Bouteille de milieu de cultureL'ouverture est le premier lien de l'expérimentation microbienne, de la culture cellulaire, dont la spécification opérationnelle détermine directement le succès des expériences ultérieures - une mauvaise manipulation peut entraîner une contamination du milieu de culture, une défaillance des composants et même des risques pour la sécurité des expérimentateurs. Les principes de base doivent être étroitement liés au « contrôle aseptique» et à la « sécurité opérationnelle», établissant un processus complet et normalisé de la préparation à la finition.

La préparation préalable est la base de la garantie de stérilité. L'environnement expérimental doit être confirmé avant l'opération: l'armoire de biosécurité ou la table ultra - propre doit être activée à l'avance pour la désinfection UV pendant 30 minutes, la ventilation après 20 minutes avant l'opération; Les expérimentateurs doivent porter des gants stériles, des vêtements de laboratoire et, s'il s'agit de cultures microbiennes intenses, des masques et des lunettes. Vérifiez également l'état du flacon de milieu de culture: Observez si le flacon est cassé, si le film d'étanchéité est en bon état, si l'étiquette indique clairement le type de milieu de culture, la date de stérilisation et la date d'expiration, si la date d'expiration est dépassée ou si le milieu de culture est trouble, les anomalies de précipitation, etc., l'abandon direct n'a pas besoin d'être ouvert.

L'opération d'ouverture est effectuée avec précision en trois étapes. La première étape est la désinfection de surface, placez le flacon de milieu de culture au centre de la table de travail, utilisez la gaze stérile trempée dans 75% d'alcool médical, essuyez la surface du corps du flacon et le bouchon en spirale avec l'embouchure du flacon comme centre, concentrez - vous sur la désinfection du bouchon et de la jonction du corps du flacon, évitez la poussière ou les micro - organismes avec l'opération. Attendez que l'alcool soit complètement volatilisé après la désinfection, empêchant le mélange de résidus d'alcool dans le milieu de culture d'affecter la croissance cellulaire ou microbienne.

La deuxième étape consiste à ouvrir le bouchon de la bouteille, à maintenir la posture de « l'embouchure de la bouteille inclinée vers le bas» tout au long du processus, afin d'éviter la chute de polluants dans l'air lorsque l'embouchure de la bouteille est orientée vers le haut. Une main tient le corps de la bouteille dans la partie inférieure fixe, l'autre main pince le bord du bouchon avec le pouce et l'index, tourne lentement dans le sens anti - horaire, tourne jusqu'à ce que le bouchon soit desserré, ne retirez pas tout, conservez l'état de connexion du filetage 1 - 2 Tours, relâchez lentement la pression qui peut survenir à l'intérieur de la bouteille - une attention particulière est accordée à la bouteille de milieu de culture après autoclave, la pression négative peut se former à l'intérieur après la stérilisation à haute température, l'ouverture totale soudaine est susceptible de provoquer une irrigation rapide de l'air extérieur.

La troisième étape est la désinfection secondaire de l'embouchure de la bouteille et l'articulation de l'opération, après avoir complètement retiré le bouchon de la bouteille, immédiatement avec une pince à épiler stérile pour prendre une nouvelle gaze stérile tremper dans l'alcool, essuyer rapidement le côté intérieur de l'embouchure de la bouteille et le filetage, puis Placez le bouchon à l'envers dans la zone d'opération stérile (le bouchon de la bouteille est tourné vers le haut pour éviter la contamination par contact). Après ouverture de la bouteille de milieu de culture doit effectuer le fractionnement ou l'opération d'inoculation dès que possible, si temporairement inutile, doit envelopper l'embouchure de la bouteille avec une membrane de fermeture stérile, mettre au réfrigérateur à 4 ℃ réfrigéré, le temps de réfrigération ne dépasse pas 24 heures, avant de réutiliser doit répéter l'étape de désinfection de l'embouchure de la bouteille.

La fin de l'opération est tout aussi critique que le traitement des exceptions. Après utilisationBouteille de milieu de cultureSi le milieu restant est inclus, il faut ajouter un désinfectant contenant du chlore après stérilisation avant de le jeter; Si vous renversez accidentellement le flacon de milieu de culture non ouvert pendant l'opération, vous devez couvrir la zone contaminée avec du coton désinfectant et laisser reposer 30 minutes après avoir pulvérisé le désinfectant avant de le nettoyer. L'enregistrement des opérations est également établi, indiquant le temps d'ouverture, l'utilisateur et l'état du milieu de culture pour fournir une base de traçabilité expérimentale.

La "bonne ouverture" du flacon de milieu de culture n'est pas une simple ouverture physique, mais une manipulation figurative de l'idée de stérilité. Chaque détail, de la désinfection de l'environnement à la protection de la bouche de bouteille, est une ligne de défense importante pour garantir la précision et la sécurité des expériences, en particulier dans les domaines de haute précision de la thérapie cellulaire, de la microbiologie et de la pharmacie, où un processus d'ouverture normalisé est une condition préalable à la fiabilité des résultats expérimentaux.