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Boîte de test médical Ricketts

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Vue d'ensemble

Kit de test d'examen Ricketts $N $n ce kit conçoit des amorces spécifiques et des sondes de balises moléculaires pour ce gène, la réaction de PCR pouvant être effectuée et libérer un signal de fluorescence dans le cas où l'échantillon à examiner contient cet ADN. La surveillance en temps réel et la sortie des signaux de fluorescence correspondants dans le processus de PCR sont réalisées à l'aide d'instruments permettant une analyse qualitative des résultats de détection.

Détails du produit

Boîte de test médical Ricketts

Spécifications d'emballage] 25T/boîte & 50T/boîte

Boîte de test médical Ricketts

[principe d'inspection]

Ce kit conçoit des amorces spécifiques et des sondes de balises moléculaires pour ce gène, contenant ceADNDans le cas,la PCRLa réaction est réalisée et libère un signal de fluorescence. Utilisation d'instruments pairela PCRLe signal de fluorescence correspondant pendant le processus est surveillé et délivré en temps réel, permettant une analyse qualitative des résultats de détection.

Numéro

composition

25T/boîte

50T/boîte

1

la PCRLiquide de réaction

500μL × 1Tubes

1000μL × 1Tubes

2

Contrôle positif

40 μL × 1Tubes

40 μL × 1Tubes

3

Contrôle négatif

40 μL × 1Tubes

40 μL × 1Tubes

4

Mode d'emploi

1part

1part

[conditions de stockage et date d'expiration]Éviter la lumière-20℃Conservation suivante pour éviter le gel - dégel répété, date d'expiration12Mois.

ABISérie,Bio-RadSérie,Agilent Stratagene MXSérie,Roche LightCycler R480Et,Cepheid SmartCyclerEt,Rotor-gèneSérie, série Hangzhou Bozhi et autres multi - canal en temps réel Fluorescence quantificationla PCRLe mètre.

[demande d'échantillon]

1. Si testé avec des spécimens originaux. Les spécimens (liquide céphalo - rachidien du patient, sang veineux, liquide articulaire; Sang veineux d'animaux malades, lait; colonies, mycélium, etc.) doivent être des spécimens originaux fraîchement prélevés et mis en suspension à l'aide d'eau doublement stérilisée ou de sérum physiologique stérilisé.

2. Si nécessaire après bactériophilisationla PCRPour la détection, le spécimen original doit alors être bactériophilisé à l'aide d'un liquide bactériophilisant sélectif.

3. Si le spécimen n'est pas immédiatement détectable après la collecte, il peut être placé2à8℃Conserver au réfrigérateur toute la nuit; Pour une conservation à long terme, les spécimens doivent être congelés-20℃~-80℃。

[méthode d'inspection]

1. Préparation des réactifs (zone de préparation des réactifs)

1) Retirer le kit du réfrigérateur,Retirer les réactifs nécessaires à l'expérience du kit, bien fondre le mélange et centrifuger instantanément pour éliminer le liquide de fixation de la paroi du tube.

2) Comptabiliser le nombre de réactions nécessaires pour une expérience (n), et calcule les quantités des différents réactifs nécessaires au moment de l'expérience selon le système réactionnel présenté dans le tableau ci - dessous.

n =Nombre de contrôles négatifs (1T) etLe +Nombre de contrôles positifs (1T) etLe +Réserve d'erreur (1T) etLe +Nombre d'échantillons

Tableau de formulation de monoreflux(Chaque) et

la PCRLiquide réactionnel (UNGEnzymes etTaqEnzymes)

20μL

3), ajouter les réactifs ci - dessus dans le tube de centrifugation stérile, centrifuger instantanément après un mélange suffisant. selon20 μL/Quantité de tube fractionner le réactif àla PCRLe tube de réaction.

4) couvercle serréla PCRAprès le couvercle du tube de réaction serala PCRLe tube réactionnel est transféré dans la zone de traitement des échantillons. Le réactif restant est remis-20℃Les réfrigérateurs suivants sont conservés congelés.

2.Préparation des échantillons (zone de traitement des échantillons)

UtiliserADN/ARNKit d'extraction l'acide nucléique peut être extrait, l'opération spécifique fonctionne selon ses instructions de Kit

3.Additions

Préparé ci - dessusla PCRLes spécimens traités à mesurer sont ajoutés séparément dans le tube d'échantillon réactionnelADNChaque5 μlLe volume final25 μl/unitéTube, bien couvertla PCRCentrifugation instantanée à basse vitesse après mélange du couvercle réactionnel, transfert àla PCRSur les instruments. Contrôles négatifs et soins positifs5 μLUn témoin négatif ou un témoin positif apporté par le kit, le volume final étant25 μl/unitéTube, bien couvertla PCRCentrifugation instantanée à basse vitesse après mélange du couvercle réactionnel, transfert àla PCRSur les instruments.

4.PCR(la PCRZone amplifiée)

1) prenez la zone de traitement des échantillons préparéela PCRTube de réaction, placé dans la quantification de fluorescence en temps réella PCRLa fente d'échantillon de l'instrument est positionnée en conséquence et l'ordre de placement est enregistré.

