PT pleine longueur d'onde Enzyme scalerIl s'agit d'un instrument d'analyse de haute précision intégrant plusieurs modes de détection tels que l'absorption UV - visible, la fluorescence, la chimiluminescence et d'autres, largement utilisés dans les sciences de la vie, le diagnostic clinique, la recherche et le développement de médicaments et la sécurité alimentaire. Ses principaux avantages sont une large couverture de longueur d'onde (généralement 190 - 1000nm) et des capacités de détection multifonctionnelles pour répondre à des besoins diversifiés allant de la recherche fondamentale à la production industrielle. Il est basé sur la loi d'absorption de la lumière (loi de Bill - Lambert), qui émet une longueur d'onde de lumière spécifique à travers une source lumineuse, et après absorption par l'échantillon, le détecteur mesure l'intensité lumineuse résiduelle, calcule l'Absorbance (A) pour déterminer la concentration moléculaire cible.

　　PT pleine longueur d'onde Enzyme scalerLes opérations doivent être combinées avec les exigences expérimentales (par exemple, le mode de détection, le type d'échantillon) pour la configuration des paramètres et le contrôle du processus, les étapes de base comprennent « préparation - Configuration - détection - traitement des données», ce qui suit est le processus opérationnel commun:

I. préparation avant l'opération

Préparation des échantillons et des réactifs

Assurez - vous que l'échantillon à tester (par exemple, plaque ELISA, solution d'acide nucléique, suspension cellulaire, etc.) a été traité conformément au protocole expérimental et qu'il n'y a pas de bulles d'air à l'intérieur de la microplaque, et que les parois de suspension des gouttelettes (s'il y a des bulles d'air, elles peuvent être enlevées en tapotant doucement sur les parois de la plaque; les gouttelettes de suspension des parois doivent être essuyées avec des

Préparer des contrôles vierges, des normes, des contrôles de qualité, disposés dans des microplaques selon une disposition prédéfinie (il est recommandé d'enregistrer la disposition des emplacements de trou pour éviter toute confusion).

Inspection instrumentale et environnementale

Vérifiez que le cordon d'alimentation de l'étalon enzymatique est correctement connecté, vérifiez que la Chambre d'échantillon est propre (pas de poussière, de résidus de liquide) avant de démarrer et essuyez - la avec un chiffon sans poussière si nécessaire.

Si l'expérience nécessite un contrôle de la température (par exemple, une incubation à 37 ° c) ou une commotion, vérifiez à l'avance que l'instrument fonctionne correctement (par exemple, si le module de contrôle de la température peut atteindre la température de consigne).

Allumez l'ordinateur et l'étalon enzymatique, lancez le logiciel d'exploitation compagnon et attendez que l'auto - test de l'instrument soit terminé (l'état "prêt" est généralement affiché).

II. Paramètres de la méthode de détection

Choisir le mode de détection

Le mode de détection correspondent est sélectionné dans le logiciel en fonction du type d'expérience:

Détection de la lumière absorbée (par exemple ELISA, quantification des acides nucléiques): Vous devez définir la longueur d'onde de détection (par exemple, longueur d'onde principale de 450 nm, longueur d'onde de référence de 630 nm), la bande passante (par défaut 1 - 5 nm).

Détection de fluorescence: Vous devez définir la longueur d'onde d'excitation (par exemple 485 nm), la longueur d'onde d'émission (par exemple 535 nm) et sélectionner la lecture supérieure / inférieure (l'échantillon liquide est généralement sélectionné en haut et la culture cellulaire en bas).

Détection de chimiluminescence: pas besoin de régler la longueur d'onde, sélectionnez directement le mode "chimiluminescence", faites attention à éteindre la source lumineuse de la Chambre d'échantillon pour réduire les interférences.

Détection cinétique: réglage supplémentaire de l'intervalle de temps de détection (par exemple, toutes les 10 secondes), de la durée totale de détection (par exemple, 30 minutes) et activation du contrôle de la température (pour une réaction à température constante).

Réglage des paramètres des microplaques

Sélectionnez la spécification de la microplaque (par exemple, plaque 96 puits, plaque 384 puits) et définissez la plage de détection (par exemple, « détection complète de la plaque» ou spécifiez un emplacement de trou spécifique, par exemple A1 - H12).

