La formulation d'anticorps biologiques est la base pour assurer la production, le stockage et le transport de produits stables. Le processus de développement de la formulation nécessite une approche à haut débit pour examiner de manière fiable et rapide un grand nombre de conditions de formulation afin de déterminer * La meilleure formulation et les bonnes conditions. Une méthode largement utilisée consiste à effectuer des tests de dénaturation thermique et à déduire des paramètres pertinents tels que TM et tonset pour effectuer un criblage hiérarchique des conditions de formulation et de l'effet stabilisant des excipients.

Les techniques traditionnelles de dénaturation thermique sans marquage sont soumises à des contraintes de flux telles que la concentration de l'échantillon, le volume, le coût des consommables et la vitesse de mesure, ce qui rend difficile le processus de sélection finale des formulations avec des centaines, voire des milliers de conditions potentielles.

Dans ce rapport, nous montrerons que les résultats obtenus lors du criblage des stabilisants sont en accord avec ceux obtenus avec la calorimétrie différentielle à balayage thermique: la méthode DSC, à l'aide de l'instrument supr - DSF, sur la base du paramètre de dénaturation thermique, pour l'analyse et la sélection d'une formulation de trébizumab dans 96 conditions différentes. Le criblage de la formule a été effectué dans une microplaque de 384 puits et les résultats complets ont été obtenus en moins de 1,5 heure d'utilisation. Le criblage de ce flux sonore peut être intégré dans un système automatisé de laboratoire, permettant la sélection de milliers d'échantillons par jour.

Résultats:

Les courbes de dénaturation mesurées (figures 1 et 2 à titre d'exemple) montrent deux processus de dénaturation indépendants. On a déterminé les valeurs de TM, l'Enthalpie de Van terhof (Δh) et les valeurs de tonset en effectuant un ajustement * par multiplication binaire des données de dénaturation au moyen d'un modèle à trois états standard [1], et on les a énumérées dans le tableau 1.

Le tableau répertorie également les Excipients examinés pour améliorer la stabilité des anticorps. Les résultats expérimentaux obtenus sur la base du modèle à trois états sont en accord avec les données DSC du Trastuzumab [2], et les deux ont rapporté deux valeurs de TMN autour de 700 C et 82 oc. La valeur de TM correspond à celle rapportée pour la base, en tenant compte des variations de l'échantillon et du solvant [2].

En plus des valeurs similaires de TM, les données de supr - DSF confirment que l'histidine et le tréhalose dihydraté, qui sont tous les ingrédients de la formulation de * herchiltin, n'inhibent ni n'améliorent la stabilité conformationnelle du trébizumab [3]. Ces deux points aident à démontrer la cohérence des mesures supr - DSF et la capacité des tests à haut débit.