Dans le monde microscopique du Code de la vie, un appareil sophistiqué appelé électrophorèse horizontale d'agarose six - un aide les chercheurs à déchiffrer les informations moléculaires de l'ADN et de l'ARN grâce à sa capacité de séparation stable et fiable. En tant que l'un des équipements de base du laboratoire de biologie moléculaire, l'électrophorèse horizontale d'agarose assume la tâche importante d'isoler, d'identifier les molécules d'acide nucléique.

01 principe de fonctionnement: Danse moléculaire dans un champ électrique

Le principe de base de l'électrophorèse à niveau d'agarose repose sur la synergie de l'effet de charge et de l'effet de tamis moléculaire. Les molécules d'acide nucléique (ADN / ARN) sont chargées négativement en solution au - dessus de leur point isoélectrique, et lorsqu'elles sont placées dans un champ électrique, ces molécules chargées négativement se déplacent vers l'anode.

La structure réticulaire tridimensionnelle formée par le gel d'agarose joue le rôle de "tamis moléculaire". Sous l'action d'un champ électrique, les molécules d'acide nucléique de différentes tailles ont des vitesses de mobilité variables dans les pores du gel: les plus petites molécules se déplacent plus rapidement et les plus grandes plus lentement.

Cet effet de séparation permet aux chercheurs de juger de la taille moléculaire d'un fragment d'acide nucléique en fonction de sa position sur le gel et, par comparaison avec des étalons connus, de déterminer le poids moléculaire de l'échantillon à mesurer avec une vitesse de migration inversement proportionnelle au poids moléculaire relatif.

02 conception de l'instrument:

L'électrophorèse de niveau d'agarose six un intègre plusieurs innovations pratiques dans sa conception. Sa conception en pont économise efficacement la quantité de tampon utilisée tout en assurant une distribution uniforme du champ électrique. La conception transparente de type de trou de couvercle supérieur facilite à la fois la dissipation de chaleur et l'observation en temps réel de la situation d'électrophorèse pendant l'expérience.

Le système d'électrode est le composant central de l'électrophorèse, les produits Sihai utilisent un fil d'électrode en platine de pureté ≥ 99,95%, garantissant d'excellentes propriétés de conductivité et de durabilité. Le porte - électrodes est conçu pour être amovible pour faciliter le nettoyage et la réparation, prolongeant ainsi la durée de vie de l'équipement.

En termes de performance de sécurité, l'électrophorèse Sihai est équipée d'un fil de haute flexibilité et d'une conception de sécurité de coupure de courant à couvercle ouvert pour assurer la sécurité de l'opération. Le plateau de gel est équipé d'une règle fluorescente pour faciliter l'observation et l'enregistrement des résultats. Le boîtier est moulé par injection de polycarbonate, résistant aux températures élevées et ne se déforme pas, sans risque de fuite.

03 famille de produits et paramètres techniques

Plusieurs modèles d'électrophorèse horizontale en Agarose sont disponibles pour répondre à différents besoins expérimentaux. Les dimensions extérieures du type dycp - 31cn sont de 260 × 116 × 76 mm, les spécifications de la plaque de gel sont de 100 × 70 mm ou 50 × 70 mm et la capacité totale du tampon est d'environ 260 ML.

Le modèle dycp - 31dn est encore plus polyvalent et permet de fabriquer des gels de quatre tailles différentes: 120 × 120 mm (grande colle), 120 × 60 mm (large colle), 60 × 120 mm (longue colle) et 60 × 60 mm (petite colle). Ce choix multi - dimensionnel lui permet de s'adapter à une grande variété de besoins en quantités supérieures.

Le modèle dycp - 32A est un électrophorèse de taille moyenne, dimensions extérieures 300 × 162 × 110mm, spécification de la plaque de gel 160 × 100mm, capacité totale du tampon 650ml. Ce modèle utilise une électrode en platine avec une rangée d'électrodes symétriques, l'espacement des électrodes est fixé à 10cm, peut produire une tension continue stable de 0 à 150v, erreur d'uniformité de l'intensité du champ électrique ≤ 5%, assurant une séparation claire des bandes.

04 processus opérationnel: de la colle à l'imagerie

Le processus opérationnel de l'électrophorèse à niveau d'agarose commence par la préparation du gel. Peser d'abord la quantité appropriée de poudre d'agarose dans le tampon d'électrophorèse (généralement Tae ou TBE), refroidir à 50 - 60 ° c après dissolution par chauffage, verser dans un moule de colle et insérer un peigne.

Après la gélification, le peigne d'extraction forme des trous d'incrustation. Lors de l'extraction du peigne, vous devez prendre soin d'abord d'incliner doucement le côté de l'extraction, puis de l'extraire dans son ensemble, afin d'éviter de casser le trou d'incrustation. Mettre le gel dans le bain d'électrophorèse, ajouter le tampon pour immerger le gel, le niveau du liquide doit être de 1 - 2 mm au - dessus de la surface du gel.

Vient ensuite la préparation de l'échantillon et l'échantillonnage. Après mélange de l'échantillon d'acide nucléique avec le tampon échantillon supérieur, les puits d'addition sont ajoutés à l'aide d'une micropipette. Le glycérol ou le saccharose dans le tampon de l'échantillon supérieur augmente la densité de l'échantillon, ce qui permet à l'échantillon de couler dans le fond des puits de l'échantillon; Les colorants traceurs (tels que le bleu de bromophénol) sont utilisés pour indiquer le processus d'électrophorèse.

Les paramètres d'électrophorèse doivent être ajustés en fonction des besoins expérimentaux. Habituellement, la tension est réglée à 5 - 10 V / CM (longueur du gel) et le temps d'électrophorèse est de 30 à 120 minutes. Vous devez faire attention à la polarité de l'électrode lors de la connexion à l'alimentation: le trou d'addition se termine par une électrode négative et l'autre extrémité par une électrode positive.

Enfin, l'observation et l'analyse des résultats. Après la fin de l'électrophorèse, le gel doit être coloré avec un colorant d'acide nucléique tel que EB ou sybr Green, puis photographié par observation sous un système d'imagerie de Gel UV. La taille et le contenu des fragments d'acide nucléique d'un échantillon peuvent être déterminés par comparaison avec le marqueur ADN / ARN.

05 scénarios d'application: outils de base Multi - domaines

Dans la recherche génomique, l'électrophorèse horizontale d'agarose six - un est utilisée pour isoler et identifier des fragments d'ADN, révélant la structure et la fonction du génome. Le domaine du diagnostic clinique est également inséparable de cet outil. Grâce à l'électrophorèse à l'Agarose sur des échantillons de sérum, d'urine, etc., il est possible de détecter rapidement et avec précision les marqueurs de la maladie et d'améliorer le diagnostic précoce de la maladie. Dans les expériences de clonage de gènes et de construction de vecteurs, des modèles tels que dycp - 32A sont capables de vérifier l'efficacité enzymatique et l'intégrité du produit, d'assurer le succès des expériences de connexion et de transformation ultérieures et sont des « gardiens» des expériences de clonage de gènes. Dans le domaine de l'enseignement, la facilité d'utilisation et la stabilité des résultats de l'électrophorèse sixi en font un choix idéal pour les cours expérimentaux de biologie moléculaire dans les collèges et les universités, aidant les étudiants à maîtriser les principes de l'électrophorèse et les techniques expérimentales.