L'effet d'échantillonnage de l'échantillonneur de micro - organismes en suspension dans l'air est influencé par de nombreux facteurs, dont la performance de l'instrument, les spécifications opérationnelles, les conditions environnementales et le traitement des échantillons. Voici les principaux facteurs d’influence et leur analyse:
I. performance de l'instrument lui - même
Précision du débit d'échantillonnage
Effet: un débit trop élevé ou trop faible peut entraîner des écarts dans le volume d'échantillonnage, ce qui a une incidence directe sur le calcul de la concentration microbienne (p. ex., unité formant colonie CFU / m³).
Exemple: si le débit nominal est de 28,3 L / min, mais que le débit réel est faible, il est possible que le micro - organisme ne soit pas examiné dans un environnement à faible concentration.
Contre - mesure: calibrez régulièrement le débit avec un débitmètre à membrane de savon, assurez - vous que l'erreur est ≤ ± 5%.
Conception de la tête d'échantillonnage et ouverture
Principe: la taille de la taille des pores de la tête d'échantillonnage détermine la gamme de tailles de particules dans laquelle les micro - organismes peuvent être capturés (par exemple, un échantillonneur à impact dépend d'un impact inertiel, plus la taille des pores est petite, plus la taille des particules capturées est petite).
Risque: des pores bouchés ou mal conçus peuvent entraîner une diminution de l'efficacité du dépôt microbien de grosses particules ou une fuite de petites particules avec le flux d'air.
Entretien: nettoyez la tête d'échantillonnage après chaque prélèvement pour éviter que les particules résiduelles n'affectent les prélèvements ultérieurs.
Milieu de collecte (milieu de culture / Membrane filtrante)
Sélection du type: différents micro - organismes doivent correspondre à un milieu de culture spécifique (par exemple, gélose nutritionnelle pour les bactéries, gélose maltée pour les champignons), et une défaillance du milieu de culture ou un écart de composition peut entraîner une absence de test.
Contrôle de l'humidité: le séchage excessif du milieu de culture peut réduire la survie microbienne, et l'humidité excessive est susceptible de provoquer la dispersion du liquide bactérien, ce qui affecte le nombre de colonies.
Conditions de stockage: le milieu de culture doit être conservé au réfrigérateur (2 ~ 8 ℃) à l'abri de la lumière et éviter la détérioration.
II. Spécifications opérationnelles et facteurs humains
Hauteur et position d'échantillonnage
Différence d'environnement: 0,5 ~ 1,5 mètres du sol est la ceinture respiratoire humaine, la hauteur d'échantillonnage conventionnelle; Mais les salles blanches doivent être échantillonnées au - dessus du plan de travail selon la norme (par exemple iso14644).
Évitez les interférences: Tenez - vous à l'écart des portes et fenêtres, des évents ou des zones où les gens se déplacent fréquemment pour éviter que les perturbations du flux d'air ne provoquent des échantillons inégaux.
Temps d'échantillonnage et fréquence
Contrôle de la durée: la durée excessive d'un seul prélèvement peut entraîner un dessèchement du milieu de culture ou une prolifération microbienne (particulièrement dans des environnements à forte concentration), sous réserve d'un ajustement en fonction de la concentration estimée (par exemple, elle peut être portée à 30 minutes pour les faibles concentrations et à 10 minutes pour les concentrations élevées).
Répétabilité: il faut prélever ≥ 3 échantillons parallèles dans la même zone, ce qui réduit les erreurs accidentelles.
Fonctionnement stérile
Risque de contamination: le fait de ne pas stériliser la surface de l'instrument (p. ex., la tête d'échantillonnage, la boîte de pétri) avant l'échantillonnage ou de toucher la zone d'échantillonnage avec les mains pendant la manipulation peut entraîner l'introduction de micro - organismes exogènes.
Spécification du processus: essuyez la tête d'échantillonnage avec de l'alcool à 75%, portez des gants stériles et changez rapidement de milieu pour éviter une exposition prolongée.
Iii. Conditions environnementales
Température humidité
Température: haute température (> 30 ℃) peut accélérer le séchage du milieu, basse température (< 10 ℃) inhibera l'activité microbienne, il est recommandé de contrôler la température ambiante d'échantillonnage à 15 ~ 25 ℃.
Humidité: une humidité élevée (> 80% HR) peut facilement provoquer la propagation des colonies, une humidité faible (< 30% HR) inactive la déshydratation microbienne, l'humidité idéale est de 40% ~ 60% HR.
Flux et pression d'air
Effets turbulents: de forts courants d'air (p. ex., ventilateurs, évents de climatisation) peuvent modifier la distribution microbienne, ce qui entraîne un échantillonnage inégal; Les environnements à pression négative, tels que les armoires de biosécurité, nécessitent un ajustement de la différence de pression d'air de compensation du débit d'échantillonnage.
Correction de la pression atmosphérique: en haute altitude, le volume d'échantillonnage réel doit être converti en fonction de la pression atmosphérique (formule: volume réel = volume nominal × (pression atmosphérique locale / pression atmosphérique standard)).
Contamination de fond
Nettoyage avant l'échantillonnage: si l'environnement vient d'être désinfecté (p. ex., exposition aux UV, fumigation chimique), attendez au moins 30 minutes pour éviter que les résidus de désinfectant inhibent la croissance microbienne.
Contamination croisée: lorsque plusieurs échantillonneurs sont utilisés en même temps, vous devez maintenir l'espacement ≥ 1 mètre pour empêcher les flux d'air échantillonnés d'interférer les uns avec les autres.
Iv. Transport et manipulation des échantillons
Conditions de transport
Vieillissement: après l'échantillonnage doit être envoyé à l'examen dans les 2 heures, si le délai doit être réfrigéré (2 ~ 8 ℃), mais les échantillons de champignons doivent être conservés à la température ambiante (pour éviter la croissance inhibitrice à basse température).
Protection contre les chocs: évitez les chocs violents pendant le transport et évitez le déplacement des colonies en cas de collision entre le milieu de culture et la tête de prélèvement.
Conditions de culture
Température et temps: les bactéries sont généralement cultivées pendant 48 heures à 35 ~ 37 ℃, les champignons 25 ~ 28 ℃ pendant 5 ~ 7 jours, le manque de temps entraînera la formation incomplète de colonies.
Environnement aérobie / anaérobie: certains microorganismes ont besoin d'un environnement gazeux spécifique (p. ex., un incubateur de co₂) et les conditions non remplies peuvent entraîner une absence d'examen.
V. Autres facteurs
Caractéristiques microbiologiques
Distribution de la taille des particules: les micro - organismes de l'air sont nombreux sous forme d'aérosol (taille des particules 0,1 ~ 10 μm), et l'efficacité de capture de différents échantillonneurs pour différentes tailles de particules est différente (par exemple, les échantillonneurs à percussion à six étages peuvent isoler différents micro - organismes de taille de particules).
Viabilité: certains micro - organismes (p. ex., virus, Bacillus) nécessitent un traitement spécial (p. ex., inactivation immédiate après échantillonnage ou utilisation de milieux de culture enrichis en éléments nutritifs).
Cycles d'étalonnage et de maintenance
Vérification périodique: l'instrument est entièrement étalonné (débit, efficacité de la tête de prélèvement, performance du milieu de culture) au moins une fois par semestre et l'étanchéité des voies aériennes doit être vérifiée après une utilisation prolongée.
Le contrôle systématique de ces facteurs améliore considérablement la précision et la fiabilité de l'échantillonnage microbiologique de l'air et fournit un support de données efficace pour la surveillance de l'environnement (hôpitaux, usines alimentaires, laboratoires, etc.).