Les détails déterminent le succès ou l'échec, ce qui est également vrai pour les chercheurs de laboratoire. Il y a beaucoup de détails opérationnels dans les expériences de kits ELISA, tels que l'utilisation minimale d'une arme à feu, le changement fréquent de la tête de l'arme, l'augmentation de la concentration faible à la concentration élevée lors de l'échantillonnage, car cela réduit les chances de sauter. Et la clé de toute l'expérience après zui est la méthode de traitement des résultats, alors dans l'article technique d'aujourd'hui, ce que nous vous présentons est la méthode d'analyse des résultats de test ELISA Kit.
①: dans l'expérience ELISA, les échantillons doivent être poreux ou triples, puis calculer la valeur moyenne de do pour chaque norme de concentration, le coefficient de variation des pores doit être inférieur à 20%.
②: valeur od moyenne moins la valeur od du trou vide.
③: faire la courbe standard.
Pour soustraire la valeur od de ce fond à l'axe X et la concentration de l'étalon à l'axe Y, utilisez le logiciel de cartographie pour obtenir une méthode de calcul appropriée. Il est recommandé d'utiliser un logiciel approprié pour la cartographie, comme curveexpert 1.4. Ce logiciel est capable de donner de nombreuses méthodes (telles que des lignes, des demi - logarithmes, des logarithmes, des équations à quatre paramètres, etc.) et de choisir une équation appropriée. Pour vérifier si une courbe correspond aux données du tableau, vous pouvez prendre la concentration de l'étalon comme inconnue, introduire la valeur de do correspondante dans l'équation, calculer la concentration de l'étalon et obtenir un résultat proche de la concentration réelle (+ / - 10%). Choisissez la courbe avec un ajustement zui élevé.
Si la linéarité de la courbe standard n'est pas bonne, ou si le parallélisme n'est pas bon (OD pour les trous de contrôle à deux trous) Les valeurs varient considérablement), ou l'apparition du phénomène de saut de trou, peut causer des raisons telles que la contamination mutuelle entre les puits de la plaque de marquage enzymatique, après le lavage de la plaque ne pas effectuer l'opération suivante dès que possible, la méthode d'opération lors de l'ajout d'échantillons ou d'autres réactifs est incorrecte, la position d'incubation est mauvaise protection contre la lumière ou le film de la plaque de recouvrement n'est pas bien scellé de sorte que l'humidité s'évapore, les puits de la plaque de marquage enzymatique demandent la quantité différente de réactif à ajouter, la solution correspondante est d'ajouter l'échantillon s'il vous plaît ne pas éclabousser le liquide dans un autre trou, laver manuellement la plaque également s'il vous plaît faire attention, ne pas éclabousser le liquide de lavage dans un autre micropuits, touche la tête de pistolet à l'intérieur du trou de la plaque, aspirer le liquide dans différents flacons de réactifs à remplacer la tête de pistolet une fois, confirmer que l'environnement d'incubation est imperméable à la lumière, la membrane de la plaque de couverture scelle bien la plaque de marquage enzymatique, en utilisant un micro - échantillon corrigé, Si vous laissez tomber une goutte de liquide sur la tête du pistolet lorsque vous ajoutez * du liquide, le liquide laissé sur la tête du pistolet plus tard est également versé pour garantir la cohérence du volume de liquide ajouté.