Kit de détection ELISA Molecule 1 (Kim - 1) pour lésions rénales chez le rat

I. informations sur le produit:

Nom du produit:Kit de détection ELISA Molecule 1 (Kim - 1) pour lésions rénales chez le rat

Numéro de produit: yxr31104

Numéro de lot du produit: voir l'étiquette du produit pour plus de détails

Validité: 6 mois

Condition de conservation: 2 - 8℃

Utilisation du produit:

Ce kit est utilisé pour la détection quantitative in vitro du contenu de la molécule de lésion rénale de rat 1 (Kim - 1) dans des échantillons de sérum, de plasma, d'homogénats de tissus et de liquides associés.

II. Principe de détection:

Le kit utilise le test d'immunoadsorption enzymatique (ELISA) par la méthode sandwich en une étape à deux anticorps. Les paquets qui ont été préalablement emballés avec des anticorps capturés par la molécule de lésion rénale de rat 1 (Kim - 1) ont été microporeux, puis les échantillons, les étalons, les anticorps de détection marqués HRP ont été ajoutés à leur tour, incubés et lavés de fond en comble. La couleur est révélée avec le substrat TMB qui se transforme en bleu sous la catalyse de la peroxydase et en jaune final sous l'action de l'acide. La nuance de couleur et la molécule de lésion rénale de rat 1 (Kim - 1) dans l'échantillon étaient positivement corrélées. La concentration de l'échantillon a été calculée en déterminant l'Absorbance (valeur OD) à une longueur d'onde de 450 nm à l'aide d'un étalon enzymatique.

Iii. Méthodes de collecte, de traitement et de conservation des échantillons:

Ce qui suit n'est qu'un guide général énumérant les prélèvements d'échantillons. L'azide de sodium ne doit pas être utilisé comme agent de conservation lors de la collecte de tous les échantillons.

1. Sérum: utilisez un tube à essai exempt de pyrogène et d'endotoxines, évitez toute stimulation cellulaire pendant l'opération, laissez les échantillons de sang total recueillis dans le tube de séparation du sérum à température ambiante pendant 2 heures ou 4 ° C pendant la nuit, puis centrifugez 1000 × g pendant 20 minutes, prenez le surnageant est correct, ou placez le surnageant à - 20 ° C ou - 80 ° C pour la conservation, mais évitez la congélation et la dégel répétées.

2. Plasma: les spécimens sont prélevés avec de l'EDTA ou de l'héparine comme anticoagulant et centrifugés à 2 - 8 ℃ 1000 × g pendant 15 minutes dans les 30 minutes suivant la collecte, le surnageant est détectable ou le surnageant est placé à - 20 ℃ ou - 80 ℃ pour la conservation, mais la congélation répétée et la dégel doivent être évités.

3.cell culture Clearing ou d'autres spécimens biologiques: s'il vous plaît centrifuger 1000 × g pendant 20 minutes, retirer le Clearing peut être détecté, ou placer le Clearing à - 20 ℃ ou - 80 ℃ pour la conservation, mais devrait éviter la congélation répétée et la dégel.

Homogénat de tissus: rincer les tissus avec du PBS pré - refroidi (0,01 M, pH = 7,4) pour éliminer le sang résiduel (les globules rouges lysés dans l'homogénat peuvent affecter les résultats de la mesure), après avoir pesé le tissu - tissu est coupé en morceaux. Tissu cisaillé avec le volume correspondant de PBS (généralement dans un rapport poids / volume de 1: 9, par exemple, un échantillon de tissu de 1 G correspond à 9 ml de PBS, le volume spécifique peut être ajusté de manière appropriée en fonction des besoins expérimentaux et bien documenté. Inhibiteur de protéase recommandé dans le PBS) Ajouter dans un homogénateur en verre, bien broyer sur la glace. Pour lyser davantage les cellules tissulaires, l'homogénat peut être soumis à une fragmentation par ultrasons ou à des dégel - gels répétés. Enfin, l'homogénat est centrifugé à 5000 × g pendant 5 ~ 10 minutes pour obtenir un test de nettoyage.

Remarque: l'hémolyse du spécimen peut affecter le résultat final du test, il est donc déconseillé de procéder à ce test pour les spécimens hémolytiques.

5. Conservation: si l'échantillon n'est pas détecté à temps après la collecte, s'il vous plaît diviser l'ensemble selon une dose unique, conserver la congélation à - 20 ℃, éviter la congélation et la dégel répétées, décongeler à température ambiante et s'assurer que l'échantillon est uniformément plein et dégelé.

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