En combinaison avec la technologie de prétraitement des échantillons, la haute résolution et la haute sensibilité atteintes par HPLC permettent la séparation et la détermination simultanée de substances de nature très proche, capables de séparer des composants traces dans des phases complexes. Avec le développement de la phase stationnaire, il est possible de compléter sa séparation dans des conditions qui maintiennent suffisamment l'activité de la substance biochimique.

Le système de l'usine de chromatographie liquide se compose de plusieurs parties telles que réservoir, pompe, échantillonneur, colonne de chromatographie, détecteur, enregistreur, etc. La phase mobile dans le réservoir est entraînée dans le système par la pompe à haute pression, la solution d'échantillon est entrée dans la phase mobile par l'intermédiaire de l'échantillonneur, chargée par la phase mobile à l'intérieur de la colonne de chromatographie (phase stationnaire), en raison du fait que les composants de la solution d'échantillon ont des coefficients de partage différents dans les deux phases, lorsque le mouvement relatif est effectué dans les deux phases, après un processus de distribution répété et répété d'adsorption - désorption, chaque composant crée une grande différence dans la vitesse de déplacement, est séparé en un seul composant sortant de la colonne à son tour, à travers Le détecteur, la concentration de l'échantillon est convertie en un signal électrique transféré à l'enregistreur et les données sont imprimées sous forme

Compréhension des fabricants de chromatographes en phase liquide

Le coefficient de partage est lié aux propriétés thermodynamiques des composants, de la phase mobile et de la phase stationnaire, mais aussi à la température, à la pression. Dans les différents mécanismes de séparation chromatographique, k a des concepts différents: la chromatographie d'adsorption est le coefficient d'adsorption, la chromatographie d'échange d'ions est le coefficient de sélectivité (ou coefficient d'échange) et la chromatographie sur gel est le paramètre de perméation. Mais le cas général peut être représenté par un coefficient d'allocation.

Dans certaines conditions (phase mobile, phase stationnaire, température et pression, etc.), lorsque la concentration de l'échantillon est faible (CS, CM sont faibles), k ne dépend que de la nature du composant, quelle que soit la concentration. Il ne s'agit que des conditions chromatographiques à l'état idéal, dans lesquelles les pics chromatographiques obtenus sont des pics normaux; Dans de nombreux cas, K diminue à mesure que la concentration augmente, lorsque le pic chromatographique est un pic traînant; Parfois, lorsque la concentration du soluté augmente, K augmente également, lorsque le pic chromatographique est un pic prolongateur. Par conséquent, les pics normaux ne peuvent être obtenus que si l'apport est réduit autant que possible, de sorte que la concentration des composants dans la colonne diminue et que K est constant.