Les charges de purification des protéines sont capables d'identifier et d'adsorber avec précision les protéines d'intérêt tout en ayant une faible affinité pour la plupart des protéines d'impuretés, sur la base des différents mécanismes d'action décrits ci - dessus. Cette sélectivité élevée permet, dans un mélange complexe de protéines, de séparer efficacement la protéine cible, d'améliorer considérablement l'efficacité et la pureté de la purification et de réduire la complexité des étapes de traitement ultérieures.

D'une part, la capacité de traiter un grand nombre d'échantillons en un temps relativement court. Son processus rapide d'adsorption et de déssorption, ainsi que la conception rationnelle de la colonne et le processus d'exploitation, permettent la purification des protéines dans un état plus efficace, répondant aux exigences de temps et de rendement dans la recherche scientifique et la production industrielle. En présence d'une large gamme de pH, de variations de la Force ionique et de solvants organiques, l'intégrité de leur structure et de leur fonction est maintenue sans défaillance due à de légères variations des facteurs environnementaux externes. Ceci permet une utilisation fiable de la charge de purification des protéines dans différentes conditions de purification, garantissant la répétabilité et la cohérence des résultats de purification.

Précautions d'emploi pour les charges de purification des protéines:

1. Sélection et traitement du tampon

- Composition du tampon: Choisissez un système de tampon approprié dont les paramètres tels que le pH, la Force ionique, etc., doivent être adaptés à la stabilisation de la protéine cible et à la liaison avec la charge. Dans le même temps, des quantités appropriées d'additifs tels que des inhibiteurs de protéase, des chélateurs métalliques, des agents réducteurs, etc. peuvent être ajoutées au besoin pour protéger l'activité protéique et prévenir la dégradation des protéines, l'oxydation, etc.

- filtration et dégazage des tampons: tous les tampons utilisés doivent être filtrés avec une membrane filtrante de 0,22 µm pour éliminer les impuretés et les micro - organismes. Et avant utilisation, pour ramener le tampon conservé à basse température à la température ambiante et effectuer un traitement de dégazage, éviter que les gaz dans le tampon affectent l'effet de séparation pendant la chromatographie.

2. Contrôle de processus opérationnel

- contrôle de la température: lors de la purification des protéines, il faut essayer d'opérer à basse température, par exemple sur de la glace ou dans un entrepôt frigorifique, afin d'éviter la dénaturation et la dégradation des protéines. Surtout quand il s'agit de protéines sensibles à la température, il est plus important de contrôler strictement la température.

- contrôle du débit: le débit de la bonne colonne de chromatographie est contrôlé pour éviter qu'un débit trop rapide ne conduise à une liaison inadéquate de la protéine à la charge ou à une élution incomplète, ainsi qu'à un débit trop lent affectant l'efficacité expérimentale. Les différentes étapes de remplissage et de purification peuvent avoir des gammes de débit appropriées qui doivent être ajustées en fonction de la situation réelle.

- Évitez la contamination: l'ensemble du processus de fonctionnement doit rester stérile et propre, utilisez des consommables tels que des têtes d'aspiration jetables, des tubes, des bouteilles, etc., la verrerie réutilisable doit être strictement lavée et désinfectée, empêchant les bactéries, les champignons ou d'autres impuretés de contaminer les échantillons de protéines et les charges, affectant l'effet de purification.

3. Protection et entretien du remplissage

- prévention de la fissuration sèche: pendant le fonctionnement, évitez que l'exposition prolongée du remplissage à l'air ne provoque la fissuration sèche, ce qui affecte les performances et la durée de vie du remplissage. Lorsqu'il n'est pas utilisé temporairement, le remplissage doit être trempé dans un tampon approprié.

- lavage et régénération: une fois l'utilisation terminée, le remplissage doit être nettoyé à temps pour éliminer les protéines résiduelles et autres impuretés. Pour certaines charges qui peuvent être réutilisées, suivez la bonne méthode de traitement de régénération pour restaurer leurs propriétés et faciliter la prochaine utilisation. Mais veillez à éviter des conditions de lavage trop intenses pour ne pas endommager le remplissage.

- conditions de stockage: selon la nature du remplissage, les conditions de stockage appropriées sont choisies. D'une manière générale, le stockage à court terme permet de tremper la charge dans de l'éthanol 20, placé au réfrigérateur à 4°C; Le stockage à long terme nécessite des conditions plus strictes, telles que la Cryoconservation à - 20 ° C ou moins.

4. Précautions de sécurité

- protection individuelle: lors de la manipulation de charges purifiées de protéines, des équipements de protection tels que des vêtements de laboratoire, des gants, des masques et des lunettes conformes aux normes doivent être portés pour empêcher le contact direct des produits chimiques nocifs avec la peau, la bouche, le nez et les yeux.

- environnement expérimental: la colonne de purification des protéines doit être placée sur une table de travail en douceur, l'environnement de fonctionnement doit être bien ventilé, la température appropriée, exempt de poussière et d'autres polluants.