Colonne chromatographique WatersLes précautions d'utilisation sont les suivantes:

1, installation et connexion:

Identification du flux:

Les colonnes de chromatographie sont généralement marquées avec des flèches d'écoulement, doivent être installées correctement dans le sens de la flèche pour éviter le recul.

La ligne de connexion doit être adaptée au raccord de la colonne chromatographique pour éviter une baisse de l'efficacité de la colonne ou des fuites dues à une mauvaise adaptation.

Rinçage initial:

Avant l'installation d'une nouvelle colonne de chromatographie, il est nécessaire d'utiliser un solvant organique pur tel que l'acétonitrile ou le méthanol à faible débit (0,1 ml / min) rincer, puis augmenter progressivement le débit jusqu'au débit d'analyse de routine pour éliminer les impuretés à l'intérieur de la colonne et éviter l'entrée de bulles dans le système de détection.

2, phase fluide et équilibre

Compatibilité phase fluide:

Avant de remplacer la phase mobile, assurez - vous que la nouvelle phase mobile est compatible avec le solvant actuel à l'intérieur de la colonne de chromatographie. Si la phase mobile contient du sel tampon, il faut d'abord5 fois le volume de la colonne du mélange eau / solvant organique sont rincés et réintroduits dans la phase mobile tampon.

Évitez d'utiliser directement une forte proportion de phase organique lorsque la concentration en sel dans la phase mobile est trop élevée, au cas où le salage entraînerait un colmatage de la colonne de chromatographie.

Temps d'équilibre:

Colonne de chromatographie en phase inverse à utiliser au moinsLa phase mobile de 10 fois le volume de la colonne est équilibrée jusqu'à ce que la pression soit stabilisée par rapport à la ligne de base.

3, contrôle des conditions de fonctionnement:

Pression et débit:

Évitez les changements brusques de pression et la régulation du débit doit être effectuée lentement. Le débit doit être ajusté selon les spécifications de la colonne de chromatographie pour éviter de dépasser la colonne de chromatographie* grande pression autorisée.

Gestion de la température:

Évitez les changements de cycle de température, l'augmentation de la température de la colonne peut réduire la pression du système, mais il n'est pas approprié de réduire la pression en augmentant la température de la colonne.

Gamme de ph:

Colonne de chromatographie en phase inverse recommandéeLe pH varie de 1 à 12, mais les conditions de pH extrêmement * telles que ph ≥ 8 accélèrent l'hydrolyse de la phase de liaison et la dissolution du gel de silice, ce qui nécessite une réduction de la température d'utilisation et une réduction du temps de fonctionnement.

4, traitement des échantillons

Purification des échantillons:

Les impuretés de l'échantillon sont la principale source de contamination de la colonne de chromatographie. Extraction en phase solide recommandée (SPE) une petite colonne ou un système d'extraction par fluide supercritique (SFE) purifie l'échantillon.

échantillons à utiliserFiltration sur membrane filtrante de 0,2 μm pour assurer la compatibilité du matériau de la membrane filtrante avec le solvant de l'échantillon et éviter la dissolution de la membrane filtrante contaminant la colonne de chromatographie.

Choix du solvant:

Le solvant de l'échantillon doit être compatible avec la phase mobile et éviter la précipitation ou l'insolubilisation du solvant après l'admission. Il est recommandé de dissoudre l'échantillon à l'aide d'une phase mobile ou d'une solution moins forte que l'élution en phase mobile pour obtenir une excellente forme de crête et une sensibilité de détection.