iQue Screener PLUS

Le système de criblage de cellules en suspension / microbilles à très haut débit de la série ique screener de la société américaine inlicyt est le produit de poussée principal de la société inlicyt, qui analyse les cellules en suspension et les microbilles avec le principe de flux, est un cribleur à haute connotation qui peut analyser des plaques de 96 puits et 384 puits, des plaques de 1536 puits de type HD, avec une vitesse de détection et un logiciel d'analyse complet et complet. La gamme ique screener est disponible en trois modèles: ique screener, ique screener HD, ique SCREENER

La vraie solution - - - -Cellules en suspension/Criblage à haut débit de microbilles
Le dépistage à haute connotation facilite le développement de médicaments en fournissant des données riches qui deviennent un processus régulier dans le processus de recherche et développement de médicaments. Cependant, le criblage à haute connotation se limite aux cellules plaquées et ne peut pas atteindre plus de domaines de recherche importants, les États - Unis inlicyt lance le système de criblage ique screener pour analyser les cellules en suspension et les microbilles, fournissant des données expérimentales rapides à haute connotation pour les expériences de criblage d'aujourd'hui.

• Augmenter l'efficacité du développement de médicaments à petites et moyennes molécules dans les expériences de criblage phénotypique par criblage fonctionnel à haut débit des cellules en suspension;
• De meilleures informations sur les hybridomes sont obtenues à partir des études de développement d'anticorps en acquérant simultanément des données sur la liaison antigénique et les réactions croisées, et les cibles de dépistage restent toutes dans leur configuration naturelle.
• Les résultats prédits qui garantissent une plus grande toxicité in vitro peuvent être obtenus grâce à une conception expérimentale entièrement automatisée et multi - paramètres qui analyse les propriétés de santé de milliers de cellules indépendantes par seconde.

Solutions intégrées

Des solutions de criblage intégrant des instruments, des logiciels et des kits permettent aux chercheurs d'analyser les cellules en suspension avec la rapidité et l'efficacité du criblage.
iQue^TMécranComment opérer
iQue^TMLe système de criblage est une plate - forme de criblage à haut débit, basée sur la cytométrie de flux, qui transporte un flux continu d'échantillons vers un détecteur, qui recueille plusieurs lectures à partir d'une seule cellule. Cette méthode d'échantillonnage unique permet de transporter des cellules ou d'autres inclusions dans un cytomètre en flux par une méthode continue, espacée par air, à partir de microplaques pour assurer un suivi précis et réduire la contamination croisée. Les résultats de la détection de la fin zui ne prennent que quelques minutes, pas des heures, et peuvent former des résultats expérimentaux basés sur des microplaques sous la forme de cartes thermiques faciles à déchiffrer.


iQue^TMécranCaractéristiques
Une plus grande efficacité expérimentale

• Filtrez votre bibliothèque en quelques jours, pas en mois
• Le volume d'échantillon peut être aussi bas que 1 µl, réduisant le coût des réactifs
• Peut exécuter une plaque de 96 puits en 3min et une plaque de 384 puits en 12min
• Peut être intégré avec bras robotisé et autres unités de travail automatiques
• Compatible avec les cellules, microbilles et leurs mélanges

Plus de pertinence physiologique

• Analyse possible de mélanges de différentes cellules, lecture de données cellulaires individuelles
• Cribler les cellules en suspension et cribler les cibles de conformation naturelle
• Collecte de lectures multiples avec quatre canaux fluorescents
• Taille et granulométrie des cibles non marquées détectables

Résultats expérimentaux plus stables

• Une gamme de détection de 6 ordres de grandeur fournit des résultats expérimentaux sensibles et fiables
• 10 000 cellules indépendantes pour de meilleures statistiques à l'intérieur de chaque puits

Plus facile à utiliser

• Support pour un flux de travail complet
• Analyser la dynamique en temps réel
• Générer des rapports instantanés
• Kit spécifique à l'application plug - and - play

Ultra haut débit, votre aide puissante
Application
Développement d'anticorps (Découverte d'anticorps) et

• Dépistage des hybridomes (hybridoma screening)
• Détermination de la réactivité croisée (Determining Species Cross - Reactivity)
• Évaluation de la productivité des lignées cellulaires sécrétrices d'anticorps
• Screening a human Germline IgG Library (bibliothèque d'IgG germelines humaines)

Essais de toxicité in vitro (Toxicologie in vitro) et

• Quantification de l'induction des micronoyaux
• Détection des événements apoptotiques (Detection of Apoptotic Events)

Filtre phénotypique (phenotypic screening)) et

• Screening for compounds that induce Myeloid Progenitor Cell Differentiation (dépistage des composés qui induisent la différenciation des cellules progénitrices de la moelle osseuse)
• GFP expression Screening dans les lignes cellulaires multiples
  

