Dans la recherche en neurosciences, des modèles animaux stables et fiables sont la pierre angulaire de l'exploration des mécanismes vitaux et de la validation des stratégies thérapeutiques. La craniotomie chez la souris en tant que technologie de base pour la construction de nombreux modèles de recherche en sciences du cerveau, la normalisation et la précision de son fonctionnement sont essentielles. Une intervention chirurgicale réussie minimise non seulement les dommages causés aux animaux, mais est également essentielle pour garantir la précision et la répétabilité des données expérimentales ultérieures.

La maîtrise de la craniotomie est inséparable d'une compréhension approfondie de l'anatomie du cerveau et d'un martelage répété de techniques de manipulation délicates. En pratique, de nombreux chercheurs sont souvent confrontés aux problèmes typiques suivants:

✅ Comment broyer le crâne en toute sécurité pour s'assurer que le tissu cérébral est intact et sans perte?

✅ Comment équilibrer l'intensité de la fixation avec l'intégrité du champ visuel d'imagerie lors de la fixation d'une lame de fenêtre crânienne?

✅ Manipulation aseptique peropératoire vs soins post - opératoires aux animaux, quels sont les détails à prendre en compte?

Cet article s'articulera autour du processus classique de craniotomie chez la souris, en peignant systématiquement l'approche de base de la technique par une démonstration claire des étapes à analyser avec les points clés. En tant que premier article de « double photon Fluorescence Imaging Mouse Preparatory surgery», cet article vise à aider les lecteurs à tasser les bases de la chirurgie. À l'avenir, nous détaillerons également d'autres opérations chirurgicales délicates telles que l'implantation de lentilles Grin, la Fenestration de la moelle épinière, la combinaison de deux photons et d'implantation d'électrodes EEG, pour vous accompagner dans votre cheminement scientifique.

　　Conseils chaleureux:Compte tenu de vos sentiments de visualisation, nous avons traité en douceur une partie de l'image chirurgicale, alors soyez assuré de regarder.

　　

　　PARTIE 01Préparation préopératoire

1. Instruments chirurgicaux: deux pinces fines, une mini - pelle à gratter à double tête, une cisaille à ressort.

2. Consommables expérimentaux: préparer les consommables nécessaires à l'expérience et la solution saline physiologique (1% de Ceftriaxone sodique).

3. Désinfection des instruments: tous les instruments ou implants utilisés en chirurgie doivent être désinfectés avant l'utilisation, peuvent être désinfectés avec de l'éthanol à 75% et peuvent être autoclavés régulièrement.

4. Désinfection de la table d'opération: la table d'opération est désinfectée par essuyage à l'éthanol à 75% avant utilisation, la table d'opération doit être recouverte d'un chiffon stérile, d'un tampon absorbant propre ou d'une serviette, ces matériaux doivent être remplacés après chaque opération.

　　PARTIE 02Anesthésie, immobilisation

1. Placez la souris dans le compartiment d'anesthésie pour l'anesthésie induite, le débit de gaz et l'échelle d'anesthésie sont réglés selon l'appareil à gaz du laboratoire. Lorsque les souris ont présenté un ralentissement significatif de la respiration et une Relaxation des membres, cela indique que la souris est entrée sous anesthésie.

2.fixez la souris anesthésiée au stéréoposateur cérébral et maintenez l'anesthésie en prenant soin d'observer la respiration de la souris à tout moment pendant la procédure.

　　PARTIE 03Épilation des cheveux

1. Appliquer le baume oculaire érythromycine uniformément sur l'œil de la souris, la quantité doit couvrir complètement l'œil de la souris, de sorte que l'œil n'est pas exposé.

2. Utilisez un coton - tige médical pour tremper dans la crème d'épilation, appliquez uniformément sur la racine des cheveux dans le sens inverse de la croissance des cheveux, essuyez les cheveux de la tête après environ 2 minutes avec un coton - tige.

3. Utilisez un coton - tige médical pour tremper dans la saumure physiologique et nettoyer la crème d'épilation résiduelle sur la tête de la souris.

