Cytoflex prêt à l'emploi QC contrôle de la qualité quotidienne Fluorescent microsphère Instrument Calibration

La cytométrie de flux est une technique d'analyse cellulaire importante qui peut être utilisée pour le comptage cellulaire, l'analyse du phénotype cellulaire et le séquençage cellulaire, entre autres. Avant de procéder à la cytométrie de flux, il est important d'effectuer un contrôle de qualité pour assurer la précision et la fiabilité de l'expérience. Cet article détaillera les méthodes de contrôle de la qualité pour la cytométrie de flux.

1. Calibration du système fluide

Le système de fluide comprend un débitmètre et un capteur de pression. Tout d'abord, calibrez le débitmètre et le capteur de pression en mesurant le débit et la pression réels. Injecter un fluide standard dans le débitmètre, mesurer le débit et calibrer. Une pression standard est injectée dans le capteur de pression et la valeur de sortie est mesurée, puis calibrée.

2. Calibration du système laser

Le système laser calibré est destiné à déterminer la position du faisceau laser afin d'obtenir une lecture optique correcte dans le récipient d'échantillon. Fixé dans un tube d'échantillon de cytomètre de flux à l'aide de billes calibrées, les billes calibrées sont irradiées au laser et la position du faisceau laser est déterminée.

3. Calibration du système optique

L'étalonnage d'un système optique est la clé pour assurer une lecture chronologique précise de l'analyse de l'échantillon. Le système optique de Calibration comprend un détecteur et un SYNCHRONISEUR. Le détecteur est responsable de la mesure du nombre et de la taille des particules immunocolorées dans l'échantillon. Le SYNCHRONISEUR est chargé de s'assurer que les mesures sont effectuées à la bonne fréquence lorsque le détecteur mesure l'échantillon.

4. étalonnage standard des particules

La dernière étape de l'étalonnage du cytomètre en flux consiste à normaliser l'échantillon à l'aide d'un calibrateur de microparticules standard. À l'aide d'un tube d'échantillon spacieux, des microparticules standard sont testées à différentes concentrations. Après l'étalonnage de la courbe standard, le cytomètre en flux peut calculer avec précision le nombre et les caractéristiques de particules immunocolorées spécifiques dans l'échantillon.

Calibration cytométrique en flux

1. Nettoyez la Chambre d'échantillon du cytomètre de flux et vérifiez si le laser et le système de chemin optique fonctionnent correctement.

2. Vérifier la précision des paramètres de diffusion, de fluorescence et de temps du cytomètre à l'aide de matériaux étalons de particules.

3. Nettoyez et calibrez le système liquide du cytomètre en flux pour assurer un contrôle précis du débit et de la taille de l'échantillon.

Contrôle qualité des performances du cytomètre en flux

A. Vérifiez régulièrement les paramètres de performance du cytomètre de flux, y compris la sensibilité de diffusion, la sensibilité de détection de fluorescence et la résolution temporelle.

B. vérifier l'exactitude et la cohérence du débit à l'aide de particules calibrées,

C. ajustement de la résolution et de l'intensité avec des particules de contrôle de qualité appropriées, selon les besoins expérimentaux

Préparation des échantillons

1. Suspendez uniformément l'échantillon cellulaire pour éviter l'agglomération cellulaire et le dépôt. Elle peut être réalisée par centrifugation et remise en suspension des échantillons.

2. Utilisez des méthodes de coloration cellulaire de qualité fiable pour assurer la précision et la cohérence de la coloration.

3. Ajustez la concentration de l'échantillon pour éviter la perte de signal due à une focalisation excessive et à une cellule trop clairsemée.

Contrôle qualité de la pureté des échantillons

A. la pureté de la teinture est évaluée à l'aide d'un témoin négatif approprié et d'un éclairage direct. Par exemple, l'utilisation de cellules non colorées comme contrôle négatif et l'utilisation de cellules marquées positives auto - connues comme contrôle positif

B. vérifier régulièrement la cohérence des résultats de coloration pour s'assurer qu'il n'y a pas de marqueurs positifs pour les cellules contrôles négatives les cellules contrôles positives ont les marqueurs positifs attendus

Cytoflex prêt à l'emploi QC contrôle de la qualité quotidienne Fluorescent microsphère Instrument CalibrationIntroduction en chinois

