L'étalonnage et la vérification quotidiens des spectrophotomètres UV - visible sont essentiels pour garantir l'exactitude des données, notamment l'étalonnage en longueur d'onde, l'étalonnage en Absorbance, l'étalonnage de base et la vérification des performances, comme suit:
I. Calibration de longueur d'onde
Utilisation d'une lampe Standard: l'étalonnage est effectué à l'aide des raies d'émission caractéristiques des lampes au mercure ou au deutérium (p. ex., 253,7 nm, 365 nm pour les lampes au mercure). Réglez l'instrument à une longueur d'onde spécifique, placez une lampe d'étalonnage, Ajustez le chemin optique pour qu'il traverse la cellule d'échantillon, observez les pics d'absorption et enregistrez la valeur réelle de la longueur d'onde, par rapport à la longueur d'onde standard, l'écart est corrigé par la fonction intégrée de l'instrument ou par la correction manuelle du réseau de réglage.
Utilisez un filtre standard: utilisez un filtre en verre dopé ho³⁺, balayez ses pics d'absorption caractéristiques (par exemple 418 nm, 450 nm), corrigez les valeurs indiquées en longueur d'onde. Cette méthode ne nécessite pas de commutation complexe de la source lumineuse, mais nécessite un changement régulier du filtre (1 fois par an recommandé).
II. étalonnage de l'Absorbance
Taux de transmission méthode de solution standard:
Zone visible: on utilise une solution de sulfate de cuivre (cuso₄·5h₂o, λ = 640 nm, a = 0,5).
Zone ultraviolette: utilisation d'une solution de Dichromate de potassium (k₂cr₂o₇, λ=350nm，A=0.5）。
Exigences de formulation: utilisez le réactif pur analytique avec une Fiole jaugée de première classe, la durée de conservation de la solution ne dépasse pas 7 jours. En utilisant la boîte de couleur de quartz de 1cm, avec l'air comme référence, la cellule d'échantillon doit être lavée 3 fois avec le liquide de référence avant la mesure. 3 Mesures consécutives de RSD ≤ 0,3% sont requises, sinon le liquide doit être rechargé.
Méthode de filtre neutre: lorsque l'Absorbance > 1,5 UA, une combinaison de filtres neutres (par exemple, la superposition od = 0,5 + 1,0) est introduite pour corriger la déviation de la loi de Beer par un ajustement multipoint.
Iii. Étalonnage de base
L'Absorbance d'un solvant vierge (par exemple de l'eau distillée) est mesurée en utilisant comme référence. Ajustez le dispositif de réglage de base de l'instrument pour que la valeur d'Absorbance du solvant vide soit nulle. Répétez la mesure plusieurs fois pour vous assurer que la ligne de base est stable.
Iv. Vérification des performances
Vérification de la précision: préparer une série de solutions étalons à différentes concentrations, mesurer séparément l'Absorbance de chaque solution étalon, calculer sa moyenne et son écart type, évaluer la précision de l'instrument.
Vérification de la répétabilité: avec la même solution standard, plusieurs mesures successives, calcul de la valeur d'Absorbance pour chaque mesure, détermination de sa moyenne et de son écart type, évaluation de la répétabilité de l'instrument.
Vérification de la linéarité: préparer une série de solutions étalons à différentes concentrations, mesurer séparément l'Absorbance de chaque solution étalon, tracer la courbe Absorbance - concentration, calculer le coefficient de corrélation linéaire de la courbe, évaluer la linéarité de l'instrument.