La colonne de chromatographie sert de composant central du chromatographe et les détails de son utilisation sont directement liés à la précision, à la reproductibilité et à la durée de vie de la colonne des résultats d'analyse. Voici une analyse complète des principaux détails d'utilisation:
Installation et activation initiale
1. Vérification de l'adéquation du système: Avant l'installation, vous devez vérifier complètement la fermeture et la propreté du système de voie d'air ou de liquide de l'instrument. La chromatographie en phase gazeuse doit se concentrer sur la pureté du gaz porteur et la sécurité de la ventilation; La chromatographie en phase liquide nécessite alors la confirmation de la compatibilité de la phase mobile avec le solvant de conservation à l'intérieur de la colonne et, si nécessaire, la conversion par un solvant de transition.
2. Traitement d'extrémité: les deux extrémités de la colonne de chromatographie doivent être coupées à plat et assorties à un joint d'étanchéité approprié pour assurer l'absence de bavures et une bonne étanchéité, éviter les volumes morts ou les fuites de liquide. Lors de l'insertion de l'entrée d'échantillon et du détecteur, vous devez suivre strictement les exigences de profondeur pour éviter la perte d'effet de colonne.
3. Vieillissement et équilibre: la nouvelle colonne doit être vieillie pour éliminer les impuretés résiduelles. La chromatographie en phase gazeuse nécessite une montée en température segmentée jusqu'à la température maximale tolérée et une surveillance de la stabilité de base; La chromatographie en phase liquide permet alors de saturer l'adsorption par plusieurs procédures d'analyse complètes, en particulier pour les composés macromoléculaires nécessitant un vieillissement prolongé.
Contrôle des conditions de fonctionnement
1. Gestion de la température et de la pression: évitez les fluctuations violentes de température et de pression afin de ne pas endommager la structure du lit de la colonne. La chromatographie liquide nécessite également de prêter attention à la limite supérieure de température des colonnes à matrice de gel de silice.
2. Phase mobile et utilisation du sel tampon: le flux correspond à la fixation et évite les solvants corrosifs forts. Lors de l'utilisation du sel tampon doit être bien filtré, rincer par la suite pour éviter le dégagement de la charge de colmatage cristallin. Le changement de proportion de solvant dans la chromatographie en phase inverse doit être progressif, empêchant l'effondrement de la phase de liaison.
3. Traitement pré - échantillon: tous les échantillons doivent être filtrés ou centrifugés pour éliminer les particules et utiliser préférentiellement l'extraction en phase solide et d'autres méthodes pour purifier la matrice complexe. L'ajout d'une colonne de protection avant l'admission peut intercepter efficacement les particules et les contaminants chimiques.
Maintenance et préservation
1. Nettoyage et régénération réguliers: après une utilisation à long terme, un solvant puissant peut être utilisé pour rincer la régénération, mais il faut faire attention à la direction et au contrôle du débit. En cas d'augmentation de la pression de la colonne ou d'anomalie de crête, vous pouvez essayer d'élaguer le remplissage de la tête de colonne pour restaurer les performances.
2. Stratégie de conservation: conservation à court terme recommande l'utilisation de la phase mobile actuelle (sans sel tampon); La conservation à long terme est alors choisie pour le méthanol pur ou l'acétonitrile, et des types spéciaux tels que les colonnes échangeuses d'ions peuvent être ajoutés aux agents bactériostatiques. Lors de la conservation, Scellez et étiquetez les informations sur le solvant, évitez la lumière et le séchage.
Traitement spécial de scène
1. Solution de nettoyage tampon: lorsque le dégagement se produit, il peut être lavé à l'envers avec une solution mixte méthanol / eau, combinée à une température élevée pour accélérer la dissolution.
Contrôle de la gamme de ph: la colonne de chromatographie à matrice de gel de silice doit contrôler strictement le pH de la phase mobile, des conditions spéciales peuvent être choisies pour le gel de silice hybride ou pour prendre des mesures de protection pré - colonne.
L'utilisation de colonnes de chromatographie nécessite des spécifications d'exploitation et des stratégies de maintenance rigoureuses. De l'installation à l'analyse quotidienne, le contrôle des détails de chaque maillon affecte l'efficacité et la durée de vie de la colonne.