Les Microsphères fluorescentes QC quotidiennes prêtes à l'emploi de cytoflex sont des suspensions de microsphères fluorescentes de 3 µm qui peuvent être utilisées pour l'alignement optique par cytométrie en flux et la vérification quotidienne des systèmes à flux liquide. Le produit se présente sous forme pré - diluée prête à l'emploi, avec des longueurs d'onde d'émission de fluorescence comprises entre 355 nm et 800 nm lorsqu'il est excité aux longueurs d'onde suivantes: 355 nm, 375 nm, 405 nm, 488 nm, 561 nm et 638 nm. Le mélange est mis en suspension Dans un milieu aqueux contenant des tensioactifs et des stabilisants. Le c65719 remplace le cytoflex Daily QC Fluorescent Sphere b53230 pour la plate - forme cytoflex cytometry.

Cytoflex prêt à l'emploi QC contrôle de la qualité quotidienne Fluorescent microsphère Instrument CalibrationPrésentation en anglais

CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres est une suspension de microsphères fluorescentes de 3 µm, qui peut être utilisée pour la vérification quotidienne du système d'alignement optique et de fluidique du cytomètre de débit. Ce produit est fourni dans un format pré-dilué, prêt à l'utilisation, avec une émission de fluorescence comprise entre 355 nm et 800 nm lorsqu'excité à: 355 nm, 375 nm, 405 nm, 488 nm, 561 nm et 638 nm. Le mélange est suspendu dans un milieu aqueux contenant des tensioactifs et des stabilisateurs. Cliquez ici pour les instructions d'utilisation de CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres. Ce produit remplace le CytoFLEX Daily QC Fluorospheres, B53230, et doit être utilisé avec la plateforme de cytomètre CytoFLEX.

Cytoflex prêt à l'emploi QC contrôle de la qualité quotidienne Fluorescent microsphère Instrument CalibrationProcessus opérationnels

1Utiliser le filtre recommandé par le fabricant pour détecter les paramètres de fluorescence appropriés (voir CytoFLEX Platform IFU).

2Assurez-vous que le fichier de valeur cible pour le lot spécifique de CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres a été chargé dans le logiciel de cytomètre de débit. Consultez votre CytoFLEX Platform IFU pour obtenir des instructions sur l'importation de votre fichier de valeur cible spécifique au lot.

3Mélangez vigoureusement le flacon CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres à l'aide d'un mélangeur vortex pendant 2-3 secondes.

4Ajouter :

4. 10 gouttes de fluorosphères dans un tube si vous utilisez le mode d'injection d'échantillon semi-automatique (tube).

b. 3 à 4 gouttes de fluorosphères dans un puits pour la plaque standard de 96 puits ou la plaque profonde pour le mode d'injection du chargeur de plaques.

5Exécutez le protocole de contrôle de qualité (QC) selon les instructions de votre plateforme CytoFLEX (IFU).

Cytoflex prêt à l'emploi QC contrôle de la qualité quotidienne Fluorescent microsphère Instrument CalibrationPrécautions

1. Les produits sont des produits prêts à l'emploi, aucune formulation supplémentaire requise, utilisation directe.

2. Si divisé, bien scellé, utilisé dans les 5 jours.

3. Les microsphères fluorescentes sont laissées au repos pendant une longue période, elles se déposeront naturellement. Assurez - vous de bien remettre les boules fluorescentes en suspension avant utilisation.

4. N'utilisez pas de boules fluorescentes dépassant la date de péremption indiquée sur l'étiquette du flacon échantillon.

5. Ne pas congeler le produit réfrigéré.

6. Utilisez les bonnes pratiques de laboratoire (BPL) lors de la manipulation de ce réactif.

7. Ce réactif contient des conservateurs, si le contact avec la peau ou les yeux se produit, veuillez le laver rapidement et profondément avec de l'eau.

Le but du rapport d'étalonnage de cytomètre de flux est d'enregistrer des informations détaillées sur tous les processus d'étalonnage de cytomètre de flux. Le rapport doit contenir les renseignements suivants:

1. Date et heure

2. Données d'étalonnage du système fluide

3. Données d'étalonnage du système laser

4. Données d'étalonnage du système optique

5. Données d'étalonnage de particules standard

6. Données d'étalonnage de perles d'étalonnage

7. Tout problème ou anomalie constaté lors de l'étalonnage

8. Nom et signature du technicien effectuant l’étalonnage