C8166 - CD4 + Luc cellules leucémiques lymphocytaires t humaines + Luc

C8166 - CD4 + Luc cellules leucémiques lymphocytaires t humaines + Luc

Caractéristiques des cellules

Genre espècePour:Source humaine (Homo sapiens) et

Sources organisationnellesPour:Le sang (Le sang) et

La maladiePour:Inconnu (inconnu) et

âgePour:Inconnu (inconnu) et

GenrePour:Inconnu (inconnu) et

Types de cellulesPour:Lymphoblastes (Les lymphoblastes) et

Caractéristiques de croissancePour:Croissance en suspension (Suspension) et

Contenu:>1x10^6Nombre de cellules

Spécifications:T25Bouteille ou1 mlEmballage de tube de congélation

Utilisation: pour la recherche scientifique seulement.

Transport et conservation

Transport de glace sèche et réanimation de bonnes cellules viables

（1) et1 mlConteneur de congélation emballage transport de glace sèche, après réception-80Degrés réfrigérateur conserver pendant la nuit après le transfert à l'azote liquide ou la réanimation directe, si la glace carbonique a été volatilisée propre, le bouchon du réservoir de congélation est tombé, cassé et les cellules sont contaminées, s'il vous plaît contactez - nous immédiatement.

（2) etT25Les cellules survivantes de la réanimation du flacon sont expédiées à température normale, après réception, en suivant la méthode de traitement après réception des cellules.

Traitement après réception cellulaire

1), après réception des cellules,75%La paroi de la bouteille de désinfection de l'alcool seraT25La bouteille est placée37℃ incubateur placé environ2-3hSi vous trouvez des bouteilles de culture cassées, des déversements de liquide et des cellules contaminées, veuillez nous contacter rapidement après avoir pris des photos.

2) s'il vous plaît dans4ou5XConfirmez l'état des cellules au microscope tout en prenant des photos des cellules que vous venez de recevoir (10×,20×) Chaque2 - 3Une photo de l'apparence du flacon de culture est conservée comme base de l'état des cellules lors de la réception après - vente.

3), cellules adhérentes: cellules dans37℃ placé dans l'incubateur2-3hSous le microscope pour observer la croissance des cellules et l'application des parois, certaines cellules de l'application des parois dans le processus d'expédition Express sera en raison de la vibration de tomber et après la formation de la masse. Si vous regardez la densité de croissance des cellules sous le miroir si60%Ci - dessous, le milieu de perfusion peut être retiré du flacon de culture (s'il y a des cellules non collées qui doivent être récupérées par centrifugation, remises en suspension dans le flacon de culture d'origine),Ajouter le milieu spécial nouvellement formulé6 à 8 mlPlacer dans l'incubateur de cellules pour poursuivre la culture. Si la densité de croissance cellulaire est70% - 80%Ci - dessus, les cellules peuvent être traitées par passage. Pendant le passage, si les cellules tombées en raison des vibrations de transport doivent être récupérées par centrifugation.

4) Remarque: le milieu de culture utilisé pour le transport (milieu de culture de perfusion) ne peut plus être utilisé pour la culture des cellules, veuillez le remplacer par celui fraîchement formulé conformément aux conditions de culture cellulaire des instructionsMilieu de culture spécialisé pour cultiver les cellules. Première recommandation de passage après réception des cellulesT25Bouteille de culture1Pour:2Génération.

Préparation du milieu de culture et des conditions de congélation:

1) et1640Milieu de culture+10% FBSSérum de veau foetal de qualité+1 % P/SDouble résistance+ 1%Pyruvate de sodium+1%L-Glutamine

2) et Conditions de culture: phase gazeuse: air,95%; dioxyde de carbone,5%. température:37Degrés Celsius, l'humidité de l'incubateur est70% - 80%- Oui.

3) et Liquide de stockage congelé:90%Le sérum,10 % de DMSOActuellement disponible.

II. Traitement cellulaire:

1) et Réanimation des cellules lyophilisées:

Contiendra1 mlLyophilisateur de la suspension cellulaire dans37℃ bain d'eau rapidement secoué pour décongeler, ajouter à contenant4 à 6 mlBien mélanger dans le tube de centrifugation du milieu dédié. Dans1000RPMCentrifugation sous conditions3 à 5 minutesJeter le surnageant,Milieu de culture spécialisé pour remettre en suspension les cellules. La suspension cellulaire est ensuite ajoutée à la6 à 8 mlDans des flacons (ou boîtes) de milieu de culture dédié37℃ cultiver pendant la nuit. La croissance cellulaire et la densité cellulaire sont observées au microscope le lendemain.

2) et Passage cellulaire: si la densité cellulaire atteint80% - 90%Peut être cultivé par génération.

Pour le passage de cellules adhérentes, on peut se référer aux méthodes suivantes:

1. Défricher la culture, utiliser sans ions calcium et magnésiumPBSLavage des cellules1 - 2Une fois.

2. Adhérer0.25% (w / v) trypsine-0,53 mM EDTADans une bouteille de culture (T25bouteille1 à 2 ml,T75bouteille2 à 3 ml), placés37Digestion en incubateur ℃1 - 2Minutes (les cellules difficiles à digérer peuvent prolonger le temps de digestion de manière appropriée), puis observer la digestion des cellules au microscope, si la plupart des cellules deviennent rondes et tombent, rapidement revenir à la table d'opération, tapoter quelques bouteilles de culture après l'ajout3 à 4 mlContient10 % FBSMilieu de culture pour terminer la digestion.

3. Aspirer après un léger battement, dans1000RPMCentrifugation sous conditions3 à 5 minutesRetirer le surnageant, ajouter1 à 2 mlBien souffler après le liquide de culture. Presser la suspension cellulaire1Pour:2Proportion à nouveauT25Dans la bouteille, ajouter6 à 8 mlNouveau configuré selon les instructionsMilieu de culture dédié pour maintenir la vitalité de croissance des cellules, passage ultérieur selon la situation réelle presse1: 2 à 1: 5La proportion est effectuée.

3) Gel des cellulesPour:Après réception des cellules recommandé avant la culture3Congeler un lot de semences cellulaires pour une utilisation expérimentale ultérieure.

C8166 - CD4 + Luc cellules leucémiques lymphocytaires t humaines + Luc