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1670 route de zhangheng, parc de haute technologie de Changjiang, Shanghai
PerkinElmer Enterprise Management (Shanghai) Co., Ltd
li.fu@perkinelmer.com
1670 route de zhangheng, parc de haute technologie de Changjiang, Shanghai
Entrée sur le marché du premier médicament à base de protéines recombinantes depuis 1982 (première insuline humaine)1Commercialisé) depuis, le domaine biopharmaceutique a connu une expansion continue du nombre de médicaments thérapeutiques à base de protéines. Par exemple, les anticorps monoclonaux (MAB), les facteurs de croissance, les hormones sont actuellement utilisés pour traiter le cancer, HIV、 Médicaments biothérapeutiques pour de nombreuses maladies telles que la sclérose en plaques2- Oui.Le processus complexe de production de ces médicaments biothérapeutiques implique une quantification précise des protéines pour assurer l'efficacité et la qualité de la formulation finale.En outre, les protéines sont un ingrédient clé dans la détection de diverses biomolécules qui étudient l'activité enzymatique, la régulation de l'expression des gènes, les voies de signalisation et le mécanisme de la maladie. Tous les laboratoires effectuant ces tests effectuent des analyses quantitatives des protéines pour révéler les mécanismes biomoléculaires complexes.
En fonction de la précision requise, de la plage dynamique de quantification, de la compatibilité avec les contaminants potentiels (détergents, réducteurs et solvants) et des différences entre les protéines, il existe actuellement plusieurs méthodes de quantification des protéines. Ces méthodes comprennentMesure de l'absorption UV directe des protéines (A280), tests à base de cuivre (méthodes BCA et Lowry), absorption de complexes protéine - colorant (Bradford), tests à base de fluorescence et tests plus complexesTel que déterminé par ELISA ou Western Blot.
Dans cette étude, la méthode de fluorescence a été choisie en fonction de son excellente sensibilité, de sa spécificité et de son aptitude particulière à la détection de protéines de faible et moyenne abondance dans des échantillons biologiques complexes.Utilisation du Perkin Elmer fl 6500 ™ Surveillance par spectromètre Fluorescent nanoorange®L'amélioration de la fluorescence observée lorsque le Fluorophore interagit de manière non covalente avec la BSA et une courbe standard a été construite.