Flux de travail entièrement automatisé pour le dépistage de médicaments pour les organoïdes intestinaux humains (OHI): inoculation des organoïdes sur une plaque de base en U de 96 puits à l'aide du système cellxpress.ai, suivi par imagerie par lumière transmise toutes les 24 heures, traitement par ajout de composés anticancéreux le jour 2. Imagerie des cellules vivantes avec le système imagexpress hcs.ai le 5ème jour après la vaccination (analyse des paramètres finaux avec une analyse phénotypique basée sur l'IA via le logiciel in Carta)

Exemple de surveillance cellxpress.ai: présentation d'organoïdes intestinaux humains cultivés dans une plaque de base en U 96 puits, imagerie par microscopie à champ ouvert (TL)

Détection de la réponse phénotypique organoïde après 72 heures de traitement du composé avec le système imagexpress hcs.ai à haute connotation

Schéma du processus expérimental.(1 - 4) Préparation et différenciation d'organoïdes: obtention d'organoïdes à partir de cellules souches pluripotentes humaines par différenciation dirigée avec la gamme de produits stemcell technologies (inoculum, milieu de formation, milieu d'amplification et milieu de différenciation); (5) Culture d'entretien d'organoïdes (6) Analyse de détection et d'imagerie: avec le système de détection à haut débit flipr Penta de Molecular Devices et le système de confocalisation imagexpress micro

Processus de préparation des organoïdes dorsaux antérieurs et médians du cerveau humain

Schéma de l'usine automatisée de cellxpress.ai modèle in vitro. Image microscopique d'un organoïde nerveux cultivé dans une plaque de 96 puits

Oscillations calciques de base des organoïdes cérébraux antérieurs dorsaux versus analyse des caractéristiques de la réponse au médicament.Les signaux fluctuants de Ca2 + ont été enregistrés par la technique d'imagerie cinétique du calcium du système flipr penta et analysés avec le logiciel Peak pro 2. Les résultats montrent: (à gauche) que les organoïdes présentent une activité électrophysiologique basale stable sans ajout de composés; (image de droite) Changement spécifique du mode d'oscillation du calcium après addition du composé spécifié (illustré par une concentration de 0,4 µm avec un total de 4 gradients de dose testés)

Le système cellxpress.ai exécute une instance. (A) Le système d'affichage effectue une opération de changement de milieu dans une plaque de 384 puits. (b) images en champ ouvert de sphères cardiaques de Coculture tricellulaire 3D dérivées d'IPSC dans des plaques de 96 puits. (c) segmentation automatique et analyse quantitative dans le processus de culture 3D via Custom module editor (CME)

(A) imagerie de micro - tissus cardiaques colorés avec le colorant Calcium 6 pour la détection flipr à l'aide du système cellxpress.ai. (b) affichage d'une image de projection (10x) de la meilleure distance focale des cellules colorées avec des colorants actifs cellulaires, y compris Hoechst (bleu), calcein AM (vert) et ethd (rouge). Les cellules ont été traitées avec des composés cardiotoxiques, dont 100 µm de Doxorubicine et 10 µm d'astrosporine. L'analyse d'image a évalué la surface de la sphère cellulaire et l'intensité moyenne de différents groupes fluorescents. L'activité cellulaire peut être présentée par un rapport normalisé de l'intensité moyenne de fluorescence des cellules vivantes / mortes

La détection du calcium a été réalisée à l'aide de billes cellulaires 3D. Oscillations de calcium (concentration en µm) mesurées après traitement de globules de cellules cardiaques 3D avec différents composés. Les formes d'onde Ca2 + ont été enregistrées par imagerie cinétique du calcium à l'aide du système flipr penta et analysées à l'aide du logiciel Peak pro 2. Après addition du composé spécifié, la trace représentative montre que le mode de forme d'onde qu'elle produit est très différent du signal témoin. La fréquence de crête, l'amplitude, l'allongement de crête et d'autres mesures ont été évaluées pour différents composés et concentrations