Mode de conservation de la colonne de chromatographie échangeuse d'anions

I. spécifications de fonctionnement quotidien

1. Nettoyage et prétraitement du système

- nettoyage avant le piquetage: Assurez - vous que les lignes de chromatographie ionique, les robinets sont exempts de contaminants résiduels, en particulier pour éliminer les particules ou les réactifs chimiques laissés par les expériences préalables.

- prétraitement des échantillons: tous les échantillons doivent être filtrés par membrane filtrante de 0,22 μm ou traités par centrifugation pour éliminer les particules en suspension et empêcher le blocage de la plaque de tamis à tête de colonne. Pour les échantillons biologiques contenant des protéines ou des lipides, une purification supplémentaire par extraction en phase solide (SPE) est recommandée.

2. Contrôle de pression et de débit

- respecter strictement la pression maximale tolérée (généralement ≤ 400 bar) selon les instructions de la colonne chromatographique, la surpression provoquant des dommages irréversibles à la résine.

- avant de démarrer la pompe, vous devez exclure les bulles de la ligne, il est recommandé d'augmenter progressivement la pression à faible débit (0,3 ~ 0,6 ml / min), d'éviter l'entrée de bulles dans le lit de la colonne affecte l'efficacité de séparation.

II. Entretien périodique et régénération

1. Procédure de rinçage et d'équilibrage

- rinçage quotidien: après la fin de l'analyse quotidienne, la colonne est rincée successivement avec de l'eau désionisée, de la lessive à faible concentration telle que NaOH 50 mm pour éliminer les ions résiduels.

- régénération en profondeur: si l'effet de la colonne diminue, la méthode d'élution en gradient peut être utilisée:

- rinçage avant: eau pure → acétonitrile (80%) → solution de NaCl 0,5 m, chaque étape dure 30 minutes;

- lavage inverse: changer le sens d'entrée / sortie, rincer à un débit de 0,5 ml / min pendant 1 heure, peler les impuretés adsorbées sur la plaque écran.

2. Prévention et contrôle de la contamination microbienne

- le corps de la colonne est rincé chaque semaine avec un tampon contenant 0,1% d'hypochlorite de sodium pour inhiber la prolifération bactérienne. Si des fluctuations de la ligne de base ou une augmentation anormale de la pression sont observées, le noyau de la colonne est immédiatement immergé dans une solution d'éthanol à 70% pendant 2 heures, puis rincé à l'eau stérile.

Iii. Gestion de stockage à long terme

1. Optimisation des conditions de conservation

- paramètres environnementaux: la température de stockage est strictement contrôlée à 15 ~ 25 ℃, humidité relative 30% ~ 70%, pour éviter le vieillissement de la résine causé par la lumière directe du soleil.

- sélection du conservateur: l'utilisation d'un tampon tris (pH 7,0) contenant 0,5 m de NaCl ou d'une solution éthanolique à 20% est recommandée pour maintenir l'état humide de la résine et empêcher la reproduction microbienne.

2. Encapsulation et identification

- les deux extrémités du corps de la colonne doivent être fixées avec un bouchon d'étanchéité spécial, la feuille d'aluminium extérieure est protégée de la lumière et placée dans la boîte d'emballage d'origine pour la fixation.

- l'étiquette indique: le type de colonne, la date de la dernière utilisation, le type de liquide de conservation et la date d'expiration, la saisie synchrone dans le système de gestion des actifs du laboratoire.

Iv. Stratégies spéciales de réaction aux scénarios

1. Traitement de séchage accidentel

- si le lit de la colonne est exposé à l'air pendant plus de 30 minutes, procédez immédiatement comme suit:

- raccorder un dispositif de dégazage en ligne pour infiltrer le noyau de la colonne à faible débit d'eau pure (0,2 ml / min) pendant 12 heures;

- passage progressif à une activation par une solution saline à forte concentration (kno₃ 1 m), suivi de la récupération théorique du nombre de plateaux.

2. Enlèvement de substance fortement retenue

- pour les polluants organiques, par la méthode alternée "base - acide":

- décomposer les matières organiques en les rinçant d'abord avec une solution de NaOH 1 m pendant 2 heures;

- neutraliser les groupements alcalins résiduels avec du hno₃ 0,1 m et enfin laver à l'eau désionisée jusqu'à neutralité.

V. alerte précoce aux risques et allongement de la durée de vie

1. Indicateurs de suivi des performances

- Établir un fichier de paramètres clés: nombre de plateaux théoriques ≥ 10 000 N / M, facteur de symétrie 0,9 ~ 1,5, augmentation de la pression < 10% taux de croissance mensuel moyen.

- la procédure de régénération forcée est lancée lorsque le degré de séparation chute à 70% de la valeur initiale.

2. Protection contre les dommages mécaniques

- les collisions, les flexions ou les secousses violentes du corps de colonne sont interdites et doivent être remplies de mousse tampon et étiquetées "fragile" lors du transport.

Grâce aux mesures de conservation systématiques décrites ci - dessus, il est possible de prolonger efficacement la durée de vie de la colonne échangeuse d'anions au - delà de 3 ans, tout en garantissant la précision et la reproductibilité des résultats de séparation.