Nistmab est un anticorps monoclonal largement caractérisé destiné à être utilisé comme étalon dans le développement de nouvelles techniques * * de caractérisation des protéines. Dans cette littérature d'application, nous utilisons supr - DSF pour obtenir les enseignements de la fluorimétrie différentielle DSE) de nistmab, les résultats de kelow étant comparés à la calorimétrie à balayage discontinu DSO. Le supr - Dse délimite deux domaines appartenant à nistab: CH2 (690 c. CH3 (830 () et FAB (94 oc) avec un degré de vaporisation élevé). De plus, les valeurs de TM mesurées sont conformes à celles rapportées dans la littérature. Ces résultats démontrent que l'application de supr - DSF permet d'obtenir facilement des informations de haute qualité sur la stabilité des protéines.

Conclusion:

Le supr - DSF de Protein stable peut être utilisé en détectant le déplacement du pic de la fluorescence endogène de la protéine et en mesurant rapidement et précisément la température de décombinaison. Les résultats montrent que supr - DSF est capable d'obtenir des températures de chaine de dissociation précises, y compris des températures de chaine de dissociation ultra - élevées (94°c) comme le domaine FAB. Ceci valide également que supr - DSF basé sur la fluorescence endogène peut obtenir des résultats cohérents avec DSC. L'avantage de tester avec une plaque 384 puits est un flux amélioré, une commodité accrue tout en réduisant la consommation de l'échantillon.

Méthode:

Le nistmab à la concentration de 1 mg / ML a été formulé dans un tampon L - Histidine à pH 6, ajouté séparément dans des microplaques LPCR 384 puits à raison de 104 l chacune. Après le fractionnement, les microplaques ont été scellées avec un film de colle transparente après centrifugation pendant 60 secondes. La procédure d'élévation continue de mélange dans supr - DSF a été réglée pour mesurer le canal de fluorescence de 150c à 105oc à une vitesse de montée en température de 10c par minute, les données obtenues pour le spectre de fluorescence, le traitement de calcul par la méthode BCM et la quantification du décalage spectral. Les données du BCM sont traitées en fonction de la température et converties en dérivée première pour analyse. La température de la chaîne de décompression est calculée à partir du pic de la dérivée. Les méthodes et les résultats de tous les échantillons sont disponibles.