Colonne de chromatographie capillairePlusieurs problèmes peuvent être rencontrés lors de l'utilisation qui peuvent affecter l'efficacité de la séparation, la précision de l'analyse et même la durée de vie de la colonne chromatographique. Ce qui suit estColonne de chromatographie capillaireRésumé détaillé des problèmes courants et de leurs solutions:
I. diminution de l'effet de colonne
Description du problème: la capacité de séparation des colonnes de chromatographie est réduite, sous la forme d'un élargissement des pics, d'une diminution de la résolution ou d'une diminution du nombre de plateaux théoriques.
Causes possibles:
Perte de phase stationnaire: des températures élevées ou une forte action du solvant entraînent la chute du revêtement de phase stationnaire.
Contamination de la colonne: les impuretés de l'échantillon ou les résidus de prétraitement s'accumulent à l'intérieur de la colonne.
Vieillissement insuffisant de la colonne: la nouvelle colonne n'est pas suffisamment vieillie et les solvants ou oligomères résiduels affectent la séparation.
Dommages mécaniques: pliage du corps de la colonne, relâchement du capuchon presseur ou blocage de la plaque de tamis.
La solution:
Vieillissement régulier: les colonnes neuves ou inutilisées depuis longtemps doivent être vieillies pendant plusieurs heures à une température inférieure de 20 à 30 ° C à la température maximale d'utilisation.
Évitez les températures élevées: contrôlez strictement la température de la colonne et évitez de dépasser la température maximale tolérée par la phase stationnaire.
Purification de l'échantillon: utilisez des méthodes telles que l'extraction en phase solide, la filtration ou la centrifugation pour éliminer les particules et les impuretés de l'échantillon.
Remplacement de la plaque de tamis: si la plaque de tamis est bloquée, Remplacez une nouvelle plaque de tamis et réinstallez le corps de la colonne.
II. Anomalie de crête
Description du problème: des pics asymétriques (traînés ou tendus vers l'avant), des pics de division ou des pics fantômes apparaissent.
Causes possibles:
Quantité excessive d'échantillon: Le dépassement de la capacité de la colonne entraîne un élargissement de la crête.
Techniques d'échantillonnage inappropriées: par exemple, le taux de shunt n'est pas approprié lors du shunt de l'échantillon.
Contamination de la colonne: les impuretés adsorbées à la surface de la phase stationnaire affectent le transfert de masse.
Volume mort excessif: présence d'un volume mort dans l'échantillonneur, le détecteur ou la ligne de raccordement.
La solution:
Optimisation de l'apport: Ajustez l'apport en fonction de la capacité de la colonne, généralement Nano - mise à niveau vers micro - mise à niveau.
Amélioration de la technique d'échantillonnage: Ajustez le taux de shunt ou utilisez le mode d'échantillonnage sans shunt.
Nettoyage de la colonne de chromatographie: rincer la colonne de chromatographie à l'envers avec un solvant (par exemple, méthanol, N - hexane) pour éliminer la contamination.
Vérifiez le volume mort: Assurez - vous qu'il n'y a pas de fuites ou d'angles morts dans l'échantillonneur, le détecteur et la ligne de raccordement.
Iii. Changement de temps de rétention
Description du problème: le temps de rétention d'un même composé n'est pas stable dans des lots différents ou au sein d'un même lot.
Causes possibles:
Fluctuations de la température de la colonne: l'instabilité du système de contrôle de la température entraîne des variations du temps de rétention.
Le débit de gaz porteur est instable: fuite du circuit de gaz ou erreur du débitmètre.
Changements dans les propriétés de la phase stationnaire: tels que le vieillissement ou la contamination de la phase stationnaire.
Différence de traitement de l'échantillon: l'incohérence des étapes de traitement préalables entraîne des changements dans la matrice de l'échantillon.
La solution:
Stabilisation de la température de la colonne: utilisez un système de contrôle de la température de haute précision pour assurer une température constante de la colonne.
Inspection des voies d'air: Vérifiez régulièrement les connexions des voies d'air et Remplacez les composants vieillissants ou endommagés.
Vieillissement régulier: éviter le vieillissement excessif de la phase stationnaire, utiliser dans les conditions recommandées par les instructions.
Traitement normalisé des échantillons: Assurez - vous que les étapes de traitement préalables sont cohérentes et réduisez les effets de la matrice.
