Les modèles organoïdes gagnent en popularité dans la recherche biologique et le dépistage en raison de leur capacité à reproduire la complexité des tissus réels. Pour modéliser les organes pulmonaires humains in vivo, nous avons cultivé des cellules épithéliales pulmonaires humaines primaires dans des conditions qui contribuent à la formation de structures 3D, recréant les caractéristiques morphologiques et fonctionnelles des voies respiratoires pulmonaires. Dans les cultures d'organoïdes pulmonaires, les cellules souches épithéliales et les cellules progénitrices sont cultivées dans un ECM additionné d'une gamme de facteurs de croissance. Les organoïdes se développent ensuite en structures complexes qui conservent des grappes de cellules épithéliales multilignées. Ces propriétés font de la culture d'organoïdes un moyen prometteur qui peut être largement utilisé dans des approches fondamentales et translationnelles telles que le dépistage de médicaments et la modélisation de maladies. Ici, nous exposons une méthode d'imagerie à haute connotation qui permet de surveiller et de visualiser la croissance et la différenciation des organoïdes pulmonaires, la reconstruction de structures 3D, l'analyse complexe de structures organoïdes, la morphologie et la viabilité cellulaires, ainsi que l'expression de différents marqueurs cellulaires. Des organoïdes pulmonaires 3D sont implantés dans les domaines de matrigel. Les organoïdes en développement comprennent des objets sphériques avec des morphologies complexes, y compris des cavités et des structures de la vessie. Au cours des 8 semaines de croissance, nous avons observé une augmentation de la taille et de la complexité. Les organoïdes sont surveillés avec la lumière transmise, puis les organoïdes colorés sont imagés à travers le gel matriciel avec un balayage de l'axe Z de 20 à 30 couches avec un objectif multiple de 10 à 40x. ® Confocal ht.ai intelligent confocal système d'analyse d'imagerie à haute connotation confocal la nouvelle configuration de la source lumineuse laser améliore considérablement l'intensité de l'éclairage, ce qui entraîne une augmentation significative de la luminosité, de la sensibilité de détection et de la vitesse d'imagerie.