Leishmania ab anticorps test de diagnostic ELISA

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Leishmania ab anticorps test de diagnostic ELISA

Guangzhou Jianlun biotechnologie Co., Ltd

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Leishmania ab anticorps test de diagnostic ELISA

Principe d'essai

Test d'immunoadsorption enzymatique par méthode indirecte (ELISA). étalon de concentration connue de LSM - Ab, échantillon de concentration inconnue ajouté à l'intérieur d'une plaque enzymatique microporeuse pour la détection. Le LSM - Ab et les anticorps marqués sont d'abord incubés simultanément. Après le lavage, ajouter le pro

Et HRP marqué primitive. Après incubation et lavage, le conjugué enzymatique non lié est éliminé, puis les substrats a, B sont ajoutés, et le conjugué enzymatique est utilisé simultanément.

Avec. Produire des couleurs. La profondeur de la couleur et la concentration de LSM - Ab dans l'échantillon sont proportionnelles.

Matériel auto - fourni

Eau distillée.

加样器： 5ul, 10ul, 50ul, 100ul, 200, 500ul, 1000ul.

Oscillateurs et agitateurs magnétiques, etc.

sécurité

Éviter tout contact direct avec le liquide de terminaison et les substrats a, B. Une fois en contact avec ces liquides, rincer à l'eau dès que possible.

Ne mangez pas, ne buvez pas, ne fumez pas et n'utilisez pas de cosmétiques dans l'expérience.

Ne pas aspirer par la bouche les ingrédients contenus dans le kit.

Précautions opérationnelles

Les réactifs doivent être conservés conformément aux instructions de l'étiquette et ramenés à température ambiante avant utilisation. Les standards après dilution doivent être jetés et ne peuvent pas être conservés.

Les lattes qui ne sont pas utilisées dans l'expérience doivent être immédiatement remises dans le sac d'emballage, scellées et conservées afin de ne pas se détériorer.

Les autres réactifs non utilisés doivent être emballés ou couverts. Ne pas mélanger les réactifs avec des numéros de lot différents. Utiliser avant conservation.

Utilisez une tête d'aspiration à usage unique pour éviter toute contamination croisée et évitez d'utiliser un éprouvette avec une partie métallique lors de l'aspiration du liquide de terminaison et du liquide de substrat a, B.

Configurez le liquide de lavage avec un récipient en plastique propre. Bien mélanger les différents composants et échantillons contenus dans la cartouche avant utilisation.

Laver la plaque de marquage enzymatique doit être bien tamponné à sec, ne pas mettre le papier absorbant directement dans le trou de réaction de marquage enzymatique pour absorber l'eau.

Le substrat a doit être volatilisé pour éviter une ouverture prolongée du couvercle. Le substrat B est sensible à la lumière et évite une exposition prolongée à la lumière. Eviter le contact avec les mains, toxique. réel

La valeur od doit être lue immédiatement après la fin du test.

L'ordre dans lequel les réactifs sont ajoutés doit être cohérent afin de garantir le même temps d'incubation pour tous les puits de plaque réactionnelle.

L'opération d'incubation est effectuée selon le temps indiqué dans la description, la quantité et l'ordre d'addition.

Méthodes de collecte, de traitement et de conservation des échantillons

Sérum ----- Évitez toute irritation cellulaire pendant l'opération. Utilisez des tubes à essai exempts de pyrogènes et d'endotoxines. Après collecte du sang, centrifugation à 1000 × g pendant 10 minutes

Séparez le sérum et les globules rouges rapidement et soigneusement.

Plasma ---- EDTA, Citrate, plasma d'héparine peuvent être utilisés pour la détection. Les particules sont éliminées par centrifugation à 1000 x G pendant 30 minutes.

Surnageant cellulaire - - - 1000 × G centrifugation pendant 10 minutes pour éliminer les particules et les polymères.

Conservation ------- si l'échantillon n'est pas utilisé immédiatement, il doit être divisé en petites portions - 70 ℃ pour la conservation et éviter la congélation répétée. N'utilisez pas d'hémolyse ou de sang élevé autant que possible

Le sang lipidique. Si le sérum contient un grand nombre de particules, centrifuger ou filtrer avant la détection. Ne pas chauffer à 37 ° C ou plus pour décongeler. Doit être décongelé à température ambiante et

Assurez - vous que l'échantillon se décompose uniformément en gel.

Préparation des réactifs

Standard: les dilutions en série des standards doivent être préparées au moment de l'expérience et ne peuvent pas être stockées. Mélanger les standards sous agitation avant dilution.

Dilution du tampon de lavage (50 x): 50 x dilution avec de l'eau distillée.

étapes de fonctionnement

Avant utilisation, bien mélanger tous les réactifs. Ne laissez pas le liquide produire beaucoup de mousse, afin de ne pas ajouter beaucoup de bulles lors de l'ajout, créant une erreur d'ajout

La différence.

Le nombre de lattes nécessaires est décidé en fonction du nombre d'échantillons à tester plus le nombre de normes. Chaque standard et trou blanc est recommandé de faire un trou de perçage. Chaque échantillon selon

La quantité d'eux - mêmes est déterminée, peut utiliser la porosité poreuse pour faire la porosité autant que possible.

Ajouter 50 µl de l'étalon dilué dans le puits réactionnel, ajouter 50 µl de l'échantillon à tester dans le puits réactionnel. Ajouter immédiatement 50 µl d'anticorps marqués.

Couvrir la plaque de membrane, mélanger en agitant doucement et incuber à 37 ° C pendant 1 heure.

Jeter le liquide à l'intérieur des trous, remplir chaque trou avec du liquide de lavage, osciller pendant 30 secondes, jeter le liquide de lavage, sécher avec du papier absorbant. Répétez cette opération 3 fois. Si vous utilisez une machine à laver les plaques

Lavage, le nombre de lavages est augmenté une fois.

80 µl de streptase d'affinité - hrp sont ajoutés par puits, malaxés sous agitation douce et incubés à 37°c pendant 30 minutes.

Jeter le liquide à l'intérieur des trous, remplir chaque trou avec du liquide de lavage, osciller pendant 30 secondes, jeter le liquide de lavage, sécher avec du papier absorbant. Répétez cette opération 3 fois. Si vous utilisez une machine à laver les plaques

Lavage, le nombre de lavages est augmenté une fois.

50 µl chacun des substrats a, B sont ajoutés par puits, malaxés sous agitation douce et incubés à 37°c pendant 10 minutes. Évitez la lumière.

Retirer la plaque enzymatique et ajouter rapidement 50 µl de liquide de terminaison, les résultats doivent être déterminés immédiatement après l'ajout du liquide de terminaison.

La valeur od de chaque trou est déterminée à une longueur d'onde de 450 nm.

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Réactif de détection qualitative des anticorps contre Leishmania (fièvre noire)

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