I. techniques opérationnelles
Démarrage et initialisation
Alimentation et auto - test: allumez l'ordinateur, les modules du chromatographe et attendez que l'auto - test du système soit terminé. Si vous utilisez un logiciel tel que labsolutions, double - cliquez sur l'icône pour accéder au système et connecter l'appareil.
Traitement des bulles d'échappement: l'opération d'échappement est effectuée dans le module de pompe quaternaire, assurant l'absence de bulles dans la phase mobile. Si l'instrument a la fonction de remplissage de bouteille, le volume de la phase mobile doit être réglé à l'avance pour éviter l'épuisement du solvant entraînant un arrêt automatique.
Remplacement de la phase mobile: remplacez la phase mobile en fonction des besoins expérimentaux et rincez bien le système.
Modification des méthodes et paramétrage
Paramètres de la pompe: réglez le débit dans "Flow", le temps de fonctionnement dans "Stop time" et modifiez le Programme d'élution de gradient via "timetable".
Paramètres de l'échantillonneur: Définissez le volume de l'échantillon dans "Injection" et sélectionnez la méthode de lavage de l'aiguille.
Paramètres du thermostat de la colonne: réglez le mode de contrôle de la température, entrez la température cible et assurez la stabilité de la colonne de chromatographie.
Paramètres du détecteur: Sélectionnez la longueur d'onde de détection en fonction des caractéristiques de l'échantillon et réglez le temps de réponse.
Édition et exécution de séquences
Création de séquence: modifiez la séquence dans le logiciel avec le nom de l'échantillon, son emplacement, le nombre d'entrées et la méthode d'appel.
Réglage de l'arrêt automatique: Configurez le mode d'arrêt dans les paramètres de séquence, assurez - vous que l'instrument s'éteint automatiquement une fois la séquence terminée et évitez les longues périodes d'attente.
Traitement des données et génération de rapports
Établissement de la courbe Standard: Si vous avez déjà une courbe, enregistrez la méthode et sélectionnez le module méthode principale; Pour créer une nouvelle courbe, cliquez sur correction - nouveau tableau de correction, entrez le temps de rétention et la concentration correspondante.
Sortie du rapport: Sélectionnez les données que vous souhaitez imprimer, envoyez - les avec le bouton droit de la souris à la mise en page du rapport, sélectionnez le modèle pour afficher les résultats.
II. Dépannage
Anomalie de pression de colonne
Haute pression de colonne:
Causes: dépôt de sels de tampon ou contamination des échantillons.
Solution: rincer la colonne avec de l'eau pure à basse vitesse à 40 - 50 ℃, augmenter le débit après la chute de pression de la colonne, puis rincer avec de l'eau pure à température normale et du méthanol. En cas de contamination de l'échantillon, la colonne est rincée à l'envers avec du méthanol, du méthanol + Isopropanol, du méthanol et de l'eau pure.
Pression de colonne basse ou nulle:
Cause: mauvais fonctionnement, fuite de liquide ou pompe non perfusée.
Solution: vérifier l'état de la pompe et la vanne de vidange; Déterminer l'emplacement du liquide de fuite avec le papier filtre, serrer l'interface ou remplacer la bague d'étanchéité; Si la tête de filtre d'entrée de solvant est bloquée, nettoyez par ultrasons ou remplacez - la.
Changement de temps de rétention
Causes: modification de la composition de la phase mobile, vieillissement de la colonne chromatographique, fluctuations de la température de la colonne ou anomalies du débit.
Solution: révision des paramètres du système, reformulation de la phase mobile; Remplacement de la colonne de chromatographie de vieillissement; Stabilisation de la température à l'aide d'un incubateur à colonne; Vérifiez la bague d'étanchéité de la pompe et la vanne unidirectionnelle et remplacez - la si nécessaire.
Anomalie de forme de crête
Bifurcation du pic:
Causes: contamination de la colonne de chromatographie ou effondrement du remplissage de la tête de colonne.
Solution: après rinçage inverse de la colonne, rincer successivement avec du méthanol, du méthanol + Isopropanol, du méthanol et de l'eau pure; Si le remplissage s'effondre, Dévissez la tête de colonne pour nettoyer la partie dure, remplissez - la à nouveau et pressez - la.
Pic frontal ou pic inversé:
Cause du pic frontal: surcharge de l'échantillon ou mauvais choix du solvant.
Solution: diluer l'échantillon ou remplacer le solvant; Si la colonne de chromatographie est endommagée, Remplacez - la par une nouvelle.
Cause du pic inversé: l'indice de réfraction de l'échantillon est inférieur à celui de la phase mobile.
Solution: dissoudre l'échantillon en utilisant le même solvant que la phase mobile et équilibrer la cellule de référence avant d'introduire l'échantillon.
Dérive ou bruit de base
Causes: fluctuations de la température de la colonne, hétérogénéité de la phase mobile ou contamination du bassin de circulation.
Solution: contrôler la température à l'aide d'un incubateur à colonne; Vérifier le rapport d'écoulement et le dégazage; Le bassin de circulation est rincé au méthanol ou à l'acide nitrique 1n.
Pas de trafic ou d'anomalies de débit
Causes: blocage du système, entrée d'air ou usure des joints de pompe.
Solution: déblayer les zones obstruées par sections, laver ou remplacer par ultrasons; Extraction d'air à la sortie de la pompe avec une cartouche à aiguille en verre; Remplacez les joints usés.