Développement d'anticorps
Le système de criblage d'inlicyt, combiné au kit multicyt, peut détecter simultanément plusieurs paramètres finaux, contribuant à la discrimination et à la description à haut débit des anticorps du clone curry. En outre, la capacité d'appliquer des cellules en suspension pour l'analyse permet aux substances cibles d'être criblées dans leur configuration naturelle, ce qui permet d'obtenir de meilleures informations sur les hybridomes.
Dépistage des hybridomes
L'utilisation combinée du système de criblage inlicyt et du kit Screening multicyt hybridoma permet d'optimiser l'ensemble du processus expérimental. Cette méthode expérimentale de mélange puis de détection élimine de nombreuses étapes existantes dans le tamis primaire et permet d'évaluer simultanément les propriétés de liaison et de réaction croisée des antigènes.

Les cellules cibles (non marquées) et les cellules témoins (marquées à la calcéine) sont mélangées et distribuées dans des microplaques. Les anticorps testés dans la Banque d'hybridomes sont ensuite ajoutés et incubés avec les anticorps détectés fluorescents rouges. Les microplaques ont ensuite été analysées avec ique tout en détectant la liaison des anticorps et des cellules cibles, population de cellules témoins, dans la suspension d'hybridomes. Et la liaison des cellules témoins a montré une réactivité croisée et une liaison non spécifique, fournissant un contrôle interne pour les expériences de chaque puits.

Des expériences sur des cellules non traitées ont permis de réaliser un criblage d'anticorps sur des épitopes conformationnels, ce qui n'est pas possible avec Elisa et d'autres expériences sur des protéines purifiées, car les antigènes sont souvent désactivés par la perte de pli au cours de la purification.
Déterminer la réactivité croisée entre les lignées
Les multiples fonctions du système de criblage inlicyt peuvent intégrer l'activité réactive interlignée des anticorps dans le processus de criblage de la recherche et du développement. Le kit encoder multicyt cell permet de détecter simultanément cinq lignées cellulaires par puits. L'expérience a permis d'identifier facilement des clones hautement appropriés qui réagissent de manière croisée avec les antigènes cibles de plusieurs lignées germinales, et ces clones sont des candidats plus solides pour la recherche préclinique.

Les lignées cellulaires parentales et celles génétiquement modifiées pour exprimer des récepteurs chez la souris, le rat, le Macaque et l'homme ont été marquées séparément et mélangées dans un seul échantillon. Parmi celles - ci, les lignées cellulaires parentales non transfectées servent de contrôles de liaison négatifs pour chaque échantillon. Les échantillons sont ajoutés à des microplaques 96 puits pour des expériences de fixation d'anticorps, puis successivement des anticorps de détection primaire et des anticorps de détection secondaire. Après l'expérience, les lignées cellulaires de chaque échantillon ont été confirmées et évaluées individuellement, générant des courbes d'affinité de liaison. Cette expérience a été réalisée dans 4 microplaques 96 puits et a donné 12 anticorps dans 4 conditions expérimentales différentes, 8 doses de courbes, le tout en 1 heure.
Évaluer l'efficacité de la production de lignées cellulaires sécrétrices d'anticorps
Les multiples fonctions du système de criblage inlicyt et la co - utilisation du kit Multi - cyt IgG count and Capture Kit augmentent les chances de réussite de la confirmation de lignées cellulaires à haute productivité. Dans une seule expérience, le niveau d'anticorps d'une seule cellule est obtenu par détection simultanée de la quantité d'anticorps sécrétés, du nombre de cellules et de l'activité cellulaire.

Les anticorps sécrétés dans l'échantillon se lient aux microbilles de capture, détectées par un réactif de détection marqué Fluorescent. Un colorant qui marque spécifiquement les cellules inactives est ajouté pour déterminer le rapport entre les cellules actives et inactives. Les microplaques sont analysées et trois lectures sont enregistrées simultanément pour chaque échantillon: le niveau d'anticorps sécrété, le nombre total de cellules et le pourcentage de cellules inactives. Il est ainsi facile de déterminer le niveau d'anticorps sécrété par chaque cellule.
Dépistage des cellules germinales humainesIgGBibliothèque
Le système de criblage inlicyt permet le développement de méthodes de criblage adaptées aux antigènes exprimés à la surface des cellules et capables de détecter des paramètres multiples. La société fabrus Inc. (San Diego, Californie) a développé une banque de cellules germinales humaines FAB et a effectué un criblage direct d'environ 10 000 IgG pour les antigènes cibles à la surface des cellules de mammifères. Elle est réalisée à l'aide d'un système de criblage htfc permettant le criblage des IgG cibles dans leur environnement naturel à la surface de la membrane des cellules lipidiques.

