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Démystifier la Lod pour les méthodes de caractérisation des particules: Comment choisir une méthode de détection précise?
Date :2024-09-26Lire :0

Limite de détection (Lod, limit of Detection)Désigne la concentration ou la quantité minimale de substance que la méthode d'analyse peut détecter de manière fiable et qui représente la sensibilité de la méthode.Pour la livraison de médicaments etSystème Nano - porteurUn rapport Lod précis aide non seulement à déterminer l'exactitude et la répétabilité des méthodes de détection, mais aussi à détecter les particules à faible concentration, à se conformer à la réglementation (lors de la Déclaration d'un médicament ou du contrôle de la qualité, les organismes de réglementation tels que la FDA, l'EMA, etc. exigent souvent un rapport détaillé sur la Lod des méthodes de caractérisation des particules), à valider les méthodes et à assurer la crédibilité des résultats de la recherche scientifique.Alors, les différentes méthodes ou instruments de caractérisation des particules sur le marché peuvent - ils fournir une Lod précise? Quels sont leurs principes de détection et leurs limites? Ensuite, plongez plus profondément avec le petit éditeur!

Nanoparticle Tracking Analysis (NTA) ne fournit pas de Lod au sens traditionnel du terme


















NTA, Nanoparticle Tracking Analysis (analyse de suivi des nanoparticules) Est un par le suivi et l'analyse des nanoparticules individuellesLe Mouvement BrownTechniques pour mesurer la taille et la concentration des particules. Bien que le NTA puisse fournir des informations sur la distribution granulométrique et la concentration des nanoparticules, il ne peut pas fournir de Lod au sens traditionnel du terme pour les raisons suivantes:

1, le rapport signal / bruit n'est pas constantPour:

NTA dépend de la diffusion de la lumière pour détecter les particules, tandis que l'intensité de diffusion varie considérablement d'une particule à l'autre, en particulier en présence de polydispersité dans l'échantillon, où l'intensité de la lumière diffusée par les grosses particules tend à masquer le signal des petites particules, ce qui entraîne une taille de particule partielle et une faible concentration. Ainsi, des particules de tailles différentes peuvent produire des intensités de signal différentes, ce qui rend difficile la définition d'une Lod uniforme.

2, effet de la concentration de particulesPour:

La portée de détection de NTA est limitée par la concentration de particules. Lorsque la concentration est trop élevée, l'interférence mutuelle entre les particules de grande et de petite taille entraîne une inexactitude de l'analyse; Lorsque la concentration est trop faible, le fait de ne pas détecter un nombre suffisant de particules peut également entraîner des erreurs d'échantillonnage et des erreurs aléatoires (il est donc difficile de déterminer une limite de détection de faible concentration applicable à tous les échantillons (la DL varie d'un échantillon à l'autre). Dans le même temps, même les échantillons purifiés comme les vésicules extracellulaires ont des intervalles de concentration linéaires qui ne se concentrent généralement que sur un ordre de grandeur.[1][2]- Oui.

3, limites du système optiquePour:

La sensibilité de détection du NTA dépend également de la capacité de résolution du système optique, ainsi que du réglage des paramètres, en particulier lors de la détection de nanoparticules de petite taille. Les limites de la résolution optique rendent difficile la définition d'une Lod unifiée pour la technologie NTA.

En raison de ces facteurs, la caractérisation des espèces par NTA dans la taille et la concentration des particules fournit un résultat relativement quantitatif plutôt qu'une faible limite absolue de détection.

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Limites de la diffusion dynamique de la lumière (DLS)

Diffusion dynamique de la lumière (DLS, Dynamic Light Scattering) Essentiellement une méthode utilisée pour mesurer la taille des particules ajustées de nanoparticules ou de macromolécules en suspension. Comme le DLS dépend de l'intensité de la lumière diffusée par les particules, de même, il présente généralement certaines limites dans la détermination de la limite de détection Lod:

1, dépendance de l'intensité de diffusionPour:

Le DLS mesure le mouvement brownien moyen de toutes les particules de l'échantillon, de sorte que les signaux diffusés produits par des particules plus petites ou à faible concentration peuvent être inondés par le bruit de fond et difficiles à détecter avec précision. En général, la Lod du DLS est plus exigeante que ce que l'on comprend généralement pour la concentration et la gamme de tailles de particules.

2,Polydispersité et effets de concentrationPour:

Dans les systèmes polydispersibles ou les échantillons avec des concentrations trop faibles, le DLS a du mal à différencier les différentes tailles de particules et donc à donner une Lod uniforme avec précision. Plus précisément, le principe de DLS suppose que les échantillons sont tous distribués en taille Monodisperse (PDI < 0,1 ou même plus petit) et ne convient pas aux échantillons polydisperses (par exemple, la plupart des échantillons biologiques); En outre, bien que le principe DLS ne calcule pas les données de concentration, mais l'échantillon DLS est nécessaire pour la concentration, la concentration de l'échantillon supérieur inapproprié peut entraîner une grande déviation de la taille des particules et est également facile à ignorer.

