Voici une description détaillée du montage de la colonne de chromatographie liquide:
Préparation préalable
- vérification de l'état de l'instrument: Activez le chromatographe liquide, Confirmez que le système n'a pas d'indication d'alarme et que chaque composant fonctionne correctement. Une attention particulière est accordée à la stabilité de la pression de la pompe avec la stabilité de base du détecteur, qui est une condition préalable à l'installation et à l'utilisation ultérieures.
- vérifier l'apparence de la colonne de chromatographie: les nouvelles colonnes de chromatographie liquide sont généralement accompagnées d'un rapport d'inspection d'usine et d'un certificat de conformité. Voir si le cylindre de la colonne de chromatographie est cassé, fissuré et d'autres conditions, en particulier les sites de joint aux deux extrémités de la colonne, si vous trouvez un problème doit être remplacé à temps. Dans le même temps, les informations telles que le modèle, le numéro de série, etc. de la colonne de chromatographie sont enregistrées pour une enquête ultérieure et une utilisation de maintenance.
Étapes d'installation
1. Vidange de la phase mobile résiduelle du système: la phase mobile originale à l'intérieur de l'instrument est évacuée par une vanne à plusieurs voies, etc., évitant le mélange avec le solvant de conservation à l'intérieur de la nouvelle colonne de chromatographie pour produire des précipités ou des substances perturbatrices. La pompe peut être activée pour fonctionner à un débit inférieur pendant un certain temps.
2. Connecter la colonne chromatographique: déterminer la direction d'importation et d'exportation de la phase mobile de la colonne chromatographique (le fabricant général aura un logo clair sur la colonne chromatographique). Soigneusement raccorder une extrémité de la colonne de chromatographie à la ligne après l'échantillonneur et l'autre extrémité à la ligne avant le détecteur. Lors de la connexion pour assurer un ajustement serré de l'interface, la méthode commune est de serrer l'écrou de prise en charge avec la main d'abord, puis de renforcer correctement à l'aide d'une clé, mais faites attention à la force modérée pour éviter d'endommager le joint de colonne de chromatographie.
3. Rinçage initial: une fois l'installation terminée, sélectionnez la colonne de chromatographie relative à écoulement initial appropriée pour le rinçage. Pour les colonnes de chromatographie en phase inverse, on choisit généralement comme phase mobile initiale une solution mixte eau - solvant organique à forte proportion. Régler un débit plus faible et laisser la phase mobile s'écouler lentement à travers la colonne de chromatographie, dans le but de déplacer le solvant de conservation restant à l'intérieur de la colonne, tout en humidifiant la surface de remplissage de la phase stationnaire et en excluant les bulles].
4. Colonne de chromatographie équilibrée: après le rinçage initial, passer à la phase mobile cible pour l'opération d'équilibrage avant l'analyse. La colonne chromatographique est amenée à un état stable dans les conditions de phase mobile visées, en observant les variations de pression et la situation de base. Lorsque la pression est stabilisée et que la ligne de base tend à se calmer, cela indique que la colonne chromatographique est en grande partie bien équilibrée et que l'analyse de l'échantillon peut être effectuée.
Précautions
- Évitez l'introduction de bulles d'air: tout au long de l'installation, veillez particulièrement à empêcher l'air de pénétrer dans la colonne de chromatographie. Parce que les bulles d'air peuvent occuper l'espace à l'intérieur de la colonne, affectant l'effet de séparation du soluté, il peut également entraîner des pressions locales élevées pour endommager la colonne de chromatographie. Par conséquent, lors de la connexion des lignes et du rinçage, il est nécessaire de toujours prêter attention à la création de bulles d'air, si vous souhaitez l'exclure à temps.
- contrôle du débit et de la pression: Au début du rinçage et de l'équilibrage, il est déconseillé d'utiliser un débit trop élevé pour éviter que le lit de la colonne de chromatographie ne se détache ou ne se déplace en raison d'un choc soudain à haute pression. Au fur et à mesure que la colonne de chromatographie s'adapte à l'environnement de la phase mobile, le débit est ajusté à la plage appropriée en fonction de la situation réelle.
Grâce aux étapes d'installation et aux précautions spécifiées ci - dessus, il est possible d'assurer l'installation et l'utilisation correctes de la colonne de chromatographie liquide, jetant ainsi les bases pour obtenir des résultats d'analyse précis et fiables.