Prominenece UFLC chromatographe liquide ultra - rapide

L'analyse rapide en tant que sujet technique important a toujours été utilisée, mais avec la popularité rapide du lcms, l'amélioration du rapport qualité - prix est devenue un problème imminent et est devenue un facteur important pour accélérer le processus.
L'analyse rapide, c'est - à - dire la réduction du temps d'analyse, est généralement réalisée en raccourcissant la colonne chromatographique ou en augmentant le débit de la phase mobile. Mais avec une colonne de remplissage couramment utilisée de granulométrie 5 µm, les propriétés de séparation par n'importe quelle méthode sont nettement dégradées, rendant la rapidité inutile.
Ainsi, les deux approches suivantes ont été développées:

• Utilisation de charges de petite taille de particules
  Grâce à cette méthode, une séparation rapide sera possible. Mais, en raison de l'augmentation de la résistance à l'écoulement dans la colonne de chromatographie, la pression à laquelle sont soumis les différents composants de l'instrument et la colonne de chromatographie augmentera également considérablement.
  
• Séparation à haute température
  Des températures plus élevées peuvent accélérer la diffusion de la matière tout en réduisant la résistance à l'écoulement dans la colonne de chromatographie et en permettant une séparation rapide. L'analyse à haute température est efficace pour réduire la pression de la colonne, mais la dégradation de la colonne de chromatographie causée par la température élevée, entraînant la décomposition de l'échantillon et d'autres insuffisances nécessitent une attention particulière lors de l'application.
  Pour résoudre le problème de la contre - pression, des instruments améliorant la capacité de compression ont été développés, ce type d'instrument étant généralement plus coûteux. Cependant, ces instruments ont dû faire des compromis sur les performances et la sensibilité de l'échantillon entrant. Et, les colonnes de remplissage trop finement remplies, exigeantes en matériel, les méthodes analytiques développées avec de telles colonnes chromatographiques sacrifient la polyvalence. Par conséquent, si un tel instrument est utilisé dans une analyse HPLC de routine, son efficacité sera réduite.

Prominence prend en charge la séparation rapide
Prominence utilise des composants standard qui peuvent répondre simultanément aux besoins des chercheurs en matière d'analyse traditionnelle et d'analyse à grande vitesse, et peut également supporter des températures de fonctionnement allant jusqu'à 85 ° C, ce qui permet une analyse rapide à des pressions plus faibles, tandis que les performances analytiques et les niveaux de flux incarnés par L'instrument sont rares, même dans des configurations d'instruments plus coûteuses.

Prominence UFLC permet une analyse rapide avec les caractéristiques suivantes:

• Les petits tubes de colonne et les bassins de circulation de faible volume réduisent l'effet d'élargissement du pic hors colonne.
  
• On utilise une colonne de chromatographie Shim - Pack xr - ODS de granulométrie 2,2 µm.
  Shim - Pack xr - ODS est la question de prendre en compte la nuance de la charge ci - dessus, de trouver habilement un équilibre dans la relation entre l'efficacité de séparation et la pression, ce qui peut améliorer ou maintenir l'effet de séparation tout en réduisant le temps d'analyse pour une nouvelle génération de colonnes de chromatographie à analyse rapide.

  Chromatographic conditions; column: described above, phase: water/acetonitrile （3/7,v/v）, flow rate: described above, temperature: 40 ℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL（XR-ODS）, 10μL（VP-ODS）.
  Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.

• L'échantillonneur automatique prominence sil - 20A permet une avance ultra - rapide de 10 µl en 10 secondes.

  Chromatographic conditions; Couleur: Shim - Pack xr - ODS (3mm I.D. × 30) mm, 2.2μm）, phase: water/acetonitrile（4/6 to 2/8 in 0.4 min, convex gradient）, flow rate: 3mL/min, temperature: 80 ℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL（each 800 nm ol）,.0.1 min delayed injection.
  Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.

• Prend en charge l'analyse à haute température jusqu'à 85 ℃.
  Température et analyse rapide: lorsque la température de la colonne augmente, le nombre de plateaux théoriques augmente, l'efficacité de la colonne augmente et la pression de la colonne diminue.

