Le testeur d'efficacité des antibiotiques est l'équipement central de la microbiologie pour la détection de l'activité des antibiotiques et sa précision de fonctionnement affecte directement la fiabilité des résultats de détection. Vous trouverez ci - dessous des conseils pratiques sur les processus opérationnels, les conseils clés, la maintenance quotidienne et la gestion des pannes pour améliorer l'efficacité de l'inspection et la précision des données.
I. processus et techniques opérationnels normalisés
Préparation et dilution des échantillons
Techniques:
Les normes antibiotiques doivent être conservées par lyophilisation, en utilisant un solvant spécial lors de la remise en solution, pour éviter l'utilisation d'une solution saline physiologique entraînant une atténuation de la puissance.
La conception du gradient de dilution doit couvrir 50% à 200% de l'efficacité attendue, par exemple lors de la détection d'échantillons de 100 u / ML, définir trois gradients de 50, 100, 200 U / ML pour assurer une régression linéaire r² ≥ 0,99.
Eviter la fosse:
Il est strictement interdit d'utiliser des ustensiles métalliques pour contacter l'échantillon et empêcher la dégradation catalytique des ions métalliques.
L'échantillon doit être prélevé dans les 30 minutes suivant la dilution, ce qui évite la perte d'efficacité due à une exposition prolongée.
Préparation et stérilisation du milieu de culture
Techniques:
Sélectionnez la Gélose de qualité chromatographique pour assurer une épaisseur uniforme de la couche bactérienne.
Après l'autoclave, il faut refroidir à 50 ℃ et retourner la plaque pour empêcher les températures élevées de tuer les germes indicateurs.
Eviter la fosse:
Évitez d'utiliser de l'eau contenant des ions Calcium / magnésium pour la formulation du milieu, empêchant la formation de chélates avec des antibiotiques d'affecter l'activité.
Après la stérilisation, le pH du milieu doit être ajusté à 6,8 - 7,2, au - delà de la plage, il doit être reformulé.
Échantillonnage et incubation
Techniques:
À l'aide d'un doseur en céramique, le doseur est contrôlé à 0,2 ml / trou, ce qui évite l'effet de bord causé par la diffusion du liquide.
Les conditions d'incubation doivent être strictement contrôlées à 35 - 37 ° C, humidité ≥ 70%, l'humidité peut être maintenue à l'aide d'une solution saturée de chlorure de sodium.
Eviter la fosse:
Après avoir prélevé l'échantillon, laissez reposer 15 minutes pour que le liquide soit absorbé, puis Transférez - le dans la boîte d'incubation pour empêcher l'écoulement de l'échantillon.
L'inspection hors boîte est interdite pendant l'incubation et évite les fluctuations de température supérieures à ± 0,5°c.
Mesure de la bactériostatique et analyse des données
Techniques:
Avec le système automatique d'analyse d'image, le paramètre de seuil de réglage améliore la précision de reconnaissance de bord.
Le traitement des données doit éliminer les valeurs anormales et les redétecter.
Eviter la fosse:
Évitez de mesurer en lumière vive et évitez que la lumière réfléchie interfère avec la reconnaissance d'image.
Lors de la mesure manuelle, vous devez utiliser un étrier Vernier et répéter la mesure 3 fois pour faire la moyenne.
II. Techniques de maintenance clés
Nettoyage et désinfection quotidiens
Opération:
Après l'expérience quotidienne, essuyez la plaque d'échantillonnage, la paroi intérieure de la boîte d'incubation avec de l'éthanol à 75% pour éviter la contamination croisée.
Retirez l'aiguille ponctuelle chaque semaine et nettoyez - la par ultrasons pendant 10 minutes pour éliminer les résidus de protéines.
Eviter la fosse:
L'utilisation de désinfectants contenant du chlore est strictement interdite et empêche la corrosion des pièces métalliques.
Il faut rincer 3 fois avec de l'eau pure après le nettoyage pour éviter que les résidus d'éthanol n'affectent les expériences ultérieures.
