Le nettoyage de la colonne de chromatographie capillaire doit combiner le type de contamination, les caractéristiques de la phase stationnaire et les spécifications de fonctionnement, en détaillant ci - dessous leurs processus de nettoyage et leurs précautions dans plusieurs dimensions:
I. méthodes de nettoyage de base
- méthode de rinçage au solvant
- scénarios applicables: polluants organiques non polaires ou moyennement polaires (par exemple graisses, solvants résiduels).
- points opérationnels:
- choix du solvant: utiliser de préférence le méthanol, l'acétone ou le n - hexane et, si nécessaire, le dichlorométhane (solvants chlorés à utiliser avec prudence).
- mode de rinçage: injecter la bonne quantité de solvant à l'aide d'une micro - seringue, en s'appuyant sur la gravité ou un gaz porteur à basse pression pour pousser le solvant à travers la colonne de chromatographie, répéter plusieurs fois jusqu'à ce que le contaminant soit dissous et expulsé.
- contre - indiqué: les colonnes de chromatographie de la phase stationnaire non liée / réticulée désactivent cette méthode afin de ne pas perdre la phase stationnaire.
- méthode de vieillissement à haute température
- scénarios applicables: composés à point d'ébullition élevé (p. ex., polymères, résidus réfractaires).
- points opérationnels:
- réglage de la température: 10 - 20 ° C en dessous de la température maximale d'utilisation de la colonne de chromatographie pendant 2 - 8 heures.
- débit de gaz porteur: maintenir un faible débit de 2 à 5 ml / min pour faciliter l'évacuation des matières volatiles.
- remarque: si la ligne de base reste instable après vieillissement, elle doit être traitée en combinaison avec d'autres méthodes.
- méthode de la tête de colonne de coupe
- scénarios applicables: lorsque la contamination physique (p. ex. dépôt noir à l'entrée de l'échantillon) ou d'autres méthodes sont inefficaces.
- points de fonctionnement: Coupez les têtes de colonne fortement contaminées de 1 à 5 cm, les incisions doivent être aplaties pour éviter d'affecter l'effet de la colonne.
II. Programme de traitement de la pollution profonde
- contamination des échantillons protéiques / biologiques
- agent nettoyant: acide trifluoroacétique à 0,1% + Isopropanol à 20%.
- Etape: rinçage à faible débit, passage progressif à une forte proportion de phase organique.
- dépôt tampon de sels / ions métalliques
- nettoyant: solution aqueuse à 5% de méthanol (rinçage direct à l'eau pure interdit!).
- point critique: le débit est contrôlé en dessous de 0,3 ml / min, ce qui empêche le salage d'aggraver le colmatage.
- accumulation de lipides / substances hydrophobes
- agent de nettoyage: tétrahydrofuranne (THF), chloroforme et autres solvants puissants, qui doivent ensuite être remplacés par le système d'origine.
Iii. Spécifications opérationnelles et contrôle des risques
- démontage et installation: après avoir coupé la source d'air, retirez l'écrou d'extrémité de l'entrée d'échantillon, la bague d'étanchéité et l'ancien segment de colonne, l'installation de la nouvelle colonne nécessite un contrôle précis de la profondeur de l'entrée d'échantillon.
- surveillance de la pression: surveillance en temps réel de la pression du système pendant le nettoyage, élévation anormale arrêt immédiat de la pompe pour vérifier l'état du filtre en ligne.
- pureté du solvant: utilisez toujours des réactifs de qualité chromatographique pour éviter l'introduction de nouvelles impuretés.
Le nettoyage de la colonne de chromatographie capillaire doit suivre le principe de la « médication symptomatique», combinant de nombreux moyens tels que l'élimination physique, la dissolution chimique et la volatilisation thermodynamique. La maintenance préventive quotidienne peut réduire considérablement la fréquence des nettoyages en profondeur, tandis que face à la contamination complexe, il est recommandé d'établir un fichier d'utilisation de la colonne chromatographique qui enregistre les paramètres de chaque nettoyage et les changements de performance pour fournir un support de données pour la maintenance de précision.