Clover TC - m160 pro colonne de purification multifonctionnelle pour les toxines de moisissure

Clover TC - m160 pro colonne de purification multifonctionnelle pour les toxines de moisissure

Aspergillus aflatum, zéaralénone etle T-2Détermination des toxines

- - -LC-MS法语

1.Utiliser des objets

Référence à cette méthodeNY/T2071-2011, Aflatoxines dans les échantillons d'essai, zéaralénone etLa toxine t - 2 est extraite par une solution d'acétonitrile, après le dégraissage du N - hexane et la purification de la colonne de purification multifonctionnelle, l'azote est séché à l'air et la solution de Formiate d'acétonitrile est dissoute, déterminée par la méthode liquide.

Cette méthode aflatoxineAvecLa limite de détection de la toxine t - 2 est de 1,0 µg / kg et la limite de quantification de 2,0 µg / kg; La limite de détection de la zéaralénone est de 5,0 µg / kg et la limite de quantification de 10,0 µg / kg.

GB13078-2017Spécifié dans les normes d'hygiène des aliments pour animaux:

2.Préparation expérimentale

2.1Formulation de la solution

Solution d'acide formique (0,1%): quantité précise d'acide formique1 ml, ajouter de l'eau à1000 mlBien agiter.

Solution d'acide acétique (0,02%): prendre la quantité exacte d'acide acétique glacial0,2 ml, ajouter de l'eau à1000 mlBien agiter.

Solution de Formiate d'acétonitrile: prendre la solution d'acide formique50 ml, plus acétonitrile à100 mlBien agiter.

2.2Liquide de réserve standard mélangé:

Sucer une certaine quantité séparément6Mycotoxine standard dans une Fiole jaugée brune, associée au méthanol à une concentration de1 µg/mlRéserve mixte, conservée dans4℃ dans le réfrigérateur.

2.3Fluide de travail standard de matrice:

Prélever séparément une certaine quantité de la réserve standard de mycotoxine, ajouter l'extrait d'échantillon vierge, après séchage à l'azote, diluer avec la phase mobile à la concentration de1.0ug/L, 5.0ug/L, 10.0ug/L, 50ug/L, 100ug/L, 200ug/LLiquide de travail de série standard mélangé, nouveau dosage pour utilisation immédiate.

3.Pré - traitement des échantillons

（1) appelé5g±0.02gLes échantillons d'aliments pour animaux sont50 mlDans le tube centrifuge, ajouter avec précision25 mlLiquide d'extraction (acétonitrile: eau)= 84Pour:16), mélange au vortex2 minutes, placé dans un nettoyeur à ultrasons extraction par ultrasons20 minutes, oscillations intermédiaires2 - 3Une fois.

（2) retiré, en8000r/minCentrifugation5 minutes, décanter le surnageant dans l'ampoule à décanter, ajouter15 mlN - hexane, suffisamment oscillant. Après la stratification au repos, la quantité exacte de liquide de la couche est prélevée5 ml, à utiliser.

（3) sera ci - dessus5 mlLiquide, colonne de purification trop polyvalente, débit contrôlé est2 ml/minRecueillir les effluents, dans60Séchage sous azote ℃.

（4) avec1,0 mlSolution de Formiate d'acétonitrile pour dissoudre le résidu, vortex30 ans, par0,22umAprès filtration de la membrane filtrante, la machine supérieure est détectée.

4 Chromatographie en phase liquide-Spectrométrie de masse en tandem

4.1Conditions de chromatographie en phase liquide

Colonne chromatographique:C18Colonnes3,0 × 150 mm(3,0 um); Ou d'autres colonnes chromatographiques équivalentes.

Température de la colonne:33℃

Quantité d'échantillon:20 µl

Phase mobile, voir tableau ci - dessous pour les débits.

a.ESI+Conditions d'élution du gradient de source

A.esi - conditions d'élution du gradient de source

4.2 Conditions de spectrométrie de masse

aSource d'ions: source d'ions électrospray.

bMode de balayage: mode de balayage ionique positif et mode de balayage ionique négatif.

cMode de détection: surveillance Multi - réactive.

dLe gaz de désolvation, le gaz de trou conique sont tous de l'azote de haute pureté, le gaz de collision est de l'argon de haute pureté, avant l'utilisation, chaque débit de gaz doit être ajusté pour que la sensibilité du spectre de masse atteigne les exigences de détection.

eTension capillaire, tension de trou conique, énergie de collision et autres valeurs de tension doivent être optimisées àSensibilité.

fPaires d'ions qualitatives, paires d'ions quantitatives, temps de rétention et valeurs de référence correspondantes pour la tension de trou conique et l'énergie de collision voir le tableau ci - dessous

a.ESI +Mode de surveillance

b.ESI-Mode de surveillance

5.Détermination qualitative

Dans les mêmes conditions expérimentales, le temps de rétention de la substance à mesurer dans l'échantillon ne s'écarte pas du temps de rétention de la solution standard de plus de ±2,5%Et l'abondance relative des ions qualitatifs de chaque tombe ancestrale dans l'échantillon est comparée à l'abondance relative des ions qualitatifs correspondants dans une solution standard de concentration voisine, avec un écart ne dépassant pas l'étendue du tableau ci - dessous, ce qui permet de déterminer la présence de la substance à mesurer correspondante dans l'échantillon.

Grand écart admissible de l'abondance relative des ions à la confirmation qualitative (% de) et

6.Détermination quantitative

Dans les conditions de travail de l'instrument, mélanger le liquide de travail standard avec l'échantillon d'essai en alternance dans l'échantillon, appliquer la correction de la solution standard d'adaptation de matrice, la méthode d'étalonnage externe est quantitative.

Clover TC - m160 pro colonne de purification multifonctionnelle pour les toxines de moisissure

Marque: Clover