Réactif de transfection 78pei Max 40k

🔍 Présentation du produit

Nom chimique:Polyéthylèneimine linéaire, Pei linéaire, polyéthylèneimine linéaire, MW 40000， Grade transfectant, polyéthylèneimine linéaire (poids moléculaire 40000)

Numéro de commande:78pei40000

Spécifications:100mg / 500mg / 5g

Marque:BIOHUB

CAS :49553 - 93 - 7

Poids moléculaire:40000 (~ 22000 radicaux libres)

Soluble dans:Eau

Insoluble dans:Solvants organiques usuels (éthanol, acétone, tétrahydrofuronome)

Apparence:Solide à écoulement libre blanc à blanc cassé

Traitement:Gants et hotte

Stockage:Stockage sec à l'abri de la lumière à température ambiante

Présentation:

1.Réactif de transfection 78pei Max 40k（Aussi appelé Pei 22k en base libre) est un réactif de transfection instantanée fonctionnel *, fiable et abordable. Dans hek293 et cho la plupart des systèmes d'expression, Pei Max fournit une expression stable et élevée (plaque 96 puits à Bioréacteur de 100 l). De plus en plus de chercheurs et d'entreprises utilisent Pei - Max pour la transfection cellulaire chaque année, car Pei - Max peut à la fois attendre une expression stable et élevée et réduire les coûts de transfection de 40% par rapport à la plupart des réactifs de transfection.

2.78le Pei Max 40k est plus facile à utiliser que le Pei 25k et a une efficacité de transfection plus élevée que le Pei 25k, généralement le processus de transfection Pei 25k prend généralement quelques heures pour terminer la préparation, tandis que le Pei Max 40k peut compléter le processus de transfection en deux heures. De plus, Pei 25k contient de 4 à 11% de groupes propionyle résiduels, ce qui peut entraver la liaison efficace du brin principal du polymère à l'ADN, tandis que les groupes propionyle de Pei Max 40k sont sujets à la chute, ce qui signifie que les performances de Pei Max par lot sont plus stables.

💎 Méthode de configuration du produit

1. Formulation du liquide de stockage (1 mg / ML)

- matériel: poudre 78pei40000, eau ultra pure, NaOH 1n, membrane filtrante de 0,1 μm

- Étapes:

① prenez 1 G de poudre dissoute dans 900 ml d'eau Ultrapure, sous agitation magnétique jusqu'à dissolution;

② ajuster le pH à 6,9 - 7,1 avec NaOH 1n goutte à goutte (en cas de dépassement, ajuster avec HCl 1n);

③ dimensionné à 1L, membrane filtrante de 0,1 μm pour la filtration des bactéries;

④ Conservation 4 ℃ après le fractionnement, la date d'expiration du liquide 6 mois, la poudre lyophilisée 1 an.

2. Formulation du liquide de travail

- dilution à raison de 1 µg d'ADN: 1 - 5 µl de liquide de stockage 78pei40000 (rapport initial recommandé 1: 3);

- diluer l'ADN et l'IPE à l'aide d'un milieu sans sérum (p. ex. OPTI - mem) et laisser reposer à température ambiante pendant 10 à 25 minutes pour former un complexe.

📌 Processus opérationnel de transfection

(i) transfection des cellules adhérentes

1. Inoculation cellulaire: les cellules sont inoculées 24 heures avant la transfection avec une densité allant jusqu'à 70% - 80% de confluence, remplacées par un milieu de culture contenant 5% de sérum;

2. Incubation du complexe: le complexe ADN - Pei est ajouté goutte à goutte à la boîte de pétri et incubé pendant 4 à 6 heures après un léger Vortex;

3. Changement de liquide et test: le milieu frais est remplacé, l'expression du gène peut être détectée après 7 heures, transmise et le médicament de dépistage ajouté après 24 heures.

(II) transfection de cellules en suspension

1. Préparation cellulaire: ajuster la densité cellulaire à 1x10⁶ cellules / ML, culture au shaker pendant 2 - 4 heures;

2. Ajout du complexe: le complexe ADN - Pei est ajouté goutte à goutte directement dans le shaker, en incubation continue sous agitation pendant 24 à 72 heures;

Optimisation de l'amplification: les cellules (1: 2 - 1: 5) peuvent être diluées 24 heures après la transfection pour améliorer la production de protéines.

⚡Réactif de transfection 78pei Max 40kNotes clés

1. Exigences de dissolution:

- doit être suffisamment dissout, les particules non dissoutes entraînent une diminution de l'efficacité de la transfection;

- il est recommandé d'utiliser un tube à centrifuger nest de 5 ml / 14 ml pour traiter de gros volumes de solution.

2. Contrôle de ph:

- le pH doit être ajusté avec précision à 6,9 - 7,1 lors de la dissolution initiale, trop haut ou trop bas affectent la formation du complexe.

3. État cellulaire:

- l'utilisation de cellules en phase de croissance logarithmique est recommandée pour éviter une digestion excessive endommageant les membranes cellulaires.

4. Contrôle de la toxicité:

- les cellules à haute densité (> 90% de confluence) nécessitent une réduction de la quantité d'IPE utilisée (ratio recommandé 1: 1).

Pour plus d'informations sur les produits, veuillez contacter l'agent régional en Chine: Shanghai Haifa Experimental Reagent Co., Ltd

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(Remarque: le contenu de cet article est basé sur le profil public de la marque et la collecte d'informations courantes de l'industrie, sous réserve des documents d'information sur la marque.)

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