Pour exclure les effets de bord ou les trous partiels, vous pouvez marquer les trous « ne pas détecter » dans le logiciel.

Réglages des fonctions auxiliaires

Contrôle de la température: si la réaction nécessite une température constante (par exemple, une réaction enzymatique à 37 ° c), réglez la température cible (erreur généralement ± 0,1 ° c) et attendez que l'instrument soit préchauffé à la température définie.

Commotion: réglez le mode de commotion (p. ex., commotion linéaire), la vitesse de rotation (p. ex., 500 tr / min) et le temps (p. ex., 10 secondes) Lorsque vous devez mélanger l’échantillon avant la détection.

Correction de la longueur d'onde de référence (détection de la lumière absorbée): activez la « détection à deux longueurs d'onde» pour améliorer la précision des données en déduisant les interférences de fond (telles que les rayures de microplaques, les bulles d'air) par la longueur d'onde de référence (par exemple 630 nm).

Iii. Détection des échantillons

Chargement de microplaques

Placez délicatement la microplaque sur le plateau de la chambre à échantillon, assurez - vous que le bord de la plaque est aligné avec la fente de positionnement du plateau (évitez les erreurs de lecture dues au décalage de position), fermez la porte de la chambre à échantillon.

Lancer la détection

En cliquant sur "démarrer la détection" dans le logiciel, l'instrument s'exécute automatiquement selon une méthode prédéfinie et l'écran affiche la progression de la détection en temps réel (par exemple, les bits de trou terminés, la lecture en cours).

Évitez de toucher l'instrument ou d'ouvrir la porte de la Chambre d'échantillon pendant la détection pour éviter de perturber la stabilité du chemin optique.

Iv. Traitement et exportation des données

Voir les résultats en temps réel

Une fois la détection terminée, le logiciel génère automatiquement des données brutes (telles que les valeurs d'Absorbance, l'intensité de fluorescence) et les présente sous forme de tableaux ou de thermogrammes.

Vous pouvez afficher les données d'un seul puits, les moyennes (telles que la moyenne des puits répétés d'un étalon) ou générer une courbe standard (si la concentration de l'étalon est définie).

Analyse des données

Traitement des données selon les besoins expérimentaux:

Analyse quantitative (par exemple ELISA): le logiciel calcule automatiquement la concentration inconnue de l'échantillon en ajustant la courbe standard (linéaire, ajustement à quatre paramètres, etc.) à partir de la concentration de l'étalon et des valeurs correspondantes du signal.

Calcul du rapport (p. ex. pureté de l'acide nucléique): le rapport 260 / 280 nm, 260 / 230 nm est calculé automatiquement dans la détection de la lumière absorbée, la pureté de l'échantillon est évaluée.

Courbe cinétique: génère une courbe « valeur du signal - temps » qui peut calculer des paramètres tels que la vitesse de réaction, la demi - vie, etc.

Exportation et sauvegarde des données

Enregistrez les données au format par défaut du logiciel (par exemple.Csv,.Txt) ou exportez - les au format Excel, PDF pour la rédaction de rapports.

Il est recommandé d'enregistrer le modèle de méthode de détection en même temps (la prochaine fois, la même expérience peut être appelée directement sans avoir à répéter la configuration).

V. organiser après l'opération

Fermer l'instrument

Une fois la détection terminée, retirez la microplaque et nettoyez la Chambre d'échantillonnage (essuyez - la à temps en cas de fuite de liquide).

Éteignez successivement le logiciel d'étalonnage enzymatique, l'alimentation de l'instrument et l'alimentation de l'ordinateur.

Enregistrement et nettoyage

L'information expérimentale (p. ex. date de détection, modèle d'instrument, paramètres de méthode) est enregistrée pour faciliter la traçabilité des données.

Nettoyez régulièrement la Chambre d'échantillonnage et le plateau (essuyez - le avec de l'alcool à 75% pour éviter les résidus de réactifs corrosifs) et couvrez le pare - poussière lorsqu'il n'est pas utilisé pendant une longue période.