Kit ELISA pour les adipocytokines humaines (chemerin)

Kit ELISA pour les adipocytokines humaines (chemerin)

Exigences relatives aux spécimens
1. Traitement des échantillons: (1) après la collecte de l'échantillon d'eau par - 20 ℃ à plusieurs reprises gelé et dégel trois fois, puis filtré par fibre de verre, prêt à vérifier
(2) Prélèvement d'échantillons de tissus avec butanol: méthanol: eau (5: 25: 70 V: V: v) ou par phase
L'extraction de la littérature pertinente est effectuée et l'expérience doit être effectuée dès que possible après l'extraction. Si le test ne peut être effectué immédiatement,
Peut placer des spécimens à - 20 ℃ pour la conservation, prêt à vérifier
Les échantillons contenant nan3 ne peuvent pas être détectés, car nan3 inhibe l'activité de la peroxydase de raifort (HRP).

Kit ELISA pour les adipocytokines humaines (chemerin)étapes de fonctionnement
1.sample: faire des trous standard, des trous blancs séparément (les trous de contrôle blancs n'ajoutent pas d'échantillon et de réactif de référence enzymatique, le reste des étapes fonctionnent de la même manière),
Trou d'échantillon à tester. Ajouter 50 µl dans les puits standards de la plaque dans le pack d'étalonnage de l'enzyme et 40 µl de dilution de l'échantillon dans les puits de l'échantillon à tester,
On ajoute ensuite 10 µl supplémentaires de l'échantillon à tester (dilution finale de l'échantillon 5 fois). Ajouter l'échantillon au fond du trou de la plaque d'étalonnage enzymatique, en
La quantité ne touche pas la paroi du trou, remuer doucement et mélanger.
2. Ajouter l'enzyme: ajouter 50 μl de réactif d'étalon d'enzyme par puits, à l'exception des puits vides.
3. Incubation: incuber à 37 ℃ pendant 60 minutes après avoir scellé la plaque avec un film de plaque.
4. Liquide de dosage: réserve de lavage concentré 30X après dilution avec de l'eau distillée 30X
5. Lavage: soigneusement déballer la membrane de la plaque d'étanchéité, jeter le liquide, égoutter, remplir chaque trou avec le liquide de lavage, laisser reposer pendant 30 secondes et jeter, ainsi
Répétez 5 fois et faites sécher.
6. Rendu des couleurs: chaque trou d'abord ajouter l'agent de rendu des couleurs A50 μl, puis l'agent de rendu des couleurs B50 μl, mélanger légèrement sous agitation, 37 ℃ éviter le rendu de la lumière
15 minutes.
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7. Terminaison: ajouter 50 μl de liquide de terminaison par puits pour mettre fin à la réaction (à ce stade, le bleu tourne vers le jaune).
8. Détermination: l'Absorbance (valeur OD) de chaque trou est mesurée dans l'ordre séquentiel à la longueur d'onde de 450 nm et à zéro dans le trou vide. La détermination doit se terminer en plus
Effectuer dans les 15 minutes suivant le liquide.

calcul
Avec la concentration de l'étalon en abscisse et la valeur od en ordonnée, la courbe standard est tracée sur le papier de coordonnées, selon l'échantillon de
La valeur od est déterminée par la courbe standard pour la concentration correspondante; Multiplier par le multiple de dilution; Ou calculer l'étalon avec la concentration de l'étalon et la valeur OD
équation de régression linéaire de la quasi - courbe, en remplaçant la valeur od de l'échantillon dans l'équation, en calculant la concentration de l'échantillon, puis en multipliant par un multiple de dilution,
C'est - à - dire la concentration réelle de l'échantillon.

Précautions
1. Le kit doit être retiré de l'environnement réfrigéré et peut être utilisé après 15 - 30 minutes d'équilibre de la température ambiante, le paquet d'étiquette d'enzyme est ouvert par la plaque si elle n'est pas
Utilisé, les lattes doivent être emballées dans un sac scellé pour la conservation.
2. Le liquide de lavage concentré peut avoir un dégagement cristallin, dilué peut être chauffé dans un bain - Marie pour aider à la dissolution, le lavage n'affecte pas le résultat.
3. L'éprouvette doit être utilisée pour chaque étape d'échantillonnage et sa précision doit être fréquemment corrigée pour éviter les erreurs d'essai. Meilleur temps d'ajout à la fois
Contrôle dans les 5 minutes, si le nombre de spécimens est élevé, il est recommandé d'utiliser un pistolet d'exhaustion.
4. S'il vous plaît faire la courbe standard en même temps que chaque détermination, il est préférable de faire des pores. Si la teneur en substance à mesurer est trop élevée dans l'échantillon (valeur od de l'échantillon)
Plus grande que la valeur od du premier trou du trou standard), veuillez d'abord diluer un certain multiple (n fois) avec la dilution de l'échantillon avant de déterminer, compteur
Pour calculer, multipliez - le en dernier par le multiple de dilution total (× n × 5).
5. Le film de scellement est limité à un usage unique pour éviter la contamination croisée.
6. Substrat s'il vous plaît garder à l'abri de la lumière.
7. Strictement selon le fonctionnement des instructions, le résultat de l'essai doit être déterminé par la lecture de l'étalon enzymatique. 8. Tous les échantillons, les liquides de lavage et tous les types de déchets doivent être éliminés selon les matières infectieuses.
9. Les composants des différents numéros de lot de ce réactif ne doivent pas être mélangés.

Spécifications:

48 portions / boîte

Conditions de conservation et durée de validité
1. Kit de préservation; 2 - 8°c.
2. Validité: 6 mois