2) appuyez sur le tableau pour régler les paramètres liés à l'amplification des acides nucléiques de l'instrumentla PCRAmplification.

Volume de réaction

25 μL

Sélection des canaux

FAMSignal de fluorescence de tissu d'acquisition de canal

la PCR

La réaction

Conditions

étape

Conditions

Nombre de cycles

UNGtraiter

37Pour:2Minutes (min) et

1

Pré - dénaturation

95℃:3Minutes (min) et

1

la PCRAmplification

95℃Pour:5Secondes (s) et

40

55℃Pour:40Secondes (s) et

(acquisition du signal de fluorescence à la fin de cette phase)

Note:ABISérie fluorescencela PCRLe compteur n'est pas sélectionné lors du réglageROXCorrection, réglage de la sélection des groupes de trempeAucun- Oui.

[valeur de référence (plage de référence)]

1.Détermination de l'efficacité du kit:

1) Contrôles positifs: il y a typiqueSCourbe d'amplification de type ouCtValeur≤ 35- Oui.

2) contrôle négatif:CtValeur >38Ou aucunCtValeur, ligne droite ou légèrement oblique, sans période de croissance exponentielle.

2.Résultats des spécimens:

1) positif: résultats des tests de spécimensCtValeur≤ 35Ou il y a une période de croissance exponentielle significative.

2) suspect: résultats de la détection de spécimensCtLa valeur est dans35à38Dans la portée. Les spécimens doivent être testés à plusieurs reprises à ce stade, par exemple en répétant les résultats expérimentauxCtLa valeur est toujours35à38À l'intérieur de la gamme, il y a une période de croissance exponentielle marquée, alors il est jugé positif, sinon négatif.

3) négatif: résultat de la détection des spécimensCtValeur >38Ou aucunCtValeur.

[interprétation des résultats de l'inspection]

Canaux et résultats de détection

Interprétation des résultats de la détection des spécimens

FAM

Positif (Le +) et

Trouvé dans les spécimens

Négatif (-) et

Non détecté dans les spécimens

[Limites de la méthode d'inspection]

1. Des résultats faussement négatifs peuvent se produire lorsque la concentration d'acide nucléique dans l'échantillon testé est inférieure à la détection de ce kit.

2. Le mauvais fonctionnement de l'échantillon examiné lors de la collecte, du transport, du stockage et de la manipulation est facile à provoquerDNALa dégradation donne des résultats faussement négatifs.

3. La contamination croisée de l'échantillon pendant la collecte, le transport, le stockage et le traitement, il est facile d'obtenir des résultats faussement positifs.

[indicateurs de performance du produit] La limite de détection du produit est103Copies/mL, produitsCVValeur3% de- Oui.Boîte de test médical Ricketts

[précautions]

1. Les laboratoires qui utilisent ce kit doivent être gérés en stricte conformité avec les normes de gestion des laboratoires de test d'amplification génétique publiées par les parties concernées du pays;

2. Pour éviterARNDégradation, le processus de traitement des échantillons doit être0-4℃Fonctionnement dans des conditions et immédiatement après l'achèvement de l'expérience pour la détection; Les consommables de l'appareil utilisés lors du traitement des échantillons doivent être traités sans ribozyme;

3. Les articles de chaque zone sont dédiés et ne doivent pas être croisés pour éviter la contamination; La table de travail doit être nettoyée immédiatement après la fin de la détection;

4. Lors de l'aspiration du liquide réactionnel, essayez d'éviter la formation de bulles d'air; hautla PCR Avant l'appareil, il faut prendre soin de vérifier que chaque tube de réaction est bien fermé, afin de ne pas provoquer d'inexactitude dans les résultats de l'évaporation du liquide;

5. Kit tous les réactifs doivent être bien fondus et mélangés à la température normale avant utilisation et doivent être centrifugés instantanément;

6. Les témoins négatifs et positifs contenus dans le kit doivent tous être transférés dans la zone de préparation des spécimens et entreposés séparément avant la première utilisation;

7. Pour éviter l'interférence fluorescente, le contact direct avec les mains nues devrait être évitéla PCRTube de réaction et doit être évitée dansla PCRTout Marquage sur le tube de réaction;

8. La tête d'aspiration utilisée dans le processus de détection, devrait frapper directement à Sheng10%Acide hypochloreux à l'intérieur du cylindre de déchets, la détection se terminela PCR Tube de réaction, couvercle ouvert et jeté après stérilisation avec d'autres objets abandonnés; Les bancs de travail et toutes sortes de fournitures expérimentales doivent être utilisés régulièrement 10%Acide hypochloreux,75%L'alcool ou les lampes UV pour la désinfection;

Les paramètres relatifs à l'amplification instrumentale doivent être fixés conformément aux exigences pertinentes de la présente description; Les réactifs de numéros de lot différents ne peuvent pas être mélangés; Et utiliser pendant la période de validité.Produits uniquement pour la recherche scientifique- Oui.