En tant qu'outil d'analyse de base pour les laboratoires modernes, l'étalon enzymatique multifonctionnel permet une analyse quantitative et qualitative précise des biomolécules, de l'activité cellulaire et des produits chimiques grâce à l'intégration de plusieurs techniques de détection optique. Ses principes techniques de base sont basés sur la loi de Lambert - beer et le mécanisme de transfert d'énergie par résonance fluorescente, combinés à une conception de chemin optique de haute précision et à un module de détection multimodal, pour construire un système de détection de scène complet couvrant l'absorption UV - visible, la fluorescence, la chimiluminescence et la fluorescence résolue dans le temps.
Principes techniques fondamentaux
Détection de l'absorption de la lumière: en utilisant une lampe au xénon ou une source lumineuse LED, la lumière monochromatique de longueur d'onde spécifique est formée après la séparation de la lumière par un monochromateur, pénétrant dans l'échantillon dans la microplaque. Détection de l'intensité lumineuse transmise par photodiode, calcul de la concentration de l'échantillon en combinaison avec la loi de Lambert - Beer (A = εcl), applicable à l'analyse quantitative des acides nucléiques, des protéines.
Détection de fluorescence: en utilisant la technologie de spectroscopie à réseau d'excitation, les marqueurs fluorescents (tels que FITC, GFP) sont excités par la lumière à une longueur d'onde spécifique pour détecter leur intensité de fluorescence émise. Le point d'innovation principal réside dans la conception de chemin optique à quatre réseaux, qui prend en charge le réglage indépendant de la longueur d'onde d'excitation / émission, avec un déplacement minimum de Stoke jusqu'à 18 nm, ce qui peut séparer efficacement le bruit de fond.
Détection de chimiluminescence: basée sur des réactions enzymatiques ou des signaux lumineux produits par des réactions chimiques, aucune source lumineuse externe d'excitation n'est nécessaire. Détection de réactions de Luminescence de type lueur / flash par photomultiplicateur (PMT) à comptage de photons à courant d'obscurité, plage dynamique ≥ 7 ordres de grandeur, pour des scénarios d'ultramicroanalyse tels que la détection d'ATP, l'analyse génétique à double rapport, etc.
Mode de détection Innovation
Fluorescence résolue dans le temps (TRF): en utilisant des lanthanides (tels que l'europium, le Terbium) comme marqueurs, en utilisant leurs propriétés de durée de vie de fluorescence de l'ordre de la milliseconde, en éliminant les interférences de fond par détection retardée dans le temps, le rapport signal sur bruit est amélioré de plus de 10 fois, largement utilisé dans la détection hormonale et l'analyse des marqueurs de l'hépatite virale.
Transfert d'énergie par résonance fluorescente (fret): la détection du transfert d'énergie est réalisée par le changement d'espacement moléculaire Fluorescent donneur - accepteur, combiné à la technologie TRF pour former le mode tr - fret, l'accepteur émet une Fluorescence à longue longueur d'onde après excitation du donneur, applicable aux interactions protéiques, aux études de liaison du Ligand accepteur.
Intégration de l'imagerie cellulaire: Fusion innovante des voies optiques à éclairage oblique et de la technologie d'imagerie CCD pour un comptage cellulaire sans marqueur et une analyse morphologique des cellules marquées par fluorescence grâce à une source de lumière LED et à une mise au point automatique au laser. Par rapport à l'étalon enzymatique traditionnel, la dimension des données s'étend à la zone de l'échantillon, à la couverture des puits et à d'autres paramètres, soutenant les besoins de criblage à connotation élevée.
Direction de la percée technologique
La recherche et le développement actuels se concentrent sur la sélection automatique à plage dynamique, les modules de détection de cellules vivantes à contrôle multigaz et les algorithmes d'analyse de données pilotés par l'IA. Par exemple, l'optimisation intelligente des paramètres de détection via le logiciel skanit permet de Commuter automatiquement le gain PMT en fonction de la force du signal dans le trou, assurant une valeur CV de détection inter - Lot < 1%. À l'avenir, avec la fusion des marqueurs de points quantiques et de la technologie de résonance plasma de surface, l'étalonnage enzymatique multifonctionnel promet de permettre une détection au niveau d'une molécule unique, offrant un support technique plus puissant pour la médecine de précision et la biologie synthétique.