L'étalon enzymatique 96 puits est un appareil utilisé pour lire simultanément les signaux de chaque puits dans une microplaque 96 puits. Il est largement utilisé dans la recherche biomédicale, les expériences cliniques, le dépistage de médicaments, la surveillance de l'environnement et joue un rôle essentiel dans des expériences telles que les tests immuno - enzymatiques (ELISA), l'analyse des protéines, la recherche cytologique, etc.
L'étalon enzymatique 96 puits offre de nombreuses méthodes de détection via différents modes de mesure (Absorbance, fluorescence, Luminescence, etc.), chacun avec son propre scénario d'application, ses avantages et son domaine d'application.
I. mode de chimiluminescence (CL)
Le mode de chimiluminescence libère des signaux lumineux par réaction chimique et est largement utilisé dans l'immunoanalyse, la recherche en biologie moléculaire et d'autres domaines. Contrairement aux modes traditionnels de fluorescence et d'Absorbance, la chimiluminescence ne nécessite pas de source lumineuse externe d'excitation.
Principe et application:
Le mode de chimiluminescence produit un signal lumineux par des réactions catalytiques ou biochimiques dont l'intensité est directement proportionnelle à la concentration de la substance cible.
Il est largement utilisé, en particulier dans les domaines de l'immunologie et du diagnostic moléculaire.
Avantages:
Avec une sensibilité élevée, il est particulièrement adapté aux analyses à faible concentration.
Non perturbé par la source lumineuse, capable de fournir une détection plus précise.
II. Mode d'Absorbance (mode OD)
Le mode d'Absorbance détermine la concentration d'un échantillon ou le degré de réaction en mesurant son absorption de lumière à une longueur d'onde spécifique.
Principe et application:
Dans la mesure de l'Absorbance, un étalon enzymatique émet de la lumière à une longueur d'onde spécifique par l'intermédiaire d'une source lumineuse, la lumière étant reçue par un détecteur après avoir traversé un échantillon et les valeurs d'Absorbance calculées.
Ce modèle convient aux expériences qui nécessitent la quantification de la concentration d'une substance et est couramment utilisé dans les tests d'immunosorption enzymatique (ELISA), la quantification des protéines, l'analyse de la prolifération cellulaire, etc.
Avantages:
Ce mode a une sensibilité élevée et convient à la détection de substances à faible concentration.
Pour les expériences immunologiques classiques comme ELISA, le mode Absorbance est capable de fournir des résultats quantitatifs précis.
Facile à utiliser, largement utilisé dans la recherche scientifique et clinique.
Iii. Mode fluorescent
Les modes de fluorescence sont mesurés sur la base du principe d'émission de fluorescence. Dans ce mode, la source de lumière d'excitation excite les molécules fluorescentes dans l'échantillon, qui émettent alors des signaux de fluorescence à des longueurs d'onde spécifiques, et l'enzyme Scaler quantifie la concentration de la substance cible en détectant l'intensité de ces signaux.
Principe et application:
Le mode Fluorescent convient pour l'analyse de sondes fluorescentes marquées ou de colorants fluorescents. Les molécules marquées, lorsqu'elles sont éclairées par une lumière d'excitation spécifique, sont capables d'émettre de la lumière à une longueur d'onde spécifique.
Il est largement utilisé dans la détection de l'activité cellulaire, l'analyse de l'expression génique, l'étude des interactions protéiques, etc.
Avantages:
Comparé au mode d'Absorbance, le mode de fluorescence a une sensibilité plus élevée et peut détecter de faibles concentrations de la substance cible.
Convient à la technologie de marquage de sonde moléculaire, capable de fournir des informations expérimentales plus riches telles que le niveau d'expression des protéines, la concentration d'ions intracellulaires, etc.
Iv. Mode lumineux
Le mode Luminescent est analysé quantitativement en mesurant l'émission de lumière déclenchée par une réaction chimique dans l'échantillon. Ce mode est généralement utilisé dans les réactions de chimiluminescence ou les réactions de bioluminescence, telles que les réactions courantes de marquage enzymatique.
Principe et application:
Le mode de Luminescence ne nécessite pas de source de lumière extérieure, mais repose sur la réaction de Luminescence de l'échantillon lui - même. Les applications typiques sont l'utilisation d'enzymes réagissant avec un substrat pour libérer des photons, et dans certaines réactions de biomarquage, la présence de molécules cibles provoque des réactions de Luminescence.
Application au dépistage de médicaments, à la détection de l'activité cellulaire, à l'immunoanalyse, etc.
Avantages:
Haute sensibilité, peut détecter de faibles concentrations d'échantillons.
Non affecté par des facteurs tels que la couleur de l'échantillon, la turbidité, etc., le fond est moins perturbé.
V. mode de fluorescence résolue dans le temps (TRF)
Le mode de fluorescence résolu dans le temps a été développé sur la base de la détection de fluorescence traditionnelle, qui améliore la sensibilité et la précision en retardant le temps de détection du signal. Le mode TRF peut réduire les interférences de la fluorescence de fond, fournissant un signal plus clair.
Principe et application:
En mode TRF, après excitation de la substance fluorescente, l'instrument attend un certain temps pendant lequel une grande partie du signal de fond s'atténue, améliorant ainsi le rapport signal / bruit.
Convient pour des détections de sensibilité plus élevée, telles que les marqueurs de protéines, les marqueurs de sondes ADN / ARN, etc.
Avantages:
Haute sensibilité, particulièrement adaptée à la détection d'échantillons de faible fond.
Moins d'interférences de fond et un signal clair.
Les multiples modes de mesure de l'étalon enzymatique 96 puits en font un outil d'analyse polyvalent largement utilisé dans les domaines de la biologie, de la chimie, de la médecine, etc.