Kit ELISA Microcystine Lr (MC - Lr)

Kit ELISA Microcystine Lr (MC - Lr)

Ce kit est destiné à un usage de recherche uniquement.

Gamme de détection:96T

20 ng/L - 480 ng/L

But de l'utilisation:

Ce kit est destiné à la déterminationTeneur en Microcystine Lr (MC - Lr) des échantillons- Oui.

Principes expérimentaux

Ce kit applique la méthode sandwich à double anticorps pour déterminer les échantillonsMicrocystine Lr (MC - Lr)Niveau. Avec purifiéMicrocystine Lr (MC - Lr)Le paquet d'anticorps est microplaqué, fait un anticorps de phase solide, dans les micropores du paquet est ajouté successivementMicrocystine Lr (MC - Lr),étiqueté avec HRPMicrocystine Lr (MC - Lr)Les anticorps se lient pour former un complexe anticorps - antigène - marqueur enzymatique, coloré par le substrat TMB après * lavage. Le TMB est converti en bleu sous la catalyse de l'enzyme HRP et en jaune final sous l'action de l'acide. Nuances de couleur et dans l'échantillonMicrocystine Lr (MC - Lr)Corrélation positive. Détermination de l'Absorbance (valeur OD) à une longueur d'onde de 450 nm à l'aide d'un étalon enzymatique, dans un échantillon calculé par courbe standardMicrocystine Lr (MC - Lr)Concentration.

Composition du kit

Exigences relatives aux spécimens

1. L'extraction est effectuée le plus tôt possible après la collecte des spécimens, l'extraction est effectuée conformément à la littérature pertinente, l'expérience doit être effectuée dès que possible après l'extraction. Si le test ne peut pas être effectué immédiatement, les spécimens peuvent être conservés à - 20 ° C, mais la congélation et la dégel répétés doivent être évités.

Les échantillons contenant nan3 ne peuvent pas être détectés, car nan3 inhibe l'activité de la peroxydase de raifort (HRP).

Kit ELISA Microcystine Lr (MC - Lr)étapes de fonctionnement

• Dilution des étalons: Ce kit fournit un étalon primitif, que l'utilisateur peut diluer dans de petits tubes en suivant le schéma ci - dessous.

• Échantillonnage: Placez des trous blancs séparément (les trous de contrôle blancs n'ajoutent pas d'échantillon et de réactif étalon enzymatique, les étapes restantes fonctionnent de la même manière), des trous standard, des trous d'échantillon à tester. Dans le paquet d'étalon d'enzyme est dosé avec précision 50 μl de l'étalon sur la plaque, dans le puits de l'échantillon à tester est d'abord ajouté 40 μl de dilution de l'échantillon, puis 10 μl de l'échantillon à tester (la dilution finale de l'échantillon est 5 fois). Ajouter l'échantillon au fond du trou de la plaque de marquage enzymatique, essayez de ne pas toucher la paroi du trou, agitez doucement et mélangez.
• Incubation: incuber à 37 ° C pendant 30 minutes après avoir scellé les plaques avec un film de scellement.
• Dosage: laisser le liquide de lavage concentré 30X après dilution avec de l'eau distillée 30X
• Lavage: Retirez soigneusement le film de la plaque d'étanchéité, jetez le liquide, égouttez, remplissez chaque trou avec du liquide de lavage, laissez reposer 30 secondes après l'égouttage, répétez ainsi 5 fois, tapotez à sec.
• Ajout d'enzymes: 50 µl de réactif étalon enzymatique sont ajoutés par puits, à l'exception des puits vierges.
• Incubation: même opération 3.
• Lavage: même opération 5.
• Rendu des couleurs: chaque puits d'abord ajouter l'agent de rendu des couleurs A50 μl, puis ajouter l'agent de rendu des couleurs B50 μl, mélanger légèrement sous agitation, 37 ℃ éviter le rendu de la lumière pendant 10 minutes.
• Terminaison: ajouter 50 µl de liquide de terminaison par puits pour terminer la réaction (à ce moment - là, le bleu tourne au jaune).
• Détermination: l'Absorbance (valeur OD) de chaque pore est mesurée séquentiellement à la longueur d'onde de 450 nm et à zéro dans les pores blancs. Le dosage doit être effectué dans les 15 minutes suivant l'addition du liquide de terminaison.

Résumé des procédures opérationnelles:

calcul

Avec la concentration de l'étalon en abscisse et la valeur od en ordonnée, une courbe standard est tracée sur le papier de coordonnées, la concentration correspondante est détectée par la courbe standard en fonction de la valeur od de l'échantillon; Multiplier par le multiple de dilution; Ou calculer l'équation de régression linéaire de la courbe standard avec la concentration de l'étalon et la valeur OD, remplacer la valeur od de l'échantillon dans l'équation, calculer la concentration de l'échantillon et multiplier par le multiple de dilution, c'est - à - dire la concentration réelle de l'échantillon.

Précautions

1. Le kit doit être retiré de l'environnement réfrigéré et peut être utilisé après 15 - 30 minutes d'équilibre de la température ambiante, si le paquet d'enzyme standard n'est pas utilisé après l'ouverture de la plaque, les lattes doivent être emballées dans un sac scellé pour la conservation.

2. Le liquide de lavage concentré peut avoir un dégagement cristallin, dilué peut être chauffé dans un bain - Marie pour aider à la dissolution, le lavage n'affecte pas le résultat.

3. L'éprouvette doit être utilisée pour chaque étape d'échantillonnage et sa précision doit être fréquemment corrigée pour éviter les erreurs d'essai. Le temps d'un prélèvement est contrôlé en 5 minutes, si le nombre de spécimens est élevé, un prélèvement au pistolet est recommandé.

• S'il vous plaît faire la courbe standard en même temps que chaque détermination, faire des pores. Si le contenu de la substance à mesurer dans l'échantillon est trop élevé (la valeur de do de l'échantillon est supérieure à la valeur de do d'un puits standard di), diluez un certain multiple (n fois) avec la dilution de l'échantillon avant de le déterminer, puis multipliez le multiple de dilution total (× n × 5) lors du calcul.
• Le film de scellement est à usage unique pour éviter la contamination croisée.

6. Substrat s'il vous plaît garder à l'abri de la lumière.

7. Strictement selon le fonctionnement des instructions, le résultat de l'essai doit être déterminé par la lecture de l'étalon enzymatique.

8. Tous les échantillons, les liquides de lavage et tous les types de déchets doivent être éliminés selon les matières infectieuses.

9. Les composants des différents numéros de lot de ce réactif ne doivent pas être mélangés.

Conditions de conservation et durée de validité

1. Kit de préservation; 2 - 8°c.

2. Validité: 6 mois