Lors de l'échantillonnage microbiologique, la contamination croisée peut provenir de résidus d'équipement, de l'exploitation par le personnel, de micro - organismes environnementaux ou d'une contamination mutuelle entre échantillons, nécessitant des mesures strictes de prévention de la contamination de l'ensemble du processus. Voici un guide d'utilisation normalisé et les points techniques pour les scénarios:
I. stérilisation de l'équipement et des consommables avant échantillonnage
1. Spécifications de stérilisation du matériel
Équipement réutilisable:
Tête d'échantillonnage de métal (par exemple, échantillonneur à percussion): autoclave à la vapeur à 121 ° C pendant 20 minutes (GB / t38512 - 2020) ou utiliser de l'éthanol à 70% + brûlure à la flamme (pour traitement d'urgence sur site).
Composants en plastique (par exemple, ligne de pompe de prélèvement): immersion avec de l'acide peracétique à 0,1% pendant 30 minutes, rinçage à l'eau stérile 3 fois, irradiation UV après séchage à plat (254 nm, ≥ 30 minutes).
Consommables jetables:
Les boîtes de pétri, les sacs d'échantillonnage, etc., doivent être sélectionnés avec un produit stérilisé par irradiation (irradiation au cobalt - 60, dose ≥ 25 kgy), vérifier l'intégrité de l'emballage avant de le déballer (norme ISO11607 - 1).
2. Vérification de l'effet de stérilisation
Suivi biologique après chaque stérilisation: placer les bandes de spores atcc7953 de Bacillus adipophilus thermophilus, incuber après stérilisation (56°c, 48 heures), le nombre de colonies doit être de 0 (gb8599 - 2021).
II. Système anti - pollution opérationnel sur le site d'échantillonnage
1. Lignes directrices pour le fonctionnement stérile du personnel
Exigences de protection tertiaire:
Environnement commun: porter des vêtements de laboratoire jetables + des gants médicaux (par exemple, des gants en nitrile) et essuyer la surface des gants avec de l'éthanol à 75% avant l'échantillonnage.
Environnements à haut risque (p. ex. échantillons cliniques): il est nécessaire de porter un isolant stérile + des lunettes de protection + des gants à double couche et de changer les gants externes tous les 1 échantillon.
Spécifications de l'action:
Évitez de dépasser le bras au - dessus de l'orifice d'échantillonnage lors de l'échantillonnage, en gardant la tête d'échantillonnage à ≥ 30 cm du corps et la direction de la respiration à un angle de 90° par rapport à l'orifice d'échantillonnage.
Il est interdit de ranger les cheveux, de toucher le visage dans la zone d'échantillonnage et, pour ajuster l'équipement, de changer les gants ou de désinfecter les mains au préalable.
2. Zonage spatial et contrôle du flux d'air
Division de la zone d'échantillonnage:
Mettre en place une zone d'opération stérile de 50 cm x 50 cm, pulvériser le plateau avec de l'éthanol à 75% pour former une bande de désinfection et placer l'échantillonneur au centre de la zone.
Les scénarios de pureté élevée, tels que les salles blanches de classe iso5, doivent être exploités à l'intérieur d'un banc à flux laminaire (vitesse du vent 0,36 - 0,54 M / s) ou d'une armoire de biosécurité (classe BSc - II).
Contrôle des perturbations du flux d'air:
Fermez les portes et les fenêtres avant l'échantillonnage, arrêtez le système de climatisation pendant 10 minutes (évitez que le flux d'air ne transporte des micro - organismes exogènes) et contrôlez la marche du personnel à 1 mètre.
Iii. Mesures d’isolement pour le processus de prélèvement d’échantillons
1. Programme anti - croisement d'échantillonnage par lots
Désinfection par intervalles de lots:
Après chaque échantillon, essuyez le boîtier de l'échantillonneur, l'orifice d'échantillonnage et le plan de travail avec de l'éthanol à 75%, puis effectuez le prélèvement suivant 5 minutes plus tard.
Si différents types d'échantillons sont prélevés (par exemple, des échantillons environnementaux et des échantillons cliniques), il est nécessaire de remplacer l'ensemble complet des têtes et des lignes d'échantillonnage afin d'éviter toute confusion microbienne résiduelle.
2. Techniques d'isolement pour les échantillons spéciaux
Traitement des échantillons à haute concentration:
Lors du traitement d'échantillons à forte charge tels que les eaux usées, les matières fécales, etc., utilisez un échantillonneur avec filtration à pression négative (p. ex., milliporeez - PAK) qui scelle immédiatement la cartouche après l'échantillonnage pour empêcher la dispersion des aérosols.
Échantillonnage bactériogène:
Utilisez une tête d'échantillonnage de type biosécurité (par exemple, un échantillonneur fermé avec filtration HEPA) et placez - la dans un réservoir métallique étanche (papier absorbant à couche interne + solution d'hypochlorite de sodium à 0,5%) après l'échantillonnage.