Maintenance des systèmes optiques
Opération:
Essuyez l'objectif de la caméra avec un chiffon sans poussière tous les mois et utilisez de l'air comprimé pour éliminer la poussière du capteur.
Calibrez l'intensité de la source lumineuse trimestriellement pour assurer un contraste d'image ≥ 90%.
Eviter la fosse:
Évitez de toucher directement la lentille et évitez la contamination par les empreintes digitales.
L'étalonnage doit être effectué dans une chambre noire pour éviter les interférences de la lumière ambiante.
Entretien des composants mécaniques
Opération:
Lubrifiez les guides d'échantillonneur de points chaque trimestre pour réduire la résistance au mouvement.
Remplacez les bandes d'étanchéité de la boîte d'incubation chaque année pour éviter les fluctuations de température dues aux fuites de chaleur.
Eviter la fosse:
La lubrification à l'huile est interdite et empêche la contamination du milieu de culture.
Après le remplacement de la bande d'étanchéité, un test de fonctionnement à vide de 24 heures est nécessaire pour confirmer la stabilité de la température.
Iii. Défaillances et solutions communes
| Phénomène de défaillance |
Causes possibles |
La solution |
| Cercle bactériostatique bord flou |
épaisseur inégale du milieu de culture |
Redescendre, calibrer la table d'opération à l'aide d'un niveau |
| Instabilité de l'échantillon |
Blocage de l'aiguille d'échantillon |
Aiguille de nettoyage par ultrasons, remplacement de la membrane filtrante 0,45 μm |
| Fluctuation de la température d'incubation & gt; ± 1 °C |
Défaillance du capteur de contrôle de la température |
Remplacement de la thermistance NTC (précision ± 0,1 ℃), étalonnage des paramètres PID |
| Taux d'erreur de reconnaissance d'image > 5% |
Atténuation de la source lumineuse |
Remplacement du panneau lumineux LED (durée de vie ≥ 50 000 heures), réglage de la distance focale de la caméra |
| CV de répétabilité expérimentale & gt; 10% |
Erreur de dilution de l'échantillon |
Utilisation d'un kit d'étalonnage de pipette (précision ± 0,5%) spécifiant le processus d'exploitation |
Iv. Vérification des performances et contrôle de la qualité
Test d'adéquation du système
Des étalons doivent être utilisés avant chaque lot d'expérimentation, exigeant un diamètre de cercle bactériostatique CV ≤ 5% et une régression linéaire r² ≥ 0,98.
La vérification de précision intermédiaire a été effectuée tous les mois, avec 5 détections répétées effectuées par différents opérateurs en 3 jours et un résultat RSD ≤ 8%.
Gestion de la traçabilité des données
Les images originales doivent être enregistrées au format TIFF, associé aux enregistrements expérimentaux.
Utilisez le système LIMS pour générer automatiquement des rapports de validité et éviter les erreurs de saisie manuelle.
Conformité réglementaire
Répond aux exigences des quatre règles générales 1431 de la pharmacopée chinoise, édition 2020, et accepte régulièrement l'étalonnage du Département de métrologie.
Conserver tous les enregistrements de contrôle de qualité pendant au moins 5 ans, prêt à vérifier.
V. techniques d'optimisation avancées
Mises à niveau automatisées
Accès au système robotique d'échantillonnage de points, réduisant le temps d'échantillonnage de points de 15 minutes / carte à 3 minutes, réduisant ainsi l'erreur humaine.
Utilisez l'algorithme de reconnaissance d'image ai pour éliminer automatiquement les cercles bactériostatiques anormaux et améliorer l'efficacité du traitement des données.
Contrôle environnemental
Installez un capteur de co₂ à l'intérieur de la boîte d'incubation pour simuler les conditions optimales de croissance microbienne.
Utilisez un laboratoire sans poussière et réduisez le risque de contamination.
Gestion des consommables
Sélectionnez la plaque de milieu de culture pré - stérilisé pour réduire l'erreur d'utilisation actuelle.
Utilisez des aiguilles ponctuelles jetables pour éviter la contamination croisée.