Les cellules sont brièvement co - transfectées avec la GFP et l'antigène cible, puis chaque groupe, exprimant l'un des trois antigènes cibles différents, est marqué avec une certaine quantité de calcéine comme colorant de codage cellulaire. Les cellules marquées transfectées sont physiquement mélangées en un seul échantillon, divisé en microplaques pour le criblage des banques d'IgG ciblant ces échantillons. Le signal de la GFP est utilisé pour confirmer si les cellules expriment l'antigène, et le colorant de code cellulaire permet aux trois cellules d'expérimenter simultanément pour confirmer et analyser chaque cible. Les cellules négatives à la GFP agissent comme contrôles négatifs internes qui n'expriment pas l'antigène cible. Les IgG fixées sur les cellules ont été testées secondaires par fluorescence et chaque population colorée a été évaluée.
Essais de toxicité in vitro
Le système de criblage d'intllicyt analyse les performances de plusieurs milliers de cellules en solution en une seconde, en utilisant le flux de travail simplifié entièrement automatisé du kit multicyt pour fournir une voie de criblage précoce concernant la génotoxicité pour le développement de médicaments.
Quantification de l'induction micronucléaire
Des expériences de micronoyaux in vitro ont été menées sur le système de criblage d'inlicyt, et l'utilisation du kit Microflow in vitro de litron (Rochester, NY) a permis de détecter de manière fiable les altérations des micronoyaux des cellules en suspension et des cellules plaquées causées par des composés génotoxiques. 384 microplaques combinées à l'analyse automatisée, les expériences qui prenaient auparavant 16 heures peuvent maintenant être terminées en seulement 30 minutes, ce qui permet aux expériences d'induction de micronoyaux d'atteindre des débits élevés au niveau du criblage.
Détection des événements apoptotiques
Les systèmes, logiciels et kits d'application d'inlicyt sont optimisés et confirmés pour l'identification et la caractérisation de multiples paramètres apoptotiques. Des indicateurs tels que Caspase 3, annexine V, dépolarisation mitochondriale, activité cellulaire et nombre de cellules ont été surveillés simultanément ou de différentes manières combinées pour obtenir une meilleure corrélation entre les paramètres et un diagramme plus complet de l'évolution de l'apoptose. Des mélanges cellulaires complexes peuvent également être surveillés pour différentes efficacités différentielles.

Filtre phénotypique
Criblage de composés induisant la différenciation des cellules progénitrices de la moelle osseuse
Le système de criblage inlicyt peut cribler les composés biologiquement pertinents qui surmontent la stagnation de la différenciation des progéniteurs de la promoelle osseuse et peut facilement identifier les composés qui stimulent la différenciation des cellules souches tout en éliminant ceux qui présentent une Cytotoxicité.

La lignée cellulaire est issue de souris génétiquement modifiées exprimant la GFP sous le contrôle d'un promoteur: les cellules différenciées expriment la GFP (GFP +) et les cellules indifférenciées n'expriment pas la GFP (GFP -). Dépistage simultané de l'activité cellulaire, du nombre de cellules et de la fluorescence verte sous l'action de 350 000 composés. En mesurant la diffusion vers l'avant, la diffusion latérale et le nombre de cellules dans chaque puits, les composés toxiques peuvent être identifiés sans colorant actif et la GFP + est déterminée simultanément. Les cartes thermiques des microplaques permettent d'étudier simultanément les composés inducteurs de différenciation (représentés par des cellules GFP positives) (GFP + plaque), la Cytotoxicité (représentée par la perte de cellules) et les rapports contenant plusieurs paramètres (créés pour définir les critères de dépistage).
De lignées cellulaires multiplesGFPFiltre d'expression
Compatible avec de nombreux modèles GFP connus, le système de criblage d'inlicyt permet l'analyse phénotypique de groupes à haut débit sur des cellules suspendues et collées. Les cellules exprimant la GFP dans la population de cellules transfectées temporairement peuvent être déterminées et quantifiées.

Le processus de dépistage phénotypique simplifié des groupes permet d'analyser plusieurs paramètres en continu pour obtenir plus de données (par exemple, la signalisation GFP des cellules vivantes) ou en parallèle en tant que point final unique (pourcentage de survie cellulaire et pourcentage d'expression cellulaire).

Pour chaque échantillon de microplaques, les données multiples peuvent produire des informations plus biologiquement pertinentes pour l'évaluation des données. Expérience triple (TRIPLICATE) sur cellules HepG2 avec le réactif de transfection lipofectamine (lf2k).