Iv. Rupture ou fuite de la colonne chromatographique
Description du problème: rupture du corps de colonne de chromatographie, relâchement du capuchon presseur ou fuite au niveau du joint.
Causes possibles:
Mauvaise installation: le corps de colonne est plié ou le capuchon presseur n'est pas serré.
Contrainte mécanique: le corps de la colonne est soumis à un impact de force externe pendant le transport ou le fonctionnement.
Fatigue du matériau: vieillissement du matériau de la colonne après une utilisation prolongée.
La solution:
Installation correcte: Assurez - vous que le corps de colonne est monté droit et que le capuchon presseur est serré mais pas trop forcé.
Évitez les forces extérieures: Tenez - les doucement pendant le transport et l'opération, évitez la flexion ou l'impact de la colonne.
Inspection périodique: Vérifiez régulièrement le corps de colonne, le capuchon presseur et les joints, Remplacez les composants vieillissants à temps.
V. pic fantôme et interférence de fond
Description du problème: Pic inconnu ou augmentation du bruit de base dans le chromatogramme.
Causes possibles:
Contamination de l'échantillon: l'échantillon contient des impuretés ou des résidus de prétraitement.
Contamination de l'échantillonneur: vieillissement de l'aiguille d'admission, du tube de revêtement ou du coussin.
Pollution par le gaz porteur: le gaz porteur contient de l'oxygène, de l'humidité ou des impuretés hydrocarbonées.
Contamination du détecteur: vieillissement du filament du détecteur ou contamination par une source ionique.
La solution:
Purification des échantillons: les impuretés sont éliminées par des méthodes telles que l'extraction en phase solide, la filtration ou la centrifugation.
Lavez l'échantillonneur: changez régulièrement l'aiguille d'admission, le tube de revêtement et le coussin d'espacement et Nettoyez l'entrée de l'échantillon.
Purification du gaz porteur: utilisez un gaz porteur de haute pureté et installez un dispositif de purification du gaz porteur.
Entretien du détecteur: lavez régulièrement le détecteur et Remplacez les composants vieillissants.
Vi. Mauvais choix de phase fixe
Description du problème: la séparation n'est pas efficace, le temps de rétention du composé cible n'est pas raisonnable ou le co - Efflux.
Causes possibles:
Polarité de la phase stationnaire non conforme: ne correspond pas à la nature de l'échantillon (p. ex. analyse de composés polaires sur des colonnes non polaires).
Longueur ou diamètre intérieur inapproprié de la colonne: une longueur trop courte de la colonne ou un diamètre intérieur trop important entraîne un degré de séparation insuffisant.
Mauvaise sélection de l'épaisseur de la membrane: une membrane trop mince entraîne une faible capacité de la colonne et une membrane trop épaisse entraîne un élargissement de la crête.
La solution:
La phase stationnaire est choisie en fonction de la nature de l'échantillon: l'échantillon non polaire est sélectionné dans une colonne non polaire (par exemple DB - 5) et l'échantillon polaire est sélectionné dans une colonne polaire (par exemple DB - Wax).
Optimisation des paramètres de la colonne: Sélectionnez la longueur de colonne appropriée (par exemple 15 - 60m) et le diamètre intérieur (par exemple 0,18 - 0,53 mm) en fonction des besoins de séparation.
Ajuster l'épaisseur du film: choisissez l'épaisseur de film appropriée (par exemple 0,1 - 5 μm) en fonction de la concentration de l'échantillon et de la quantité d'échantillon entrant.
Vii. Réduction de la durée de vie de la colonne
Description du problème: la colonne de chromatographie échoue prématurément et doit être remplacée fréquemment.
Causes possibles:
Mauvaises conditions de fonctionnement: telles que des températures élevées, des débits élevés ou des solvants puissants.
L'échantillon est fortement contaminé: il n'a pas été suffisamment décontaminé.
Entretien insuffisant: les colonnes de chromatographie ne sont pas vieillies ou lavées régulièrement.
La solution:
Conditions de fonctionnement optimisées: contrôle strict de la température de la colonne, du débit et du type de solvant.
Amélioration de la purification des échantillons: élimination des impuretés par des méthodes telles que l'extraction en phase solide, la filtration ou la centrifugation.
Entretien régulier: vieillissement, lavage et stockage dans les conditions recommandées par les instructions.