C57BL / 6 milieu spécifique aux cellules

C57BL / 6 milieu spécifique aux cellules

C57BL/6Le milieu de culture cellulaire est soigneusement optimisé par l'équipe et, après des tests à long terme, ce produit maintientC57BL/6Excellent état de croissance des cellules.

Déjà inclus dans ce produitC57BL/6Divers ingrédients nécessaires à la croissance cellulaire, sans aucun ajout, peuvent être utilisés directementC57BL/6Culture des cellules.

Ingrédients principaux du produit:

DMEMMilieu de culture de base 400 ml

Sérum de veau foetal extra 75 mL

GlutaMAX-1 5 mL

MEM NEAAAcides aminés non essentiels 5 mL

Pyruvate de sodiumPyruvate de sodium 5 mL

P/S 5 mL

bêta-Mercaptoéthanol 0,5 mL(1000X)

LIF 5μg(10ng/mL) et

Transport et conservation

Transport: placé dans un incubateur contenant des sacs de bio - glace pour le transport à basse température

保存方法： 2℃～8℃， 保存2Mois;

1) RécupérationC57BL/6Les cellules: contiendra1 mlLyophilisateur de la suspension cellulaire dans 37℃ agiter rapidement dans le bain d'eau pour décongeler, ajouter4 mlLe milieu de culture est bien mélangé. Dans1000RPMCentrifugation sous conditions 4 Minutes, jeter le surnageant, ajouter1 à 2 mlBien souffler après le milieu. Toutes les suspensions cellulaires sont ensuite ajoutées à la culture dans le flacon de culture pendant la nuit (ou la suspension cellulaire est ajoutée)10 cmDans la boîte, ajouter environ8 mlMilieu de culture, incuber pendant la nuit). Changez de liquide le lendemain et vérifiezC57BL/6Les cellulesDensité.

2) Passage cellulaire: siC57BL/6Les cellulesDensité jusqu'à80% - 90%Peut être cultivé par génération.

1. Défricher la culture, utiliser sans ions calcium et magnésiumPBSRinçageC57BL/6Les cellules1 - 2Une fois.

2. plus1 mlSucs digestifs (0,25% trypsine-0,53 mM EDTA), dans un flacon de culture, placé 37Digestion en incubateur ℃1 - 2Minutes, puis observer la digestion cellulaire au microscope, siC57BL/6Les cellulesLa plupart deviennent ronds et tombent, récupèrent rapidement la table d'opération et terminent la digestion en ajoutant une petite quantité de milieu après avoir tapoté quelques flacons de culture.

3. Presse6 à 8 ml/Flacon de milieu de culture, aspirer après avoir battu doucement, dans1000RPMCentrifugation sous conditions 4 Minutes, jeter le surnageant, ajouter1 à 2 mlBien souffler après le liquide de culture.

4. Presser la suspension cellulaire 1Pour:2 Proportion à nouveau inclus8 mlDans une nouvelle boîte de milieu ou dans une bouteille.

3) Cellules congelées: à êtreC57BL/6Les cellulesLorsque l'état de croissance est bon, la lyophilisation cellulaire peut être effectuée. Ci - dessousT25Les bouteilles sont de classe;

1. Lorsque les cellules sont congelées, après avoir abandonné le milieu de culture,PBSAjouter après le nettoyage1 mlAprès la chute des cellules arrondies, ajouter1 mlLe milieu de culture contenant le sérum termine la digestion, qui peut être comptée à l'aide de plaques de comptage de globules.

2. 4 min 1000rpmCentrifuger pour enlever le limpide. plus1 mlLe sérum suspend les cellules, en ajoutant le sérum et en fonction du nombre de cellulesDMSO, mélanger doucement,DMSOLa concentration finale est10%, la densité cellulaire n'est pas inférieure à1x106/ml, chaque dépôt de congélation1 mlSuspension cellulaire, faites attention à ce que le lyophilisateur soit bien identifié.

3. Placer le tube de congélation dans la boîte de refroidissement du programme, mettre-80 Degrés réfrigérateur,2 Après une heure, il est transféré au stockage par irrigation à l'azote liquide. Enregistrez la position de la lyophilisation pour la récupérer la prochaine fois.

1.utiliserC57BL/6Les cellulesTout en faisant attention à l'opération stérile, éviter la contamination.

2.Ce produit contient du sérum et du double anti, s'il n'est pas particulièrement nécessaire de ne plus ajouter de sérum et de double anti, il peut être utilisé directement.

3.Pour maintenir le bonC57BL/6Les cellulesL'excellent effet d'utilisation, il ne doit pas être placé à température ambiante ou dans un environnement de température plus élevée pendant une longue période.

4.Tous les produits doivent être utilisés pendant la durée de conservation, au - delà, l'utilisation doit être abandonnée.

5.Ce produit est destiné uniquement à une utilisation scientifique ultérieure et ne peut pas être utilisé dans d'autres domaines tels que la clinique.

6.Après la congélation et la dégel du milieu de culture, il peut y avoir un petit dégagement de flocs qui n'affecte pasC57BL/6Les cellulesUtilisation normale.