Partagé avec vous il y a quelque tempsPCRContrôle du processus de réactionVenez discuter aujourd'huiPCRLe mode opératoire. On peut dire que c'est toutPCRLe maillon le plus négligé et pourtant essentiel du processus expérimental.

Voici un petit résumé de certaines de vos expériences initiales, qui ne représentent que des opinions personnelles.

Commencez par dire la configuration du système (chaque composant est séparé, non prémélangé). Calculez le volume de chaque composant requis avant de configurer, configurez - le uniformément avant de procéder au fractionnement. Certains camarades de classe peuvent avoir des réactifs pour les maux de cœur, aime la configuration à trou unique… mais pour les expériences, obtenir des résultats efficaces en une seule fois est la plus grande économie. Lors de la configuration du système, Notez l'ordre d'ajout des composants: d'aborddH₂O,Les Constituents restants sont ajoutés successivement par taille volumique. Lors de l'évacuation du liquide, la tête d'aspiration est emprisonnée dans la rangée de liquide sous le niveau du liquide,Il est strictement interdit d'aspirer et de lubrifier à plusieurs reprises la tête du pistolet in situ après l'expulsion du liquide (amorces, enzymes, pochoirs nécessitent une attention particulière).La tête d'aspiration a une certaine capacité d'adsorption, après que le liquide a été expulsé, comme dans les sections de groupe de lubrification in situ sont réabsorbés à la tête d'aspiration, après trois ou cinq lavages de lubrification peut entraîner une perte importante de composants cibles. Si vous voulez transférer suffisamment les composants à l'intérieur de la tête d'aspiration, changez de position pour dégraisser la tête d'aspiration. Le mélange du système doit également être noté, peut être soufflé lentement avec une pipette de la gamme appropriée5-10Une fois, il peut également être mélangé lentement à l'envers; S'il est nécessaire de mélanger avec un oscillateur Scroll, la vitesse de rotation est contrôlée autant que possible dans600rpmCi - dessous, si la vitesse de rotation est trop rapide, les dommages à l'enzyme sont plus importants, et la différence entre la courbe du gabarit de faible copie et le saut sera plus évidente. Le système est divisé enpcrLorsque le tube de réaction, la pipette maintientOpération "sucer une douzaine", pas facile à générer des bulles.

Encore un environnement expérimental. Le cliché est de configurer le système de réaction à l'intérieur de la table ultra - propre, ajouter des modèles à l'intérieur de l'armoire de biosécurité. À l'intérieur de la table ultra - propre, il n'y aura pas beaucoup de problèmes en suivant le fonctionnement habituel; Les armoires de biosécurité sont une zone de catastrophe majeure pour la pollution par aérosols. L'aérosol à l'intérieur de l'armoire de sécurité biologique est principalement dérivé de la tête de décharge après l'échantillonnage, l'armoire de sécurité biologique est dominée par le vent circulant, le gabarit résiduel à l'intérieur de la tête de décharge sera facilement imprégné de l'environnement intérieur de l'armoire de sécurité avec le vent circulant, de sorte que chaque expérience doit être terminée à temps pour emballer la tête de décharge et retirer l'armoire de sécurité. Surtout rencontré midi n'a pas terminé toute l'expérience après - midi encore continuer à exploser le foie, assurez - vous de nettoyer la poubelle à l'intérieur de la tête de défausse, si personne ne l'utilise, essuyez après l'irradiation UV. Nettoyage du comptoir après l'expérience et l'élimination par ultraviolet sont des opérations de base, mais doivent être effectivement mis en place.

Enfin, partagez comment les expériences de porosité peuvent fonctionner pour améliorer le faisceau de courbes. Lors de la configuration des pores réactifs, vous pouvez mélanger et assembler tous les modèles et systèmes de pores réactifs trou par trou en référence au fonctionnement du système de configuration unifié. Cela réduit efficacement le risque de trous de saut. S'il s'agit d'une amplification à faible copie (Ctvaleur33Plus tard, la courbe commence), il n'est pas recommandé de mélanger le modèle dans le système réactionnel et de le diviser, à ce stade, le modèle d'ajout trou par trou est plus sûr (l'influence de la distribution de poisson est évidente).

Est - ce que vous vous sentez fort à ce moment - là, terrible, impatient de vouloir expérimenter? Ne vous précipitez pas d'abord, travaillez pour le bien, vous devez d'abord en tirer profit. Concentration de technologie de bohengPCRLe mètre16Année, disponible pour vous toutes sortes de gradientsPCRInstruments etQla PCRInstrument, aidez vos recherches!