Le système expérimental animal hypoxique est un outil important pour l'étude des mécanismes physiopathologiques dans les environnements anoxiques, dont l'utilisation normative affecte directement la fiabilité des données expérimentales et le bien - être des animaux. Ce qui suit passe en revue les principaux points d'utilisation de la préparation de l'équipement, du contrôle des paramètres, de la gestion des processus et de la sécurité.

Préparation et adaptation avant l'expérimentation

1. Vérification de l’étanchéité du compartiment

- test de pression négative requis avant utilisation: la pompe à vide est activée après avoir fermé tous les canaux, la pression dans la citerne doit descendre en dessous de - 50 kPa et rester stable en 3 minutes, indiquant qu'il n'y a pas de point de fuite.

- vérifiez le vieillissement des joints d'étanchéité des fenêtres d'observation, des vannes d'entrée et de sortie de gaz et Remplacez les joints en caoutchouc fluoré si nécessaire.

2. Domestication adaptative des animaux

- les animaux nouvellement admis doivent être acclimatés dans un environnement atmosphérique normal pendant au moins 48 heures, librement nourris et abreuvés;

- ajuster la taille de la table de chargement en fonction des caractéristiques de l'espèce (par exemple, pas plus de 5 cages / cage pour les souris, cage ventilée indépendante pour les rats);

- les lignées spéciales nécessitent une confirmation pré - expérimentale du taux métabolique basal et évitent de masquer les effets hypoxiques réels en raison de la réponse au stress.

3. Préréglage du rapport de gaz

- contrôle précis du rapport de mélange n₂ / o₂ à l'aide d'un débitmètre massique, gradient habituel réglé sur normoxie (21% o₂), hypoxie modérée (10% - 15%), hypoxie sévère (< 6%);

- Equipé d'un absorbeur de co₂ (soda lime) et d'un dispositif d'adsorption d'ammoniac qui maintient la concentration de gaz nocifs dans le compartiment < 0,01%.

II. Gestion des processus et acquisition de données

1. Observation comportementale synchrone

- l'installation de caméras HD en combinaison avec le système d'identification ai pour compter automatiquement le volume d'activité, la fréquence respiratoire et d'autres indicateurs;

- le changement de poids est enregistré lorsque le changement de pad est déballé tous les jours, le temps de fonctionnement est contrôlé dans les 5 minutes.

2. Acquisition de signaux physiologiques

- la puce de télémétrie Implantable peut obtenir des données de fréquence cardiaque, de saturation en oxygène en temps réel;

- le prélèvement sanguin dans la veine caudale est strictement soumis au « principe des trois mêmes »: même moment, même membre latéral, même opérateur.

3. Configuration du plan d'urgence

- réserve de bouteilles d'oxygène portables (débit réglable à 0,5 l / min), les médicaments d'urgence sont à portée de main près de la cabine;

- réglage du seuil de double alarme: ouverture automatique de la porte avec décompression lorsque o₂ < 8% ou une variation de pression dans le compartiment > 5 kPa / min.

Iii. Éthique et contrôle de la qualité

1. Mise en œuvre du principe des 3R

- détermination de la taille minimale effective de l'échantillon par pré - expérimentation, en utilisant une randomisation stratifiée;

- développement d'un programme progressif de réduction de l'oxygène (réduction quotidienne de 2 à 3% d'o₂) pour atténuer les réactions de stress aigu;

- mise en place d'un critère d'issue humanitaire: arrêt immédiat de l'expérience en présence de convulsions persistantes, disparition du réflexe cornéen.

2. Spécifications de réglage de contrôle

- ajout de groupes anoxiques intermittents (p. ex. hypoxie de 4 heures par jour + réoxygénation de 20 heures) en plus du groupe témoin normoxique;

- le groupe témoin était dans le même lot que le Groupe expérimental d'origine animale au cours de la même période, avec un environnement d'élevage cohérent.

3. Cycle de maintenance de l'équipement

- Calibration mensuelle du capteur d'oxygène (étalonnage au gaz standard);

- nettoyage trimestriel de la poussière à l'intérieur de la cabine, remplacement du filtre d'admission;

- la révision annuelle se concentre sur l'inspection du temps de réponse de l'électrovanne et de la structure mécanique de la porte d'étanchéité.