Le broyeur de cellules à ultrasons est un équipement expérimental couramment utilisé, principalement pour la fragmentation cellulaire, la lyse, la fragmentation tissulaire, l'extraction d'ADN / ARN, l'extraction de protéines et d'autres opérations. Il fonctionne en provoquant la rupture physique des cellules ou des tissus par des ondes mécaniques à haute fréquence générées par des vibrations ultrasonores. Voici comment utiliser le broyeur de cellules à ultrasons, y compris la préparation de l'appareil, les étapes de fonctionnement et les précautions:
1. Préparation de l'équipement
Vérifiez l'équipement: Vérifiez l'état de fonctionnement du broyeur de cellules à ultrasons avant de l'utiliser pour vous assurer que l'équipement fonctionne correctement. Vérifiez que le cordon d'alimentation, la sonde à ultrasons, le système de refroidissement (le cas échéant) sont en bon état.
Nettoyez la sonde: nettoyez la sonde pour éviter que les contaminants de l'expérience précédente n'affectent les résultats de l'expérience suivante. La sonde peut être essuyée à l'aide d'éthanol anhydre.
Préparation de l'échantillon: Préparez l'échantillon à traiter et il est généralement nécessaire de mélanger l'échantillon avec une quantité appropriée de lysat (par exemple, un tampon PBS), en veillant à ce que l'échantillon puisse être dispersé uniformément lors de la Sonication.
2. Paramètres de réglage
Choisissez la fréquence appropriée: les broyeurs de cellules à ultrasons ont généralement un choix de fréquence différent. En général, les fréquences courantes sont 20Khz, 25khz, etc. La nature de l'échantillon et le but de l'expérience doivent être pris en compte lors du choix de la fréquence.
Régler la puissance et le temps: régler la puissance et le temps appropriés en fonction de la nature de l'échantillon. La puissance est généralement réglée entre 30 et 80% et le temps varie de 5 secondes à 2 minutes. Il est recommandé de commencer avec une puissance plus faible et une courte durée pour éviter un écrasement excessif.
Puissance trop élevée: peut provoquer un échauffement excessif de l'échantillon ou un phénomène de mousse.
Trop longtemps: peut entraîner une accumulation excessive de calories, ce qui peut affecter l'activité des protéines et des enzymes dans les cellules.
Réglage du mode de fonctionnement intermittent: un fonctionnement intermittent est généralement utilisé pour éviter la surchauffe de l'échantillon, en particulier lorsque vous travaillez à haute puissance. Les réglages communs sont: 5 secondes de travail, 5 secondes d'arrêt.
3. Étapes de fonctionnement
Connecter la sonde: fixez fermement la sonde à ultrasons au générateur d'ultrasons du broyeur de cellules à ultrasons. Assurez - vous que la connexion entre la sonde et l'instrument est étroite.
Placer l'échantillon: placer l'échantillon à traiter dans un récipient approprié. Les récipients couramment utilisés sont des tubes transparents en polycarbonate ou de petits béchers, la taille du récipient doit correspondre à celle de la sonde.
Démarrez le système de refroidissement (le cas échéant): certains broyeurs de cellules à ultrasons nécessitent un refroidissement par eau ou un liquide de refroidissement circulant pour éviter la surchauffe. Assurez - vous que le système de refroidissement fonctionne correctement, conformément aux instructions de l'équipement.
Démarrez l'appareil: après avoir appuyé sur le bouton de démarrage, l'appareil commence à fonctionner. Veillez à observer l'état de fonctionnement de l'appareil pour vous assurer qu'il n'y a pas de bruit ou de vibrations anormales.
Augmentez progressivement la puissance et le temps: commencez par une puissance inférieure et Ajustez - la progressivement à la puissance et au temps appropriés. Après chaque période de traitement, suspendez l'équipement et vérifiez le degré de fragmentation de l'échantillon.
Fonctionnement intermittent: si l'échantillon est trop chaud ou crée des bulles d'air pendant le fonctionnement, suspendez la Sonication et laissez l'échantillon refroidir.
Fin du traitement: arrêter le traitement par ultrasons lorsque l'échantillon a atteint le degré de fragmentation souhaité.
4. Recueillir des échantillons
Arrêter l'appareil: lorsque le broyeur de cellules à ultrasons a terminé le traitement, appuyez sur le bouton stop pour éteindre l'appareil.
Nettoyage de la sonde: après avoir retiré la sonde, nettoyez la sonde à ultrasons à l'aide d'éthanol anhydre ou d'un solvant approprié.
Prélèvement de l'échantillon: prélever l'échantillon dans le récipient en vue d'une analyse ou d'un traitement ultérieurs.
5. Nettoyage et entretien
Nettoyage de l'équipement: après chaque expérience, nettoyez l'équipement, en particulier les sondes et les récipients, à temps pour éviter que les résidus d'échantillons n'affectent les performances de l'équipement ou ne contaminent les échantillons ultérieurs.
Entretien régulier: Vérifiez régulièrement les câbles, les sondes, le système de dissipation de chaleur, etc. de l'appareil pour maintenir le bon état de fonctionnement de l'appareil. Remplacez la sonde à ultrasons ou nettoyez le système de refroidissement si nécessaire.
6. Précautions
Évitez la surchauffe: le broyage par ultrasons peut provoquer une surchauffe de l'échantillon, en particulier à haute puissance et pendant de longues périodes de traitement. Le mode de fonctionnement intermittent est recommandé et la température de l'échantillon est vérifiée régulièrement pendant le traitement.
Éviter la contamination croisée: pour différents échantillons, des sondes différentes doivent être utilisées ou nettoyées pour éviter la contamination croisée.
Protection de l'audition: le broyeur de cellules à ultrasons peut produire un bruit plus important lorsqu'il fonctionne, de sorte que des oreillettes ou des bouchons d'oreille doivent être portés lors de l'opération pour protéger l'audition.
Empêcher la formation de bulles: évitez de créer trop de bulles lors de l'opération, ce qui peut affecter l'effet de broyage. Il est possible de choisir une puissance plus faible ou un intervalle plus long.