Les cellules libèrent différents types de vésicules d'origine membranaire dans l'environnement extracellulaire. Ces vésicules d'origine membranaire sont appelées vésicules extracellulaires (ve) et comprennent des exosomes et des microvésicules. Les exosomes sont des vésicules extracellulaires relativement petites (30 - 150 nm) qui transfèrent des macromolécules biologiques telles que des acides nucléiques, des protéines, des enzymes et des lipides entre les cellules et sont un mode important de communication intercellulaire. En outre, ils peuvent être utilisés comme biomarqueurs pour diverses maladies, ainsi que comme systèmes de livraison de médicaments naturels pour la prochaine génération d'agents thérapeutiques.

Dans cet article, nous décrivons une méthode pour isoler rapidement et simplement les exosomes des cellules souches dérivées de graisse en combinant des centrifugeuses rapides et ultrarapides. Cellules dans bioblu ® 0,3c culture en cuve de bioréaction jetable et par dasbox ® Contrôle du système Mini Bioréacteur. Le système dasbox Mini Bioreactor permet de cultiver un grand nombre de cellules souches, ce qui permet d'obtenir des exosomes à haut rendement. Par la suite, nous avons éliminé le milieu conditionné à l'aide d'une centrifugeuse cr22n. Il s'agit d'une centrifugeuse à grande vitesse avec un RCF allant jusqu'à 32 300 x G. Pour cet article, nous avons utilisé une rotation angulaire fixe r15a qui peut contenir simultanément des tubes à fond conique de 10 x 50 ML et 10 x 15 ml. Pour concentrer davantage les exosomes, nous avons utilisé une ultracentrifugeuse cp100nx avec un RCF maximal de 803 000 x G et un Rotor horizontal p32st capable de contenir des tubes de centrifugation de 6 x 40 ml. De plus, des exosomes purs et homogènes peuvent être rapidement isolés en utilisant le tampon de saccharose lors d'une étape d'ultracentrifugation par rapport au groupe témoin qui n'utilise pas le tampon de saccharose. Tout au long de la centrifugation, nous utilisons des rotors de grande capacité, ce qui réduit les étapes de centrifugation répétées et réduit le temps de séparation des exosomes à moins de 4 heures, plus rapidement que d'autres méthodes de séparation telles que la précipitation ou la filtration.