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Hangzhou Baiheng Technology Co., Ltd
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Quelles sont les étapes de fonctionnement du PCR quantitatif à fluorescence en temps réel
Date :2025-10-30Lire :2
PCR - mètre quantitatif de fluorescence en temps réelC'est l'instrument utilisé pour la mesure de fluorescence, en utilisant la méthode d'acquisition de fluorescence latérale, 6 canaux de fluorescence simultanément, dans 5S peut compléter la détection de 96 échantillons 6 canaux de fluorescence, économisant considérablement le temps de détection. Ce produit dispose de puissantes fonctionnalités logicielles et matérielles pour répondre aux besoins d'utilisation des clients Multi - scénarios.
Caractéristiques du produit:
Le signal de fluorescence est fort, le bruit de fond est faible et la sensibilité est élevée.
La détection de tous les canaux fluorescents de 96 échantillons a été effectuée dans le 5S.
Conçu avec une source de lumière LED, économie d'énergie et protection de l'environnement, longue durée de vie et sans entretien.
Fonction de sortie automatique, peut fonctionner avec des postes de travail automatisés, haute efficacité de travail.
Opération côté PC, un PC peut contrôler plusieurs instruments, peut exécuter plusieurs groupes d'expériences à tout moment.
L'analyse logicielle est puissante et permet une analyse qualitative / quantitative, HRM、 Génotypage, etc.
Préparation avant l'expérimentation:
Sélection des consommables: Sélectionnez le tube octolink adapté, la plaque 96 puits ou la plaque 384 puits en fonction du modèle d'instrument, la configuration de l'instrument doit être confirmée à l'avance.
Préparation des réactifs: Placez les réactifs tels que le prémélange QPCR, l’adn pochoir, les amorces, l’eau sans enzymes, etc. sur la boîte à glace et placez - les dans une armoire de biosécurité.
Vérification de l'instrument: Entrez le mot de passe après le démarrage et lancez le logiciel une fois l'auto - test terminé (le voyant devient vert).
Configuration du système de réaction:
Réactifs mélangés: Calculez la quantité selon les instructions, ajoutez le prémélange, l'eau sans enzymes, les amorces dans le tube EP, mélangez à l'envers.
Dosage: ajouter le mélange dans les deux colonnes à gauche de l'octet et le gabarit à droite, deux parallèles pour chaque concentration.
Centrifugation: centrifugation instantanée après avoir fermé le couvercle du tube pour assurer un mélange homogène de la solution.
Opération sur instrument:
Chargement de l'échantillon: éjectez le chariot de l'instrument et placez le tube octolink ou la plaque 96 trous (adaptateur requis pour le tube octolink), en prenant soin d'un placement symétrique et équilibré.
Programme de configuration:
Sélectionnez le type d’expérience (par exemple, sybr Green).
Régler le programme de température (p. ex. dénaturation 95°c 30s, phase d'amplification 95°c 5S, 60°C 30s, 40 cycles).
Confirmez la température du couvercle chaud, le volume du système réactionnel (par exemple, 20 μl).
Démarrer l'exécution: commencez l'expérience après avoir sauvegardé le programme et ne tirez pas sur la cellule de réaction pendant le processus.
Analyse des résultats:
Acquisition de données: la courbe d'amplification et la courbe de fusion sont générées automatiquement après la fin de la procédure, il est nécessaire de vérifier que la courbe est lisse et que les résultats de porosité sont homogènes.
Réglage du seuil: dans le cas d'une expérience qualitative (par exemple, détection de virus), vous devez définir un contrôle négatif / positif et ajuster manuellement le seuil pour améliorer la précision.