Le flux de travail de la microscopie électronique (EM) couvre les quatre principaux maillons de la préparation des échantillons, de la mise en service de l'équipement, de l'imagerie et de l'analyse des données, chacun nécessitant une manipulation fine pour assurer la qualité de l'image.

La préparation des échantillons est la base de l'imagerie. Le miroir électrique à transmission (TEM) exige que l'épaisseur de l'échantillon soit inférieure à 100 nanomètres, l'échantillon biologique doit être fixé au glutaraldéhyde, déshydraté à l'éthanol gradué et enveloppé dans une résine époxy, puis coupé en tranches nanométriques par une Trancheuse ultramince; Les échantillons métalliques doivent ensuite être broyés mécaniquement à l'échelle micrométrique, puis amincis par amincissement ionique ou par double pulvérisation électrolytique. Les échantillons de miroir électrique à balayage (SEM) doivent conserver la morphologie de surface et les échantillons biologiques doivent être fixés, déshydratés, séchés au point critique et traités par pulvérisation d'or pour améliorer la conductivité.

La mise en service de l'équipement doit être préchauffée pendant 30 minutes après la mise sous tension, après la stabilisation de l'instrument. Ajustez d'abord le canon à électrons pour que le faisceau d'électrons se concentre sur l'échantillon, en contrôlant le diamètre du faisceau à travers le diaphragme pour équilibrer la résolution avec la luminosité. Par la suite, l'objectif rotatif et l'anneau de mise au point de l'oculaire effectuent un réglage de la distance focale pour assurer la clarté de l'image; Choisissez le grossissement approprié en fonction des caractéristiques de l'échantillon et évitez les distorsions causées par des valeurs trop élevées. Enfin, en optimisant la qualité de l'image en ajustant le contraste et la luminosité, la table mobile place la zone cible au Centre du champ de vision.

Phase d'imagerie HD, le mode d'imagerie doit être sélectionné en fonction du type d'échantillon. TEM forme une image à haute résolution par pénétration électronique de l'échantillon qui permet d'observer l'ultrastructure interne de la cellule; SEM utilise des signaux électroniques secondaires pour présenter la topographie de surface de l'échantillon, ce qui convient à l'analyse des caractéristiques de surface du matériau. Pendant l'imagerie, il est nécessaire de surveiller la qualité de l'image en temps réel et d'ajuster les paramètres en temps opportun.

L'analyse des données utilise un logiciel professionnel pour agrandir, faire pivoter, mesurer et reconstruire en trois dimensions les images, extraire les paramètres structurels et les caractéristiques morphologiques pour fournir une base quantitative à la recherche scientifique.