  Chromatographic conditions;
  Phase: eau / acétonitrile (3 / 7, V / v),
  detection: absorbance at 245 nm.
  Peaks: 1: acétophénone 2: phénylacétone 3: phénylbutanone 4: phénylpentanone 5: phénylhexanone 6: phénylheptanone 7: phényloctanone

  Effet de la température sur les composés chimiques: l'analyse à haute température est efficace pour réduire la pression de la colonne, mais les températures élevées entraînent une détérioration de la colonne de chromatographie, entraînent la décomposition de l'échantillon et d'autres insuffisances nécessitent une attention particulière lors de l'application. L'analyse à haute température n'est utilisée qu'en tant qu'aide à l'analyse rapide.

• Les détecteurs à haute fréquence d'échantillonnage permettent une acquisition rapide des données sans perte d'information.
  
• Un logiciel spécialisé de conversion de méthodes chromatographiques rend la conversion des conditions chromatographiques conventionnelles en conditions UFLC simple et facile, garantissant la polyvalence des méthodes d'analyse.

Reproductibilité des analyses rapides
Il est plus difficile d'obtenir une reproductibilité du temps de rétention des composants en séparation rapide qu'en analyse conventionnelle. La reproductibilité du temps de rétention (RSD) et la racine carrée du temps augmentent inversement, ce qui nécessite des performances d'alimentation plus rigoureuses que les analyses conventionnelles. Prominence UFLC peut garantir une capacité d'alimentation avec une réponse contrôlée de 0,1 seconde lors de l'alimentation en gradient, une résolution d'alimentation de 3 nl / min et une reproductibilité du temps de rétention extrêmement supérieure.

Qu'est - ce qu'un flux élevé
L'objectif de la chromatographie liquide rapide est un débit élevé, c'est - à - dire qu'un plus grand nombre d'échantillons sont analysés chaque jour ou chaque heure. Pour atteindre un débit élevé, non seulement le temps d'analyse des échantillons individuels doit être réduit, mais l'ensemble du cycle d'échantillonnage et le temps d'analyse doivent également être optimisés. La poursuite de la rapidité vise non seulement à réduire le temps d'analyse, mais aussi à raccourcir le cycle d'analyse. La vitesse d'injection de l'échantillon de prominence UFLC est de 10 secondes, ce qui permet de réduire considérablement la période d'analyse.

Exemples d'applications

Analyse UFLC des acides aminés dérivés du PTC

Il existe deux méthodes de détection pour l'analyse des acides aminés, l'une est une méthode de dérivation post - colonne après séparation à l'aide d'une colonne de chromatographie échangeuse d'ions et une méthode de dérivation post - colonne après dérivation et une autre est une méthode de dérivation pré - colonne après séparation à l'aide d'une colonne de chromatographie en phase inverse. Considéré du point de vue de l'analyse rapide, la méthode biochimique de diffraction pré - colonne fonctionne bien. Ici, l'analyse des acides aminés a été réalisée en moins de temps avec le Shim - Pack xr - 0ds.
La dérivation est réalisée à l'aide d'isothiocyanate de phényle. Une heure est nécessaire pour la dérivation post - colonne et une analyse de 25 minutes peut être réduite à 4 minutes pour la dérivation pré - colonne en utilisant une colonne chromatographique conventionnelle.

Analyse UFLC des pigments

Les colorants ajoutés aux aliments ont des composés synthétiques et des composés naturels, qui sont hautement solubles dans l'eau et sont analysés par HPLC. Mais lorsque plusieurs Pigments sont combinés, l'analyse simultanée prend beaucoup de temps. On a représenté ici un example d'analyse simultanée des pigments par LC ultra - rapide Shim - Pack xr - ODS. Les résultats de l'analyse simultanée des 12 Pigments constitutifs sont présentés sur le chromatogramme suivant. Le temps d'analyse requis est de 50 minutes avec un LC classique, et environ 6 minutes avec un LC ultra - rapide.

Analyse UFLC des hydrocarbures aromatiques polycycliques (HAP)

Les Hap sont des produits chimiques qui évaluent le degré de pollution de l'environnement atmosphérique par les gaz d'échappement, tels que les véhicules. Les Hap sont fortement cancérogènes, de sorte que la surveillance atmosphérique de ces substances est un élément de détermination important. Les PAH montrent une forte Fluorescence et peuvent être analysés avec une grande sensibilité à l'aide d'un détecteur de fluorescence.
Pour l'analyse de ces 10 Hap, sans perte d'état de séparation, l'UFLC a réalisé une analyse accélérée (temps d'analyse 5 minutes) d'un facteur 10 par rapport à la LC classique (temps d'analyse 50 minutes).