La spectroscopie de fluorescence microscopique est une technique qui combine la microscopie avec l'analyse spectroscopique de fluorescence pour la détection de haute précision des propriétés luminescentes des matériaux à l'échelle micrométrique. Il localise de minuscules zones à l'aide d'une optique microscopique, excite l'échantillon à l'aide de longueurs d'onde de lumière spécifiques et collecte de manière synchrone les données spectrales et de durée de vie de fluorescence qu'il émet. Méthodes analytiques pour l'étude des propriétés optiques et des caractéristiques spectrales d'une substance à des échelles minuscules. Le principe de base est d'utiliser le phénomène de fluorescence, c'est - à - dire que certaines molécules (fluorophores) émettent des longueurs d'onde de lumière plus longues après avoir absorbé des longueurs d'onde spécifiques de la lumière, en mesurant et en analysant ces signaux de fluorescence pour obtenir des informations sur la composition de la matière, la structure et la dynamique d'un échantillon.
Le cœur de cette technologie réside dans sa haute résolution, avec une résolution spatiale allant jusqu'à 2 microns et une résolution temporelle allant jusqu'à 1 nanoseconde, couvrant une gamme de longueurs d'onde allant de 200 à 900 nanomètres. Il est largement utilisé dans les matériaux semi - conducteurs, les nanoparticules, les marqueurs biofluorescents et d'autres domaines pour étudier les mécanismes de microluminescence, l'analyse des défauts et l'identification des composants.
Principes techniques
Phénomène de fluorescence: le Fluorophore passe à un état de haut niveau d'énergie après avoir absorbé la lumière d'excitation, puis libère une Fluorescence plus longue que la longueur d'onde de la lumière d'excitation lorsqu'il retourne à un niveau d'énergie inférieur. Ce processus suit la loi de Stokes selon laquelle la longueur d'onde de la lumière émise > la longueur d'onde de la lumière excitée.
Analyse spectrale: dispersion du signal de fluorescence en spectres par longueur d'onde à l'aide d'un spectromètre, détection de l'intensité de fluorescence à chaque longueur d'onde, formation d'une courbe spectrale caractéristique. La position du pic spectral, la forme et l'intensité des différents fluorophores sont * et peuvent être utilisées pour l'identification de la substance et l'analyse quantitative.
Imagerie microscopique: en combinaison avec des techniques de microscopie, la lumière d'excitation est focalisée sur de minuscules zones (telles que des cellules individuelles ou des nanomatériaux) pour permettre l'acquisition de signaux de fluorescence à haute résolution spatiale tout en acquérant des informations morphologiques et spectrales sur l'échantillon.
Maintenance maintenance
Nettoyage quotidien: essuyez la coque avec un chiffon propre et humide et évitez les solvants organiques tels que l’alcool. Vérifiez régulièrement les installations anti - poussière et gardez le périmètre de l'instrument propre.
Maintenance de la source lumineuse: la lampe au xénon ne doit pas être commutée fréquemment, elle doit être refroidie pendant une demi - heure après l'arrêt et redémarrée pour prolonger la durée de vie. Atteindre la durée de vie utile (généralement 500 heures) devrait être remplacé à temps.
Exigences environnementales: l'instrument doit être placé dans un endroit sec, sans vibration et horizontal, avec un espace d'au moins 0,3 m réservé autour pour dissiper la chaleur. L'alimentation doit être stable, un régulateur de tension est recommandé.
Stockage à long terme: Si vous ne l'utilisez pas pendant une longue période, allumez - le 1 à 2 fois par semaine pendant environ une demi - heure. La batterie est chargée à 50% lors du stockage, en évitant les environnements humides.