interagir avec l'échantillon, ce qui entraîne des exigences élevées en matière de conductivité, de planéité de surface et de propreté de l'échantillon. Différents matériaux nécessitent un traitement ciblé et les conseils pratiques suivants sont fournis à partir d'échantillons métalliques, non métalliques et biologiques.
Échantillons métalliques: la conductivité et le nettoyage de surface sont essentiels
Les échantillons métalliques ont une bonne conductivité électrique, mais l'oxydation ou la contamination de la surface peut interférer avec l'imagerie. Étapes de traitement:
Découpe et incrustation: sur de gros échantillons de métal, coupés en petits morceaux avec des fils ou des meules pour faciliter l'observation; Les métaux fragiles, tels que les métaux céramisés, doivent être fixés par incrustation à froid, telle que la résine époxy.
Polissage mécanique: broyer grossièrement avec du papier abrasif (400 \ à 2000 \) à son tour, puis polir avec de l'alumine ou de la pâte de polissage au diamant jusqu'au miroir pour réduire les rayures de surface.
Nettoyage: nettoyage par ultrasons pendant 5 à 10 minutes, élimination des résidus de polissage, puis déshydratation à l'éthanol ou à l'acétone pour éviter l'oxydation.
Traitement de conductivité (facultatif): si la conductivité de l'échantillon est mauvaise (par exemple, acier à haute teneur en carbone), une fine couche d'or (5 - 10 nm) ou de carbone peut être plaquée pour améliorer la réception du signal.
Échantillons non métalliques: amélioration de la conductivité et de la stabilité
Les non - métaux (par exemple, les céramiques, les macromolécules) ont une mauvaise conductivité électrique et doivent se concentrer sur la résolution des effets de charge. Techniques de traitement:
Revêtement: la surface est pulvérisée avec une couche d'or, de platine ou de carbone (épaisseur 2 - 20nm) qui forme une voie conductrice.
Traitement de séchage: les échantillons de biopolymères doivent être déshydratés en gradient (série éthanol ou acétone) et séchés au point de recristallisation (sécheur supercritique co₂) pour éviter la déformation par contraction.
Conductivité de surface: pour les matériaux poreux (tels que le charbon actif), il peut être imprégné de colle conductrice ou de pâte d'argent pour remplir les pores.
Échantillons biologiques: maintenir l'équilibre entre la structure et la conductivité
Les échantillons biologiques (cellules, tissus, etc.) doivent concilier préservation morphologique et conductivité. Étapes de base:
Fixation: fixation de la structure cellulaire avec du glutaraldéhyde ou du formaldéhyde, empêchant la déformation lors de l'observation.
Déshydratation: déshydratation par Gradient d'éthanol ou d'acétone (30% - 100%) pendant 10 - 15 minutes par étape.
Séchage du point critique: éviter l'effondrement de la structure causé par la tension superficielle, en préservant la morphologie tridimensionnelle des cellules.
Revêtement: pulvérisation d'une fine couche d'or ou de platine (2 - 5NM) qui réduit l'effet de charge tout en conservant les détails de surface.
Recommandation générale: tous les échantillons doivent être séchés par soufflage à l'azote de haute pureté après la préparation pour éviter les taches d'eau; Assurez - vous que la surface de l'échantillon est propre avant le revêtement, sinon le revêtement inégal affectera la qualité de l'image. Grâce au traitement ciblé, la résolution de l'image SEM peut être considérablement améliorée, fournissant des données fiables pour l'analyse des matériaux et la recherche biologique.