Le noyau de maintenance des fermenteurs de cellules animales et végétales estNettoyage - stérilisation, entretien des composants, étalonnage des paramètresIl doit être effectué en combinaison avec les spécificités de la culture cellulaire (absence de paroi cellulaire, sensibilité aux forces de cisaillement, contamination facile), le processus de maintenance spécifique et les points clés sont les suivants:
Vidange des résidus et rinçage préliminaire
Après la fin de la fermentation, vider d'abord le résidu, le milieu de culture et les débris cellulaires à l'intérieur du réservoir, en utilisantEau désionisée ou purifiéeRincer à plusieurs reprises la paroi interne du réservoir, la palette d'agitation, le volet, l'orifice d'échantillonnage et d'autres parties pour éliminer les résidus visibles à l'œil nu.
Pour les fermenteurs élévateurs d'air spécifiques aux cellules animales (pas de pales d'agitation, faible force de cisaillement), les micropores du distributeur de liquide gazeux doivent être rincés avec attention pour éviter le colmatage.
Nettoyage chimique pour enlever les taches tenaces
Pour protéines, polysaccharides et autres résidus insolubles, formuléNettoyant alcalin(par exemple, une solution de NaOH à 0,5% - 1%), injectée à l’intérieur du réservoir jusqu’à ce que tous les sites de contact soient immergés,Lavage cyclique 30 - 60minS'il reste plus de résidus, il peut être correctement chauffé à 40 - 50 ° C (pour éviter les dommages aux joints à haute température).
En cas de précipité de calcium et de magnésium ou de résidus inorganiques, utiliser d'abordNettoyant acide(par exemple, acide nitrique dilué 0,1% - 0,5%) Lavage cyclique pendant 20 - 30 min, après quoi rincer abondamment à l'eau purifiée jusqu'à neutralité (pH 6,5 - 7,5) pour empêcher les résidus d'acide et de base d'endommager les cellules.
Remarque: fermenteur de cellules animales et végétalesTubes en silicone, joints en caoutchoucD'autres composants, ne peuvent pas être en contact avec des acides forts et des alcalis forts pendant une longue période, après le nettoyage doit être retiré à temps pour le traitement individuel.
Stérilisation, mettre fin à la prolifération des bactéries
Stérilisation en place (SIP): préférentiellement avec la stérilisation à la vapeur à haute température, le paramètre est121 ° C, 0,1 MPa, 20-30 min, couvrant tous les composants du corps de réservoir, des lignes, des vannes, des sondes de capteur, etc., en contact avec le milieu de culture; Pour les composants qui ne résistent pas à des températures élevées (par exemple, électrodes de pH, électrodes à oxygène dissous), il est nécessaire de les retirer et de les utiliser aprèsImmersion dans l'éthanol à 75% ou irradiation UVStérilisation.
Traitement post - stérilisation: une fois la stérilisation terminée, laissez sécher à l'intérieur du réservoir pour éviter que l'eau de condensation ne crée d'impuretés; S'il n'est pas utilisé pendant une longue période, il peut passer à l'intérieur du réservoir de séchage par soufflage d'air stérile.
Entretien des joints et des connexions
Du fermenteurJoint d'étanchéité de couvercle de réservoir, joint de silicone de ligne, joint d'étanchéité de valveIl s'agit de pièces d'usure, à vérifier une fois par mois, si le vieillissement, la déformation, la fissuration, le remplacement immédiat, la prévention des fuites d'air et de la pollution.
Joints pour fermenteurs de cellules animales sélection suggéréeSilicone ou caoutchouc fluoré de qualité médicaleDésinfection régulière avec de l'alcool médical pour éviter que les matières dissoutes affectent la croissance cellulaire.
Maintenance du système d'agitation et de ventilation
Fermenteurs à agitation mécanique: Inspection trimestrielle des roulements et des moteurs de réduction de la palette de brassage, ajout d'un lubrifiant spécial; Vérifiez que la connexion de la palette d'agitation à l'arbre est desserrée, ce qui empêche la production de forces de cisaillement pendant le fonctionnement pour endommager les cellules.
Système de ventilation: démonter régulièrement le filtre à air (le matériau de la cartouche est en polytétrafluoroéthylène ou en cellulose), si la cartouche est bloquée ou stérilisée trop souvent, Remplacez - la rapidement; Les micropores de la tête d'aération du fermenteur élévateur à air doivent être nettoyés par ultrasons, garantissant une ventilation uniforme.
Calibration des capteurs et des instruments
Électrodes de pH, électrodes à oxygène dissous: calibré une fois par mois, l'électrode de pH est calibrée avec un tampon standard (pH 4,0, 7,0, 10,0) et l'électrode oxygénée est calibrée avec une solution saturée de sulfite de sodium (point d'oxygène zéro) et de l'air (point d'oxygène 100%); Avant et après l'utilisation doit être trempé avec un liquide de protection pour empêcher l'électrode de sécher et échouer.
Capteur de température, capteur de pression: Calibration trimestrielle pour assurer la précision du contrôle de la température à ± 0,5 ℃, l'affichage de la pression est précis.
En cas d'arrêt prolongé du fermenteur (plus d'un mois), à compléterNettoyage - stérilisation - séchageProcessus:
Paroi intérieure du corps de réservoir, palette d'agitation et autres pièces métalliques, appliquer une coucheHuile antirouille de qualité alimentaire, empêche la rouille;
Après le lavage et la stérilisation des composants amovibles (électrodes, bagues d'étanchéité, filtres, etc.), les scellés sont stockés dans un environnement sec et exempt de poussière.
Débranchez la source d'énergie et de gaz du fermenteur de développement, fermez toutes les vannes et protégez bien le pare - poussière; Mise sous tension régulière (mensuelle) pendant 10 à 15 minutes, vérifiez que le moteur et le système de commande fonctionnent correctement.
Besoins d'entretien des fermenteurs de cellules animales et végétalesDifférencier les matériaux: le réservoir en verre évite les collisions et les variations de température différentielle; Le corps de réservoir en acier inoxydable n'est pas disponible brossage de boule de fil pour empêcher les rayures de la paroi interne pour la reproduction de bactéries parasites.
Lors du lavage et de la stérilisation, éviterRéactifs corrosifsCapteurs de contact et composants électriques; L'utilisation de désinfectants contenant du chlore est strictement interdite dans les fermenteurs de cellules animales, empêchant le chlore résiduel d'empoisonner les cellules.
Établissez un comptoir d'entretien qui enregistre le temps de chaque nettoyage, stérilisation, remplacement des composants et étalonnage pour une traçabilité facile.