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En général, nous pouvons constater que ni nta ni DLS ne donnent de Lod de signification pratique. C’est à l’internationalSociété des vésicules extracellulaires(ISEV, Société internationale pour les vésicules extracellulaires)Les dernières directives publiées sont également claires: la nécessité de publier la Lod de la méthode de détection, permettant ainsi aux autres de valider les résultats indépendamment des limites de sensibilité. Mais il n'y a actuellement aucun moyen de produire une Lod traçable pour l'analyse de suivi de nanoparticules (NTA), la diffusion dynamique de la lumière (DLS) ou la cytométrie de flux d'imagerie.[3]- Oui.


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Traduction de l'original:
« la Lod de la méthode de détection doit être publiée, permettant ainsi à d’autres de valider les résultats, quelles que soient les limites de sensibilité. « et
« la crédibilité des mesures de concentration EV peut être améliorée par des méthodes orthogonales, chacune avec une Lod déterminée. « et
« il n'y a actuellement aucun moyen de produire une Lod traçable pour l'analyse de suivi de nanoparticules (NTA), la diffusion dynamique de la lumière (DLS) ou la cytométrie de flux d'imagerie. « et


La méthode d'induction par impulsions résistives (RPS) peut représenter une Lod déterminée

La méthode d'induction pulsée résistive (RPS, Resistive Pulse Sensing) peut donner une Lod déterminée dans la caractérisation de la taille des particules et de la concentration des nanoparticules.Le RPS mesure la taille et le nombre de particules en détectant les variations de résistance induites par les particules individuelles lorsqu'elles traversent les micropores.Parce que c'est une particule uniqueMéthode de détection, le RPS peut fournir une limite de détection très faible dans certaines conditions et est particulièrement adapté à la détection de particules à faible concentration dans des échantillons dilués.La Lod est généralement associée à la taille des micropores ou des nanopores et au niveau de bruit dans l'échantillon.


Taille d'ouverture dépendantePour:

La Lod est généralement associée à la taille des micropores et au niveau de bruit dans l'échantillon. Des tailles de pores plus petites peuvent détecter des particules plus petites, mais elles peuvent également augmenter le bruit de fond, ce qui affecte la précision de la Lod.

Niveau de bruit dépendantPour:

La conductivité électrique de l'échantillon, les caractéristiques de surface du canal d'orifice et la stabilité du courant de fond influent tous sur la limite de détection. Si le bruit de fond est faible, le RPS peut détecter des particules très petites et à faible concentration, ce qui permet une Lod inférieure.


En général, une Lod plus faible peut être atteinte si un bon contrôle du bruit de fond est possible dans les expériences de test RPS et si les ouvertures et les conditions de mesure appropriées sont sélectionnées.Cela donne à la technologie RPS un avantage significatif dans certains domaines tels que la détection de particules biologiques diluées ou de nanoparticules.


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Nanocoulter nanocoulter granulomètreApplicationTechnologie RPS, briser les limites du principe optique, après plus de dix ans de précipitation de la technologie de micro - nanotraitement,InnovationPuce nanoporeuse solide à base de silicium lithographique qui sonde la gamme de détection de la taille des particules de la technologie Kurt classique de l'échelle micrométrique à l'échelle nanométrique. Tout en s'appuyant sur la détection de courant de niveau Pian hautement sensible et le traitement analytique du bruit du signal pour une analyse précise de réduction du bruit de chaque particule poreuse, véritable détection de particule unique, peut analyser avec précision un échantillon polydispersé avec une large distribution de taille de particule, avec une plus grande largeurLod granulométrique (15 - 2000 nm) et très large concentration Lod (10)6-1012 particulespar ml).



Références

[1] Welsh JA, Goberdhan DCI, O'Driscoll L, et al. Informations minimales pour les études des vésicules extracellulaires (MISEV2023): Des approches de base aux approches avancées [correction publiée apparaît dans J Extracell Vesicles. 2024 mai;13(5):e12451. doi: 10.1002/jev2.12451].J Vésicules extracellulaires. 2024; 13(2):e12404.

[2] Li Y, Zhang S, Liu C, et al. Profilage thermophorétique du glycan des vésicules extracellulaires pour la gestion du cancer du sein triple négatif.Nat Commun.2024; 15 (1): 2292.

Tian Y, Tian D, Peng X, Qiu H. Paramètres critiques pour normaliser la détermination de la taille et de la concentration des nanomatériaux par analyse de suivi des nanoparticules.Int J Pharm. 2024; 656: 124 097.