Le chromatographe par perméation de gel est une technique de chromatographie couramment utilisée pour l'analyse de composés macromoléculaires, principalement pour la séparation et la caractérisation d'échantillons de polymères, de protéines, d'acides nucléiques, etc., de différents poids moléculaires. Son principe de base est la séparation en fonction du comportement osmotique des molécules dans une charge ayant des pores spécifiques.

　　Chromatographe par perméation de gelLe principe de base est la séparation en utilisant la perméabilité différente des molécules de poids moléculaire différent dans la charge de gel. L'intérieur de la colonne chromatographique est rempli d'un matériau gélifié spécifique, généralement des particules de polymère hautement réticulées. Ces particules de gel ont des tailles de pores spécifiques qui sont capables d'interagir avec la taille des molécules, conduisant à des degrés différents dans lesquels les molécules entrent dans les particules de gel en fonction de leur taille (poids moléculaire). Les molécules plus petites peuvent entrer dans les pores des particules de gel, tandis que les molécules plus grandes ne peuvent pas, de sorte que les molécules plus grandes circulent plus rapidement le long de la colonne de chromatographie.

Le principe de fonctionnement spécifique du chromatographe par perméation de gel est le suivant:

1, distribution des échantillons

Au début de l'opération, l'échantillon est dissous dans un solvant approprié et injecté dans la colonne chromatographique à l'aide d'une seringue. L'échantillon injecté traverse la colonne chromatographique avec la phase mobile, généralement un solvant organique. Sous l'effet de la phase mobile, l'échantillon est amené à l'intérieur de la colonne.

2, effet de tamis moléculaire

Les pores de la garniture de gel ont une certaine distribution de taille. Les molécules plus grosses, incapables d'entrer dans les petits pores ou seulement dans un petit nombre de pores, s'écoulent donc plus rapidement et sortent plus tôt de la colonne chromatographique; Alors que les molécules plus petites sont capables de pénétrer dans plus de pores, ce qui entraîne leur écoulement plus lent et prend plus de temps à traverser la colonne de chromatographie.

3, processus de séparation

A l'intérieur de la colonne de chromatographie, les échantillons sont séparés par des composants de poids moléculaire différent. Les molécules plus petites ont un temps de contact plus long avec les particules de gel en raison de leur capacité à pénétrer dans plus de pores, de sorte qu'elles migrent plus lentement. Les molécules plus grosses n'ont pas accès aux pores plus petits, elles s'écoulent donc plus rapidement. Finalement, les molécules sont séparées à l'intérieur de la colonne de chromatographie en fonction de leur poids moléculaire et atteignent le détecteur à des temps différents.

4, détection et analyse des données

Souvent équipé de détecteurs tels que détecteur UV, détecteur de réfraction différentielle (RI), détecteur de diffusion de la lumière (LS), etc., pour surveiller et enregistrer la composition de l'échantillon à travers la colonne chromatographique. La méthode de détection couramment utilisée est un détecteur à réfraction différentielle qui utilise la variation de l'indice de réfraction de la solution d'échantillon pour surveiller les différents composants.

Le chromatographe de perméation de gel est un outil efficace pour l'analyse de la distribution de poids moléculaire basée sur l'effet de tamis moléculaire. En isolant des molécules de poids moléculaire différent, il est possible de caractériser avec précision le poids moléculaire et la distribution des substances macromoléculaires telles que les polymères. Il a un large éventail d'applications dans la chimie des macromolécules, la biochimie, la science des matériaux et d'autres domaines, en particulier dans l'analyse des propriétés des polymères, la conception moléculaire, la recherche et le développement de médicaments, etc.