4. Utilisez l'essuyage Iodophor pour nettoyer la peau qui a été enlevée.

PARTIE 04Exposer et nettoyer le crâne

1. Utilisez une coupe à ressort pour couper le cuir chevelu.

2. Enlevez toute la muqueuse du crâne exposé et l'excès de graisse aux deux jonctions musculaires.

3. Utilisez une Mini pelle à gratter à double tête pour gratter les muqueuses résiduelles de la surface du crâne, le tissu conjonctif, etc.

4. Tenir les boules de lavage d'oreille et souffler la surface du crâne à sec complet.

　　PARTIE 05Craniotomie

1. Avec le trou d'injection virale ou le site de localisation comme centre circulaire, placez une lame circulaire de spécification appropriée sur la surface du crâne avec une pince fine.

2. Tournez la vitesse de perçage crânien à la vitesse inférieure, après avoir poli un tour le long de la taille de la lame, utilisez une boule de lavage d'oreille pour souffler doucement les débris, répétez cette opération jusqu'à ce que la plage de ponçage soit complètement conforme à la taille de la lame, puis ajustez la vitesse de rotation à moyenne et haute gamme, continuez le ponçage.

3. Lorsque des fissures apparaissent dans le crâne à poncer, tournez la vitesse de perçage crânien à la vitesse inférieure, continuez à poncer et Répétez l'Opération jusqu'à ce que toute la fenêtre crânienne soit complètement cassée.

4. Tenir une pince fine pour dévoiler lentement le morceau de crâne.

　　PARTIE 06Ramasser les copeaux d'os cassés

Utilisez une pince fine pour aiguiller du côté de la fenêtre crânienne et sélectionnez délicatement les morceaux d'os cassés environnants, répétez l'Opération jusqu'à ce que la fenêtre crânienne soit complètement libre de débris.

PARTIE 07Installation de lames de verre

1. Utilisez une pince fine pour placer délicatement le clip de lame lavé sur le tissu cérébral exposé; Appuyez doucement sur la lame à l'aide d'une pince à épiler de sorte que la lame s'adapte fermement à la surface crânienne poncée et s'enfonce sous le crâne; Voir s'il y a des bulles sous la lame sous le microscope in vitro, s'il y a des bulles, ajoutez goutte à goutte une solution saline physiologique après avoir découvert la lame et Répétez cette opération jusqu'à ce qu'il n'y ait plus de bulles.

2. Utilisez la pointe de papier absorbant l'humidité pour aspirer l'excès de liquide qui suinte à l'extérieur de la lame, utilisez une boule de lavage d'oreille pour sécher doucement la surface du crâne dans l'ordre de l'extérieur vers l'intérieur, Trempez une petite quantité de colle de tissu biologique avec une petite brosse à poils et appliquez sur la peau marginale, le crâne entier et le bord de la fenêtre du crâne.

3. Après avoir attendu que la colle de tissu biologique sèche à travers, Trempez la colle 406 avec le bâton de revêtement dentaire, la portée d'application est la même, attendez que la colle 406 sèche.

4. Utilisez la pointe de papier absorbant l'humidité pour tremper le mélange 502 avec du ciment dentaire, une petite quantité appliquée plusieurs fois sur le bord de la fenêtre crânienne, tout au long de l'opération pour laisser couler la colle au centre de la lame.

PARTIE 08Installation des pièces de tête

1. Utilisez la colle 502 pour dissoudre le ciment dentaire mélangé, faites une fine couverture uniforme du crâne exposé, fermez complètement le crâne exposé et installez la pièce de tête lorsque le ciment dentaire n'est pas sec.

2. Remplissez suffisamment les lacunes ou les points faibles de connexion avec la pièce de tête avec du ciment dentaire pour renforcer la solidité de la pièce de tête.

3. Après avoir attendu que le ciment dentaire sèche, placez la souris dans un incubateur et attendez que la souris se réveille.

PARTIE 09Soins postopératoires

1. Fournir de bonnes conditions de survie pour les animaux, il est recommandé d'élever une seule cage et de disperser le fourrage à l'intérieur de la cage, d'éviter de frotter contre les pièces de tête lors de la consommation d'animaux ou de combats, ce qui entraîne un décalage du champ de vision ou une chute de La pièce de tête.

2. 1 - 7 jours après l'opération, la solution de Ceftriaxone de sodium est injectée aux animaux par voie intrapéritonéale, 1 fois par jour.